GB T 20772-2008 动物肌肉中461种农药及相关化学品残留量的测定.液相色谱-串联质谱法.pdf
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1、ICS 67050X 04 凰园中华人民共和国国家标准GBT 20772-2008代替GBT 20772 2006动物肌肉中46 1种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱一串联质谱法Determination of 46 1 pesticides and related chemicals residuesin animaI muscles-LCMSMS method2008-12-31发布 2009050 1实施车瞀徽鬻瓣警糌瞥星发布中国国家标准化管理委员会捉19目 次GBT 20772-2008前言l 范围2规范性引用文件一3原理-4试剂和材料5 1义器-6试样制备与保存-7测定步骤8结
2、果计算一9精密度-附录A(资料性附录)461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表一附录B(资料性附录)461种农药及相关化学品监测离子对、碰撞气能量、源内碎裂电压和保留时间附录C(资料性附录)461种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图 附录D(资料性附录)461种农药及相关化学品精密度数据表附录E(资料性附录)461种农药及相关化学品英文中文名称对照索引(按英文字母顺序),222556加的他刖 置GBT 20772-2008本标准代替GBT 20772 2006动物肌肉中380种农药及相关化学品残留量测定方法 液相色谱一串联质谱法。本标准与GBT
3、 20772-2006相比,主要变化如下:可测定的农药由380种增加到461种;增加了负组的测试条件。本标准的附录A、附录B、附录c、附录D、附录E为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。本标准主要起草人:庞国芳、曹彦忠、范春林、贾光群、郑锋、王雯雯、连玉晶、张进杰、李学民、刘永明、石玉秋。本标准于2006年首次发布。动物肌肉中461种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法GBT 20772-20081范围本标准规定了猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中461种农药及相关化学品(参见附录A和
4、附录E)残留量液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中461种农药及相关化学品的定性鉴别,396种农药及相关化学品残留量的定量测定。本标准定量测定的396种农药及相关化学品的方法检出限为004俐kg482 mgI【g(参见附录A)。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GBT 63791 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分
5、:总则与定义(GBT 63791-2004,IS0 5725-1:1994,IDT)GBT 63792测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GBT 637922004,lSO 57252:1994,IDT)GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682-2008,1SO 3696:1987,MOD)GBT 969519肉与肉制品取样方法3原理用环己烷一乙酸乙酯均质提取试样,凝胶渗透色谱净化,液相色谱一串联质谱仪检测,外标法定量。4试剂和材料水为GBT 6682规定的一级水。41乙腈:色谱纯。42甲苯:色谱纯。43环己烷:色
6、谱纯。44乙酸乙酯:色谱纯。45甲醇:色谱纯。46异辛烷:色谱纯。47微孔过滤膜(尼龙):13 mmX045 pm。48微孔过滤膜(尼龙):13 mm02“m。49 01甲酸溶液(体积分数)。410 5 mmolL乙酸铵溶液。411无水硫酸钠:分析纯。用前在650灼烧4 h,贮于干燥器中,冷却后备用。412环己烷+乙酸乙酯混合溶剂(1+l,体积比)。413乙腈+水(3+2,体积比)。GBT 20772-2008414农药及相关化学品标准物质:纯度95。415农药及相关化学品标准溶液4151标准储备溶液分别称取5mg10mg(精确至01 mg)农药及相关化学品各标准物分别于10mI,容量瓶中根据
7、标准物的溶解性选甲醇、甲苯、丙酮、乙腈或异辛烷等溶剂溶解并定容至刻度(溶剂选择参见附录A)。标准储备溶液避光04保存,可使用一年。4152混合标准溶液(混合标准溶液A、B、c、D、E、F和G)按照农药及相关化学品的性质及保留时间,将461种农药及相关化学品分成A、B、c、D、E、F、G七个组,并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度,确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对461种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液浓度参见附录A。依据每种农药及相关化学品的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度,移取一定量的单个农药及相关化学品标准储备溶液于100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。混
8、合标准溶液避光04保存,可使用一个月。4153基质昆合标准工作溶液基质混合标准工作溶液是用空白样品提取液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液A、B、c、D、E、F和G组,用于做标准工作曲线。基质混合标准工作溶液应现用现配。5仪器51 液相色谱一串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI)。52凝胶渗透色谱仪。53分析天平:感量01 nag,001 g。54旋转蒸发器。55均质器:最大转速为24 000 rrain。56离心机:最大转速为4 200 rmin。57氮气吹干仪。58鸡心瓶:100 mL。59移液器:1 mL,5 mL。510样品瓶:2 mL带聚四氟乙烯旋盖。6试样制备与保存61试样的制备按
9、GBT 96951 9抽取的样品用绞肉机绞碎,充分混匀,用四分法缩分至不少于500 g,作为试样装入清洁容器内,密封后,标明标记。62试样的保存将试样于18冷冻保存。7测定步骤71提取称取1 0 g试样,精确至001 g。放入盛有20 g无水硫酸钠(411)的50 mI离心管中,加入35 mI环己烷+乙酸乙酯混合溶剂(412)。用均质器(55)在1 5 000 rmin均质提取15 min,再用离心机(56)在3 000 rrain离心3 rain。上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗,收集于1 00 mL鸡心瓶中(58),残渣用35 mL环己烷+乙酸乙酯混合溶剂重复提取次,经离心过滤后,合并两
10、次提取液,将提2GBT 20772-2008取液于40水浴用旋转蒸发器(54)旋转蒸发至约5 mL,待净化。若以脂肪计,将提取液收集于已称重的鸡心瓶中。用旋转蒸发器在40水浴蒸发至5 mI。,然后在50用氮气浓缩仪吹干残存的溶剂鸡心瓶称重后,记下脂肪质量,待净化。72凝胶渗透色谱净化721条件a)净化柱:400 mmX 25 mm内装B10一Beads S-X3填料或相当者;b)检测波长:254 nm;c) 流动相:乙酸乙酯+环己烷(1+1,体积比);d)流速:5 mLmin;e)进样量:5 mI。;f) 开始收集时间:22 min;g)结束收集时间:40 rain。722净化将浓缩的提取液或
11、脂肪(71)用乙酸乙酯+环己烷混合溶剂溶解转移至10 mL容量瓶中,用5 mL环己烷+乙酸乙酯混合溶剂分两次洗涤鸡心瓶,并转移至上述10 mL容量瓶中,再用环己烷+乙酸乙酯混合溶剂定容至刻度,摇匀。经045“m滤膜(47)过滤人10 mI,试管中,供凝胶渗透色谱仪净化,收集22min40min的馏分于100mL鸡心瓶中,并在40水浴旋转蒸发至05mL。用氮气吹干,再用10 mL乙腈+水(3+2)溶解残渣,经02,um滤膜(48)过滤后,供液相色谱串联质谱进行检测。同时取不含农药及相关化学品的肌肉样品,按71和72步骤制备空白样品提取液,用于配制基质混合标准工作溶液。73液相色谱-串联质谱测定7
12、31条件7311 A、B、c、D、E、F组农药及相关化学品液相色谱一串联质谱测定条件a)色谱柱:ZORBAX SBC18,35 pm,100 mm21 ram(内径)或相当者;b)流动相及梯度洗脱条件见表1;表1 流动相及梯度洗脱条件步骤 总时间,rain 流速(pI,min) 流动相A(01甲酸水) 流动相B(乙腈)0 000 400 990 1 0l 3 00 400 700 3002 6 00 400 600 40 03 900 400 60 0 4004 15 00 400 400 6005 1 9 00 400 l 0 9906 23 00 400 l 0 99 07 2301 40
13、0 990 10c) 柱温:40;d)进样量:10 pI。;e)离子源:ESI;f) 扫描方式:正离子扫描g)检测方式:多反应监测h)电喷雾电压:4 000 V;GBT 20772-2008i)雾化气压力:028 MPa;j) 干燥气温度:350;k)干燥气流速:10 Lmin;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。7312 G组农药及相关化学品液相色谱一串联质谱测定条件a) 色谱柱:ZORBAX SBC。m3 5 pm,100 mm21 ram(内径)或相当者b)流动相及梯度洗脱条件见表2;表2流动相及梯度洗脱条件步骤 总时间min 流速(uLmin) 流动相A(5 mmol
14、L乙酸铵水) 流动相B(乙腈)0 000 400 990 101 3 00 400 700 30 02 6 00 400 600 40 03 900 400 600 4004 1 500 400 400 6005 1900 400 10 9906 2300 400 10 9907 2301 400 990 l 0c)柱温:40;d)进样量:10“I,;e)离子源:ESI;f) 扫描方式:负离子扫描;g)检测方式:多反应监测;h)离子喷雾电压:4 000 V;i)雾化气压力:028 MPa;j) 干燥气温度:350;k)干燥气流速:10 Lmin;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附
15、录B。732定性测定在相同实验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致,并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现,而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致(相对丰度50,允许20偏差;相对丰度2050,允许25偏差;相对丰度1020,允许30偏差;相对丰度lo,允许50偏差),则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。733定量测定本标准中液相色谱串联质谱采用外标一校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响,定量用标准溶液应采用基质混合标准工作溶液绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药及相关化学品的响应值均在仪器的线性范围内。461种农药及相关化学品
16、多反应监测(MRM)色谱图参见附录C。74平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。75空白试验除不称取试样外均按上述步骤进行。48结果计算结果按式(1)计算:x,一署黑式中:X,试样(或脂肪)中被测组分残留量,单位为毫克每千克(mgkg);G从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度,单位为微克每毫升(,ugrnL)V样品溶液定容体积,单位为毫升(mL);m样品溶液所代表试样(或脂肪)的质量,单位为克(g)。计算结果应扣除空白值。GBT 20772-20089精密度本标准精密度数据是按照GBT 63791和GBT 63792的规定确定的,获得重复性和再现性的值是以95的可信度来计算。本标准方法的
17、精密度数据参见附录D。GBT 20772-2008附杀A(资料性附录)461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表见表A1。表A1 461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表检出限 混合标准溶液序号 中文名称英文名称 溶剂(卢gkg) 浓度(mgI,)A组1 苯胺灵 propriam 55 00 甲苯 ll 002 异丙威 1 15 甲醇 0233 3,4,5-混杀威 34,5 trimethacarb 0 1 7 甲醇 0 034 环
18、莠隆 cyc|uron 0 10 甲醇 0 025 甲萘威 carbarvl 5 1 6 甲醇 l 036 毒草胺 propachlor 1 10 甲醇 0037 吡咪唑 rabenzazole 0 67 甲醇 0 138 西草净 0 07 甲醇 0 019 绿谷隆 178 甲醇 0 3610 速灭磷 0 78 甲若 0 1 611 叠氮津 aziProtryne 0 69 甲醇 0 1 412 密草通 0 04 甲醇 0 0l13 嘧菌磺胺 cyprodinil 037 甲醇 00714 播土隆 4 48 甲醇 0 9015 双酰草胺 carbeIanllde 1 82 甲醇 0 3616
19、抗蚜威 0 08 甲醇 0 0217 异嗯草松 0 21 甲醇 0 0418 氰草津 008 甲醇 0 0219 扑草净 promelryno 0 08 甲醇 0 0220 甲基对氧磷 paraoxon methyl 0 38 甲醇 0 0821 噻虫啉 thiacloprid 0 l 9 甲醇 00422 毗虫啉 lmidacloprid 11 00 甲醇 2 2023 磺噻隆 ethidimuron 0 75 甲醇 0 1524 丁嚷草酮 0 53 甲醇 0 1l25 燕麦敌 dial Late 44 60 甲醇 8 9226 乙草胺 aretochlor 23 70 甲醇 4 74表A1
20、(续)GBT 20772-2008检出限 混合标准溶液序号 中文名称 英文名称 溶剂(pgkg) 浓度(ragL)27 烯啶虫胺6 nitenPyram 856 甲醇 l 7128 盖草津 methoprolryne 0 12 甲醇 00229 二甲酚草胺 dimethenamid 2 15 甲醇 0 4330 特草灵 terrbucarb 105 甲醇 0 2l31 戊菌唑 100 甲醇 02032 腈菌唑 myclobutanil 0 50 甲醇 01033 咪唑乙烟酸8 lrnazethapyr 056 甲醇 0 1134 多效唑 paclobmrazol 029 甲醇 00635 倍硫
21、磷亚砜 fenthion sulfoxide 0 16 甲醇 0 0336 三唑醇 triadimenol 5 28 甲醇 1 0637 仲丁灵 butralin 0 95 甲醇 0 1938 螺嘿茂胺 0 l 2 甲醇 0 0l39 甲基立枯磷 tolcloJos methyl 33 28 甲醇 6 6640 甜菜胺 desmedipham 2 01 甲醇 0 404l 杀扑磷 methidathion 5 33 甲醇 1 0742 烯丙菊酯 allethrin 3020 甲醇 6 0443 二嚷磷 036 甲差 0 0744 敌瘟磷 edifenphos 038 甲醇 0 0845 丙草胺
22、 pretilachlor 017 甲醇 00346 氟硅唑 flusilazole 029 甲醇 0 0647 丙森锌4 iprovalica rb 116 甲醇 0 2348 麦锈灵 benodanil 1 74 甲醇 0 3549 氟酰胺 flutolanil 0 57 甲醇 01150 氨磺磷 famphur I80 甲醇 03651 苯霜灵 benalyxyl 0 62 甲醇 01252 苄氯三唑醇 diclobutrazoe 023 甲醇 0 0553 乙环唑 0 89 甲醇 0 1854 氯苯嘧啶醇 fenarimol 0 30 甲醇 0 0655 酞酸二环己基酯8 phlhal
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