GB T 20770-2008 粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定.液相色谱-串联质谱法.pdf
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1、ICS 67050X 04 a园中华人民共和国国家标准GBT 20770-2008代替GBT 20770-2006粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱一串联质谱法Determination of 486 pesticides and related chemicalsresidues in grains-LC_-MS-MS method200812-31发布 2009-0501实施宰瞀鹛紫瓣訾雠赞星发布中国国家标准化管理委员会仪1”目 次GBT 20770-2008前言1 范围2规范性引用文件。3原理4试剂和材料5仪器6试样制备与保存7测定步骤8结果计算9精密度附录A(资料性附
2、录)486种农药及相关化学品中文与英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表附录B(资料性附录)486种农药及相关化学品监测离子对、碰撞气能量、源内碎裂电压和保留时间一附录C(资料性附录)486种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图 附录D(资料性附录)486种农药及相关化学品精密度数据表附录E(资料性附录)486种农药及相关化学品英文中文名称对照索引(按英文字母顺序),222556扰卵铊刖 罱GBT 20770-2008本标准代替GBT 20770-2006粮谷中372种农药及相关化学品多残留测定方法 液相色谱一质谱和液相色谱一串联质谱法。本标准与GBT 20770-20
3、06相比,主要变化如下:可测定的农药品种由372种扩大为486种,增加了ESI负源检测的农药品种;改变了前处理方法,选择了新的测试仪器和测试条件。本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。本标准主要起草人:庞国芳、刘永明、范春林、曹彦忠、曹静、郑锋、连玉晶、贾光群、张进杰、李学民、吴艳萍、李金。本标准于2006年首次发布。m1范围粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱一串联质谱法GBT 20770-2008本标准规定了大麦、小麦、燕麦、大
4、米、玉米中486种农药及相关化学品(参见附录A和附录E)残留量液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于大麦、小麦、燕麦、大米、玉米中486种农药及相关化学品残留的定性鉴别,376种农药及相关化学品残留量的定量测定。本标准定量测定的376种农药及相关化学品方法检出限为002俺kgo96 mgkg(参见附录A)。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注13期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB 5491粮食
5、、油料检验扦样、分样法GBT 63791 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第l部分:总则与定义(GBT 637912004,ISO 57251:1994,IDT)GBT 63792测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GBT 637922004,IsO 57252:1994,IDT)GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682 2008,ISO 3696:1987,MOD)3原理用乙腈均质法提取试样中的农药及相关化学品,凝胶渗透色谱净化,液相色谱一串联质谱仪测定外标法定量。4试剂和材料水为GBT 6682规定的
6、一级水。41乙睛:色谱纯。42甲醇:色谱纯。43环己烷:色谱纯。44乙酸乙酯:色谱纯。45正己烷:色谱纯。46甲苯:优级纯。47丙酮:色谱纯。48异辛烷:色谱纯。49 01甲酸溶液(体积分数)。410 5 mmolL乙酸铵溶液:称取0375 g乙酸铵加水稀释至1 000 mL。411 乙腈+甲苯(3+1,体积比)。412乙腈+水(3+2,体积比)。GBT 20770-2008413乙酸乙酯+环己烷(1+1,体积比)。414无水硫酸钠:分析纯。用前在650灼烧4 h,贮于干燥器中,冷却后备用。415微孔过滤膜(尼龙):1 3 T71m02肛m和13 mm045 pm。416农药及相关化学品标准物
7、质:纯度95。417农药及相关化学品标准溶液4171标准储备溶液准确称取5 mg10 mg(精确至01 mg)农药及相关化学品各标准物分别于10 mL容量瓶中,根据标准物的溶解度和测定的需要选甲醇、乙腈、甲苯、甲苯+丙酮混合液、异辛烷等溶剂溶解并定容至刻度,溶剂选择参见附录A。标准储备溶液避光04保存,可使用一年。4172 混合标准溶液(混合标准溶液A、B、c、D、E、F和G)按照农药及相关化学品的性质和保留时间,将486种农药及相关化学品分成A、B、c、D、E、F和G七个组,并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度,确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对486种农药及相关化学品的分组及
8、其混合标准溶液浓度参见附录A。依据每种农药及相关化学品的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度,移取一定量的单个农药及相关化学品标准储备溶液于100 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光04保存,可使用一个月。4173基质混合标准工作溶液农药及相关化学品基质混合标准工作溶液是用空白样品基质溶液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液A、B、c、D、E、F和G,用于做标准工作曲线。基质混合标准工作溶液应现用现配。5仪器51液相色谱一串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESl)。52凝胶渗透色谱仪:配有400mm25ram(内径),内装BIO-Beads S-X3填料或相当的净化柱。53分析天
9、平:感量为01 mg和001 g。54均质器:最大转速为24 000 rmin。55梨形瓶:1 50 mL和250 mL。56氮气吹干仪。57离心管:80 mL。58移液器:1 mI。59样品瓶:2 mI,带聚四氟乙烯旋盖。510离心机:最大转速为4 200 rmin。511旋转蒸发器。6试样制备与保存61试样的制备按GB 5491扦取的粮谷样品经粉碎机粉碎,过20目筛,混匀,密封,作为试样,标明标记。62试样的保存试样于常温下保存。7测定步骤71提取称取10 g试样(精确至001 g),放人盛有1 5 g无水硫酸钠的具塞离心管中,加35 mL乙腈。均质2GBT 20770-2008提取1 r
10、ain,3 800 rrain离心5 min上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗,收集于梨形瓶中残渣再用30 mL乙腈提取一次,合并提取液,将提取液用旋转蒸发器于40水浴蒸发浓缩至约05 mI。,加入5 mL乙酸乙酯+环己烷(1+1)进行溶剂交换,重复两次,最后使样液体积约为5 mL,待净化。72凝胶渗透色谱净化721条件a)净化柱:400 mmX 25 mm(内径),内装BIOBeads S-X3填料或相当者;b)检测波长:254 nlTI;c)流动相:乙酸乙酯+环己烷(1+1,体积比);d)流速:5 mLmin;e)进样量:5mL;f)开始收集时间:22 min;g)结束收集时间:40 mi
11、n。722净化将上述提取液转移至10 mL容量瓶中,用5 mL乙酸乙酯+环己烷(1+1)分两次洗涤梨形瓶,并转移至上述10mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀。将样液过045 kcm微孔滤膜滤人10mL试管中,供凝胶渗透色谱仪净化,收集22 rain40 rain的馏分于200 mI。梨形瓶中并在40水浴旋转蒸发至05 mL。将浓缩液置于氮气吹于仪上吹干,迅速加入1 mL的乙腈+水(3+2)溶解残渣,混匀,经02 pm滤膜过滤,供液相色谱一串联质谱测定。73液相色谱一串联质谱测定731条件7311 A、B、C、D,E、F组液相色谱一串联质谱测定条件(ESI正离子源)a) 色谱柱:ZORBOX SBc
12、18,35 pm,100 mm21 ram(内径)或相当者;b) 流动相及梯度洗脱条件见表1;表1流动相及梯度洗脱条件步骤 总时间rain 流速(,“Lmin) 流动相A(01甲酸水) 流动相B(乙腈)O 0 00 400 990 101 3 00 400 70 0 3002 600 400 600 4003 900 400 600 40 04 15 00 400 40 0 6005 1900 400 l 0 9906 23 00 400 10 9907 23 01 400 990 10c)柱温:40;d)进样量:10 pL;e) 电离源模式:电喷雾离子化f) 电离源极性:正模式;g)雾化气:
13、氮气;GBT 20770-2008h)雾化气压力:028 MPa;i)离子喷雾电压:4 000 V;i)干燥气温度:350;k)干燥气流速:10 Lmin;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。7312 G组液相色谱一串联质谱测定条件(ESI负离子源)a)色谱柱:ZORBOX SB-C。8,35 pm,100 mm21 ram(内径)或相当者b) 流动相及梯度洗脱条件见表2;表2流动相及梯度洗脱条件步骤 总时间rain 流速(弘Lmin) 流动相A(5 mmolL乙酸铵水) 流动相B(乙腈)0 000 400 990 101 3 00 400 700 3002 600 400
14、600 4003 900 400 600 40 04 1500 400 400 6005 19 00 400 10 99 06 23 00 400 10 9907 23 01 400 990 1 0c)柱温:40;d)进样量:10“L;e)电离源模式:电喷雾离子化;f)电离源极性:负模式;g)雾化气:氮气;h)雾化气压力:028 MPa;i)离子喷雾电压:4 000 V;j)干燥气温度:350;k)干燥气流速:10 Lmin;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。732定性测定在相同实验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致,并且在扣除背景后的样品质谱
15、图中,所选择的离子均出现,而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致(相对丰度)50,允许20偏差;相对丰度2050,允许土25偏差;相对丰度1020,允许30偏差;相对丰度10,允许50偏差),则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。733定量测定本标准中液相色谱串联质谱采用外标校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响,需用空白样品提取液来配制所使用的一系列基质标准工作溶液,用基质标准工作溶液分别进样来绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药及相关化学品的响应值均在仪器的线性范围内。486种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图参见附录C。74平行试验按以上步骤对同一试样进行平
16、行试验测定。4GBT 20770-200875空白试验除不称取试样外,均按上述步骤进行。8结果计算液相色谱一串联质谱测定采用标准曲线法定量,标准曲线法定量结果按式(1)计算:x。q筹揣 (1)式中:x;试样中被测组分含量,单位为毫克每千克(mgkg);Ci从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度,单位为微克每毫升(pgmL);V试样溶液定容体积,单位为毫升(mL);m样品溶液所代表试样的质量,单位为克(g)。计算结果应扣除空白值。9精密度本标准精密度数据是按照GBT 63791和GBT 63792的规定确定的,获得重复性和再现性的值是以95的可信度来计算。本标准方法的精密度数据参见附录D。
17、GBT 20770-2008附录A(资料性附录)486种农药及相关化学品中文与英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表486种农药及相关化学品中文与英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表见表A1。表A1 486种农药及相关化学品中文与英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表检出限 混合标准溶液序号 中文名称 英文名称溶剂(vgkg) 浓度(pgmL)A组1 苯胺灵 propham 5500 甲苯 11002 异丙威 ISOprocarb 115 甲醇 0233 3,4,5-混杀威 3,45-trimethacarb 017 甲醇 0034 环莠
18、隆 010 甲醇 0025 甲萘威 carbarvl 516 甲醇 1036 毒草胺 propachlor 0 14 甲醇 0037 毗咪唑 rabenzazole 067 甲醇 0138 西草净 0 07 甲醇 0019 绿谷隆 monolinuron 178 甲醇 03610 速灭磷 mevmphos 078 甲醇 0 1 611 叠氮津 azlprotryne 069 甲醇 0 1412 密草通 004 甲醇 0 0l13 嘧菌磺胺4 cyprodinil 0 37 甲醇 0 0714 播土隆 448 甲醇 09015 双酰草胺 carbetamide l_82 甲醇 0 3616 抗蚜
19、威 0 08 甲醇 00217 异噫草松 clomazone dimethazone 0 21 甲醇 0 0418 氰草津 008 甲醇 002i9 扑草净 prometryne 008 甲醇 00220 对氧磷 paraoxon methyl 038 甲醇 00821 4,4i二氯二苯甲酮1 4,4一dichlorobenzophenone 6 80 甲醇 13622 噻虫啉 thiacloprid 0 19 甲醇 00423 吡虫啉 lmidacloprid 11 00 甲醇 22024 磺噻隆 ethidimuron 075 甲醇 01525 丁嗪草酮 0 53 甲醇 0 1126 燕麦
20、敌 diallate 4460 甲醇 8 9227 乙草胺 acetochlor 2370 甲醇 4 74表A1(续)GBT 20770-2008检出限 混合标准溶液序号 中文名称英文名称 溶剂(pgkg) 浓度(pgmL)28 烯啶虫胺 n xtenpyram 856 甲醇 】7129 盖草津 methoprotyne 012 甲醇 00230 =甲酚草胺 dimethenamid 215 甲醇 04331 特草灵 terrbucarb 105 甲醇 0 2132 戊菌唑 penconazoIe 100 甲醇 02033 腈菌唑 myclobutanil 050 甲醇 0 1034 眯唑乙烟
21、酸 imazethapyr 0 56 甲醇 0 1135 多效唑 paclobutrazol 029 甲醇 00636 倍硫磷亚砜 fenthion sulfoxide 016 甲醇 O0337 三唑醇 triadimenol 528 甲醇 10638 仲丁灵 butralin 095 甲醇 01939 螺嗯茂胺5 0 03 甲醇 0 0140 甲基立枯磷 tolclofos iTlethvl 3328 甲醇 66641 甜菜胺 desmedipham 2 01 甲醇 0 4042 杀扑磷 methidathion 5 33 甲醇 1 0743 烯丙菊酯 aliethrin 30 20 甲醇
22、60444 敌瘟磷 edifenphos 0 38 甲醇 00845 丙草胺 pretilachlor 0 17 甲醇 00346 二囔磷 diazinon 036 甲苯 00747 氟硅唑 flusilazole 0 29 甲醇 0 0648 丙森锌 iprovalicarb 116 甲醇 02349 麦锈灵 benodanil 174 甲醇 0 3550 氟酰胺 flutolanil 0 57 甲醇 01151 氨磺磷 famphur 180 甲醇 03652 苯霜灵 benalyxyl 0 62 甲醇 0 1253 苄氯三唑醇 dlclobutrazole 023 甲醇 00554 乙环
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