DB2201 T 20-2022 梅花鹿胚胎移植技术规范.pdf
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1、I C S 6 5 . 0 2 0 . 3 0 C C S B 4 4 2201 长 春 市 地 方 标 准 D B 2 2 0 1 / T 2 0 2 0 2 2 梅 花 鹿 胚 胎 移 植 技 术 规 范 T e c h n i c a l s p e c i f i c a t i o n f o r e m b r y o t r a n s f e r o f s i k a d e e r 2 0 2 2 - 0 1 - 14 发 布 2 0 2 2 - 0 1 - 3 0 实 施 长 春 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 2 2 0 1 / T 2 0 2 0 2 2
2、 I 前 言 本 文 件 按 照 G B / T 1 . 1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 : 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起 草 。 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 , 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任 。 本 文 件 由 长 春 市 农 业 农 村 局 提 出 并 归 口 。 本 文 件 起 草 单 位 : 长 春 市 农 业 科 学 院 、 长 春 市 乾 艺 生 物 科 技 研 究 院 、 长 春 市 颂 祥 牧 业 科 技 有 限 公 司 。 本 文 件 主
3、 要 起 草 人 : 田 来 明 、 崔 鹤 馨 、 权 心 娇 、 付 晓 霞 、 李 男 、 陈 琦 、 叶 飞 、 吕 文 发 、 魏 海 军 、 刘 磊 、 张 鸿 、 祝 春 玲 、 张 事 铭 、 吕 铁 峰 、 沈 金 龙 。D B 2 2 0 1 / T 2 0 2 0 2 2 2 梅 花 鹿 胚 胎 移 植 技 术 规 范 1 范 围 本 文 件 规 定 了 胚 胎 移 植 的 基 本 要 求 、 前 期 准 备 、 胚 胎 移 植 、 妊 娠 检 查 和 记 录 的 要 求 。 本 文 件 适 用 于 梅 花 鹿 胚 胎 生 产 和 移 植 技 术 操 作 。 2 规 范
4、性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 , 注 日 期 的 引 用 文 件 , 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ; 不 注 日 期 的 引 用 文 件 , 其 最 新 版 本 ( 包 括 所 有 的 修 改 单 ) 适 用 于 本 文 件 。 D B 2 2 / T 2 6 1 1 - 2 0 1 7 梅 花 鹿 冷 冻 精 液 3 术 语 和 定 义 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。 3 . 1 胚 胎 移 植 e m b r
5、y o t r a n s f e r 将 良 种 母 鹿 体 内 早 期 胚 胎 或 体 外 受 精 及 其 他 方 式 获 得 的 早 期 胚 胎 , 移 植 到 同 种 生 理 状 态 相 同 的 受 体 母 鹿 体 内 , 使 之 继 续 发 育 成 个 体 的 技 术 。 3 . 2 供 体 鹿 d o n o r 在 胚 胎 移 植 过 程 中 提 供 胚 胎 的 母 鹿 。 3 . 3 受 体 鹿 r e c i p i e n t 在 胚 胎 移 植 过 程 中 接 受 胚 胎 的 母 鹿 。 3 . 4 同 期 发 情 s y n c h r o n i z a t i o
6、n o f e s t r u s 利 用 某 些 激 素 制 剂 人 为 地 控 制 并 调 整 母 鹿 在 预 定 时 间 内 集 中 发 情 。 3 . 5 阴 道 栓 v a g i n a l s u p p o s i t o r y 一 种 内 含 孕 酮 、 用 特 制 的 放 置 器 将 其 放 入 阴 道 穹 隆 的 同 期 发 情 装 置 。 3 . 6 超 数 排 卵 m u l t i p l e o v u l a t i o n 在 母 鹿 发 情 周 期 的 适 当 时 间 , 应 用 外 源 促 性 腺 激 素 处 理 , 使 卵 巢 比 自 然 发 情 时
7、有 更 多 的 卵 泡 发 育 并 排 卵 , 简 称 为 “ 超 排 ” 。 3 . 7 人 工 授 精 a r t i f i c i a l i n s e m i n a t i o nD B 2 2 0 1 / T 2 0 2 0 2 2 3 用 人 工 方 法 适 时 将 精 液 输 入 发 情 母 鹿 宫 颈 内 达 到 受 孕 , 以 代 替 公 母 鹿 交 配 而 繁 衍 后 代 的 一 种 繁 殖 方 法 。 3 . 8 冷 冻 精 液 f r o z e n s e m e n 鲜 精 液 经 人 工 处 理 后 在 液 氮 中 (-196 ) 冷 冻 保 存 的 精 液
8、 。 4 基 本 要 求 4 . 1 供 体 和 受 体 母 鹿 应 为 同 一 属 种 。 4 . 2 供 体 鹿 和 受 体 鹿 发 情 时 间 相 差 不 应 超 过 2 4 h 。 4 . 3 从 供 体 鹿 输 卵 管 内 收 集 到 的 胚 胎 应 移 植 到 受 体 鹿 的 输 卵 管 内 , 从 供 体 鹿 子 宫 角 内 收 集 到 的 胚 胎 应 移 植 到 受 体 鹿 的 子 宫 角 内 。 4 . 4 胚 胎 发 育 应 处 于 周 期 黄 体 期 内 。 4 . 5 供 体 鹿 和 受 体 鹿 的 比 例 应 为 1 : 5 1 : 6 。 5 前 期 准 备 5 .
9、 1 供 体 鹿 和 受 体 鹿 选 择 5 . 1 . 1 供 体 鹿 选 择 5 . 1 . 1 . 1 品 种 优 良 , 生 产 性 能 好 。 5 . 1 . 1 . 2 遗 传 性 能 稳 定 , 谱 系 完 整 。 5 . 1 . 1 . 3 体 质 健 壮 , 无 遗 传 疾 病 、 生 殖 疾 病 和 传 染 性 疾 病 。 5 . 1 . 1 . 4 产 历 清 楚 , 无 流 产 史 , 性 周 期 正 常 , 繁 殖 机 能 好 的 适 龄 成 年 母 鹿 。 5 . 1 . 2 受 体 鹿 选 择 5 . 1 . 2 . 1 健 康 、 营 养 状 况 良 好 , 无
10、 遗 传 疾 病 、 生 殖 疾 病 和 传 染 性 疾 病 。 5 . 1 . 2 . 2 繁 殖 性 能 良 好 , 发 情 周 期 正 常 , 母 性 和 哺 乳 能 力 良 好 , 无 流 产 史 , 产 后 6 0 d 以 上 的 经 产 母 鹿 。 5 . 2 同 期 发 情 5 . 2 . 1 供 体 鹿 空 怀 母 鹿 在 任 意 一 天 放 入 含 有 孕 激 素 的 阴 道 栓 , 1 2 d 后 撤 掉 , 同 时 肌 肉 注 射 孕 马 血 清 促 性 腺 激 素 ( P M S G ) 3 0 0 I U 3 5 0 I U 。 5 . 2 . 2 受 体 鹿 5 .
11、 2 . 2 . 1 空 怀 母 鹿 同 期 处 理 之 前 应 进 行 直 肠 触 摸 或 超 声 波 检 查 , 检 查 卵 巢 是 否 有 周 期 性 黄 体 。 5 . 2 . 2 . 2 操 作 步 骤 同 5 . 2 . 1 。 5 . 2 . 2 . 3 同 期 发 情 处 理 后 , 密 切 观 察 , 通 过 直 肠 触 摸 或 超 声 波 检 查 卵 泡 发 育 状 态 , 观 察 发 情 。D B 2 2 0 1 / T 2 0 2 0 2 2 4 5 . 2 . 3 发 情 鉴 定 阴 道 栓 取 出 后 1 2 h 开 始 用 试 情 公 鹿 每 隔 2 h 4 h
12、试 情 一 次 , 每 次 持 续 0 . 5 h 1 h 。 母 鹿 稳 定 接 受 爬 跨 即 为 发 情 。 记 录 母 鹿 接 受 爬 跨 的 时 间 。 5 . 3 供 体 鹿 超 数 排 卵 放 置 阴 道 栓 当 天 记 为 第 0 d , 放 阴 道 栓 第 9 d 开 始 注 射 促 卵 泡 素 ( F S H ) , 每 天 注 射 两 次 间 隔 1 2 h , 早 晚 各 1 次 , 4 天 8 次 减 量 注 射 。 到 第 1 2 d 1 3 d 结 束 , 共 注 射 3 2 0 m g F S H 。 第 7 次 注 射 F S H 时 取 出 阴 道 栓 。
13、5 . 4 人 工 授 精 5 . 4 . 1 冷 冻 精 液 品 质 应 符 合 D B 2 2 / T 2 6 1 1 的 规 定 。 5 . 4 . 2 操 作 步 骤 5 . 4 . 2 . 1 精 液 准 备 : 细 管 冻 精 空 气 浴 后 , 应 用 3 8 2 温 水 直 接 浸 泡 解 冻 , 不 超 过 1 0 m i n ; 5 . 4 . 2 . 2 确 认 母 鹿 发 情 接 受 爬 跨 后 , 进 行 输 精 ; 5 . 4 . 2 . 3 保 定 母 鹿 , 外 阴 应 清 洗 消 毒 ; 5 . 4 . 2 . 4 把 精 液 装 入 无 胶 塞 注 射 器
14、, 并 连 接 输 精 管 , 排 出 空 气 , 冻 精 的 剂 量 为 2 支 / 头 ; 5 . 4 . 2 . 5 抹 无 菌 润 滑 剂 , 手 持 输 精 管 缓 慢 插 入 母 鹿 阴 道 内 , 小 心 通 过 子 宫 颈 插 入 子 宫 体 , 推 入 精 液 , 将 输 精 管 缓 慢 退 出 , 完 成 输 精 。 6 胚 胎 移 植 6 . 1 手 术 冲 胚 6 . 1 . 1 时 间 应 在 供 体 母 鹿 第 一 次 配 种 后 6 d 7 d 。 6 . 1 . 2 器 材 冲 胚 管 及 内 芯 、 钝 性 9 # 或 1 2 # 针 头 、 止 血 钳 、
15、注 射 器 、 培 养 皿 、 量 筒 、 毛 剪 、 镊 子 、 手 术 刀 、 手 术 缝 合 针 和 缝 合 线 、 创 布 、 止 血 纱 布 、 体 式 显 微 镜 、 恒 温 板 等 。 6 . 1 . 3 药 品 新 洁 尔 灭 、 0 . 9 % 生 理 盐 水 、 胚 胎 保 存 液 ( H o l d i n g 液 ) 、 酒 精 、 碘 伏 、 青 霉 素 、 链 霉 素 、 石 蜡 油 、 麻 醉 药 、 解 麻 药 等 。 6 . 1 . 4 冲 胚 液 的 配 置 杜 氏 磷 酸 盐 缓 冲 液 ( P B S ) , 配 方 参 见 附 录 A 。 或 者 使
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