GB T 16287-1996 食品中淀粉的测定方法 酶-比色法.pdf

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1、GB/T 16287-1996 前空间食品中淀粉测定方法，一般采用化学方法一一酸水解法。由于酸水解淀粉时，样品中的其他糖类被分解为还原糖单糖)，造成淀粉的测定结果偏离.本标准采用酶比色法是在检索了近20年74篇国外文献的基础上，经过反复实验、验证而制定的.要使食品中的淀粉含量测定准确，必须使淀粉完全溶解。本标准吸取了法国Cuher.J. C 1982年总结的有效溶解方法，即二甲基亚iiI.法，达到了使淀粉完全溶解的目的.淀粉酶解后的产物一一葡萄糖的测定方法，与GB/T16285-1996保持一致。本标准的附录A是标准的附录.本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位2中国农

2、垦北方食品监测中心。本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。本标准主要起草人s张宗城、刘宁、郝煌。340 1 范围中华人民共和国国家标准食品中淀粉的测定方法比色法Method for determlnation of starch In food Enzyme-colorlmetric method 本标准规定了用酶-比色法测定食品中淀粉的方法。本标准适用于各类食品中淀粉的测定。本标准最低检出限量为0.09g(淀粉)/mL(试液。2 原理GB/T 1 6287 -1 996 淀粉在淀粉葡萄糖苦酶(AGS)催化下，最终水解为葡萄糖.葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催化-D葡萄糖(葡萄

3、糖水溶液)氧化，生成D-葡萄糖酸-内酶和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化，过氧化氢与中氨基安替比林和苯盼生成红色眼亚胶。在505nm波长处测酿亚胶的吸光度，计算食品中淀粉的含量。AGS (C.HlO05).+nH20一一，C.H，20.GOD啕C.H120.+02 -.C，HlOO，十H202POD H202 +C.H50H +Cll日llN30一一+c.H5NO+H203 试剂3. 1 组合试剂盒1号瓶z内含淀粉葡萄糖背酶(amyloglu国也回)200U(活力单位)、拧橡酸、拧橡酸三锁，2号瓶g内含0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.的200mL，其中含4-氨基安替比林为O. 00

4、1 54 mol/L; 3号瓶z内含0.022mol/L苯盼溶液200mL , 4号瓶2内含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase) 800 U (活力单位)、过氧化物酶(辣根，p盯oxida民2000 U(活力单位)。1、2、3、4号瓶须在4C左右保存.3. 2 酶试剂溶液3. 2. 1 将l号瓶中的物质用重蒸饱水溶解，使其体积为66mL.轻轻摇动勿剧烈摇动)，使酶完全溶解。此溶液即为淀粉葡萄糖苦酶试剂溶液，其中拧橡酸缓冲溶液)浓度为O.1 mol/L，pH4. 6.在4C 左右保存，有效期1个月。3.2.2 将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。3. 2. 3 将4号瓶中的酶溶解在3.2.

5、 2混合液中，轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶完全溶解，即葡萄糖氧化国东技术监督局1996-04-10批准1996-12-01实施341 GB/T 162871996 酶过氧化物酶试剂溶液。在4C左右保存，有效期l个月。3.3 二甲基亚q)i(分析纯)。3.4 6 mol/L盐酸溶液将12mol/L盐酸(GB622.分析纯)与等体积重蒸馆水棍合，摇匀。3.5 6 mol/L氢氧化锅溶液称取24g氢氧化销(GB629.分析纯).溶于1000mL重蒸锢水中，摇匀。3.6 淀粉标准溶液称取经100:t:2C干燥2h的可溶性淀粉计算淀粉的回收率式中:R淀粉的回收率，%j C 淀粉的实测值，用。A3 判定规

6、则R=c一一X100 0.5 X 200 . ( A1 ) 测得淀粉的回收率，如在95%105%范围内，贝tl判定淀粉葡萄糖背酶、葡萄糖氧化酶和过氧化物酶符合技术要求。G/T 16287-1996食品中淀粉的测定方法酶一比色法第1号修改单丰修改单经国家技*监督局于1997年9月11日以技监国标函(1997)第200号文批准，自1998年1月IH起实施。1. 3. 5条第2行中的溶于1000ml重蒸馆水中更改为溶于100ml重蒸恼水中。2. 7. 2 民政用新矗立z7. 2 试液吸光度的测定用微量移掖管取O.202. OOml(依试液中淀粉的含量而定)试液(的.置于10ml比色管中。以下按7.1步骤操作d日须用等量试液(6)调整分光光度计零点，操作步骤如下。取等量试液(6)加入3m!葡萄糖氧化酶过氧化物酶试剂溶液(3.2.3).摇匀.在36+!C *浴锅中恒温4Dmioo冷却草草温，用重蒸馆水定容王10ml。用此溶液调整分光光度计零点。测出试液吸光度后.在标准曲线上查出对应的淀粉吉量Y刊载i1998年第1期中国标准化344