GB 4789.4-1994 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验.pdf

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1、中华人民共和国国家际准食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验Microbiclogicl examinatl。nof food hygiene Examination of Salmonella 1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中沙门氏菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中沙门氏菌的检验。2 51用标准c;B 4 789. 28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3. 1 天平z称取检样用。3. 2均质器或乳钵。3, 3 温箱：36士l，42。3.4 显微镜。3,5灭菌广口瓶：500mL. 3, 6 灭菌三角烧瓶：500mL,250 mL. 3. 7 灭菌吸管：10ml

2、,. 3.s 灭菌平皿：90mmX15mm. 3. 9 灭菌小试管z内径3mm，长5cm。3. 10灭菌毛细管。3, 11 橡皮乳头。3. 12 载玻片。3, 13 酒精灯。3. 14 灭菌金属匙或玻璃棒。3. 15接种棒、镰钻丝3. 16试管架、试管篓。4培弊基和试剂4. 1 缓冲蛋白陈水（BP）：按GB4789. 28中4.12规定。4.2氯化续孔雀绿CMMl增菌液z按GB4789. 28中4.13规定。4.3 四硫酸销煌绿（TTB）增菌液z按GB4789. 28中4.14、4.15规定。4. 4 亚晒酸盐Mt氨酸CSCl增菌液：按GB4789. 28中4.16规定。中华人民共和国卫生部1

3、99403 18批准162 GB 4 789. 4 94 代替GB4789. 4 84 1994-09-01实施GB 4789. 4-94 4. 5 亚硫酸锵琼脂（BS）按GB4789. 28中4.19规定。4. 6 OHL琼脂g按GB4789. 28中4.20规定。4. 7 HE琼脂g按GB4789. 28中4.21规定。4.8 ws琼脂s按GB4789. 28中4.23规定。4.9 SS琼脂z按GB4789. 28中4.22规定。4. 10三糖铁琼脂a按GB4789. 28中4.26 4. 27规定。4. 11 蛋白陈水、院基质试Jfij.按GB4789. 28中3.13规定。4. 12尿

4、素琼脂（pH7.2）：按GB4789. 28中3.15规定。4. 13 氟化饵（KCN）培养基g按GB4789. 28中3.16规定。4. 14 氨基酸脱竣酶试验培养基s按GB4789. 28中3.12规定。4. 15糖发醇管2按GB4789. 28中3.2规定。4. 16 ONPG培养基按GB4789. 28中3.3规定。4. 17半固体琼脂z按GB4789. 28中4.30规定。4. 18丙二酸销培养基s按GB4789. 28中3.7规定。4. 19 沙门氏菌因子血清e按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。5检验程序沙门氏菌检验程序如下g463 GB 4789.

5、 4-94 植样前增菌法直接增圃法精冉、噩晶、乳晶鲜肉、鲜置、鲜乳或其他未经及其他加工食品加工的食品25g灭菌生理25g+BP 225mL 盐事25mL，做成栓拌匀掖36土1-C般4h，干置晶1824h!OmL+MM !OmL+SC!OOmL 栓样匀液25mL十检佯匀掖25mL+或TTBl!OOmLMM（或TTB)!OOmLSC !OOmL 18 24h 36土118 24h 42 18 24h 36士1BS OHL（或HE、ws、SSJ6撮作步骤6. 1 前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。各称取检样25g，加在装有225mL缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内固体食品可先

6、应用均质器以8000 10 000 r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36士1培养4h（干蛋品培养1824川，移取10 mL，转种于100mL氯化镇孔雀绿增菌液或四硫酸纳煌绿增菌液内，于42培养1824h。同时，另464 GB 4789. 4 94 取10mL，转种于100mL亚晒酸盐脱氨酸增茵液内，于361c培养1824h。鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。各取25g(25 mL）加入灭菌生理盐水25 mL，按前法做成检样匀液g取25mL，接种于100mL氯化镇孔雀绿增菌液或四硫磺酸销煌绿增菌液内，于42培养24h；另取25m

7、L接种于100mL亚硝酸盐胧氨酸增菌液内，于361培养1824h。6.2 分离取增菌液1环，划线接种于个亚硫酸锡琼脂平板和一个DHL琼脂平板（或HE琼脂平板、ws或SS琼脂平板。两种增菌液可同时划线接种在同个平板上。于36士1分别培养1824h(DHL、HE、ws、SS）或4048h(BS），观察各个平板上生长的萄落，沙门氏菌I、E、IV, V、M和沙门氏菌E在各个平板上的菌落特征见表lo表1沙门氏菌属各群在各种选择性琼脑平板上的菌落特征选择性琼脂平板沙门氏菌1、E、IV, V、W抄门氏菌I门氏菌卡拉巴尔沙门氏菌山夫登堡沙门氏菌斯特拉特福沙门氏菌塔克松尼沙门氏菌索恩堡沙门氏菌昌丹斯抄门氏菌阿柏

8、丁沙门氏菌布里赫姆沙门民菌威尼斯沙门氏菌阿巴特图巴沙门氏菌鲁比斯劳沙门氏菌浦那沙门氏菌里待抄门民菌亚特大沙门氏菌密西西比沙门氏菌古巴沙门氏菌苏拉特沙门氏菌松兹瓦尔沙门氏菌非丁伏斯沙门民菌威斯敦沙门氏菌上海抄门氏菌自贡沙门氏菌巴圭达沙门氏菌迪尤波尔沙门氏菌卢肯瓦尔德沙门民菌拉马特根沙门氏菌阿德莱沙门民菌旺兹沃J恩沙门氏菌雷俄格伦德沙门氏菌莱瑟沙门氏菌E原名S. sao S. cala缸rGB 4789. 4 94 续表8。抗原J,3,19 J,3,19 S. senftenberg J,3,19 S stratford J,3.19 S. taksony J,3,19 S schoeneberg

9、 J,3,19 F群S. chandans 11 S. aberdeen 11 S. brijbhumi II S. veneziana 11 S. abaetetuba 11 S. rt巾slaw11 其他群S.p嗣Mj,J3,22 S. ried j,J3,22 S atlanta 13.23 S. mississi p pi J,13,23 s. cu缸阳),)3,23 S. surat Cl) ,6, 14,25S. sundsvall 1,6,14.25 S.ht成tting.。咀16 S. weston 16 S. shanghai 16 S zigong 16 S baguida

10、 21 S, dieup户eul28 S. luc晶enu崎Ide28 S. ramatgan 30 S. adelaide 35 S. wandsworth 39 S. riogrande 40 S. lethe I 41 J吨H 抗原第1相第2相e ,h e,n,z., e,h l,w g, Cs,tI 1, 2 z, z e,n,21s d e,n,x I 1.2 I J,5 I e,n,x k 1,5 r e,n,x z 1,6,.Zt 1Z23 b b I, 5 z, z, r) ,i 哇，口，z.,z e,n,x b e,n ,x e,h z, I, v 1, 6 l,w 1,5 z, t Z23 I J,7 . e,n,z1s k 1, 5 f .g b 1,2 b 1. 5 区，t473 , GB 4789. 494 菌名原名达莱姆抄门氏菌S dahlem 沙门氏菌ESalmanella I 注g本表Ji根据国内国外常见沙门氏菌整理而成附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由江西省卫生防疫站负责起草。本标准主要起草人何晓青。续表8。抗原48 61 第1相k I, v 本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。471 H 抗原第2相e,n,z1s 1,5,7 z,