DB37 T 4484—2021 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法.pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 21 37 山东省地方标准 DB 37/T 4484 2021 小麦种子 活力测定 加速老化 法、 干 旱胁 迫 法、盐胁 迫法 Wheat seed vigour test by accelerated ageing test, drought stress test, salt stress test 2021 - 12 - 29 发布 2022 - 01 - 29 实施 山东省市 场监督 管 理局 发 布 DB 37/T 4484 2021 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规 范性 引用 文件 . 1 3 术 语和 定义 . 1
2、 4 缩 略语 . 2 5 测 定原 理 . 2 加速 老化 法 . 2 5.1 干旱 胁迫 法 . 2 5.2 盐胁 迫法 . 2 5.3 6 测 定方 案 . 2 总则 . 2 6.1 样品 . 2 6.2 测定 平台 . 2 6.3 测定 条件 . 2 6.4 7 试 材和 设备 . 3 试材 . 3 7.1 设备 . 3 7.2 8 试 验步 骤 . 3 加速 老化 法 . 3 8.1 干旱 胁迫 法 . 4 8.2 盐胁 迫法 . 5 8.3 9 试 验数 据处 理 . 6 加速 老化 法 . 6 9.1 干旱 胁迫 法 . 7 9.2 盐胁 迫法 . 7 9.3 重新 试验 . 8
3、 9.4 10 结 果计 算和 表示 . 9 11 结 果报 告 . 9 附录A (资 料性 ) 小麦 种子活 力测 定发 芽试 验原 始记录 表 . 11 附录B (资 料性) 小麦 种子活 力测 定结 果报 告单 . 12 参考文 献 . 13 DB 37/T 4484 2021 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分: 标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定 起草。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构 不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由山 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。 本文
4、件 由山 东省 农业 标准 化技术 委员 会种 植业 分技 术委员 会归 口。 DB 37/T 4484 2021 1 小 麦种子 活力测定 加速 老化法、 干旱胁 迫法、盐 胁迫法 1 范围 本文件 规定 了小 麦(Triticum aestivum L.) 种 子活 力 测定干 旱胁 迫法 、加 速老 化法、 盐胁 迫法 的测 定原则 、测 定方 案、 测定 程序和 结果 报告 。 本文件 适用 于冬 小麦 和春 小麦品 种的 种子 活力 测定 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 , 注日 期的
5、引用 文件 , 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件; 不注 日期 的引 用文件 , 其 最新 版本 (包 括所有 的修 改单 ) 适 用 于 本 文件。 GB/T 3543.2 农作 物种 子 检验规 程 扦样 GB/T 3543.4 农作 物种 子 检验规 程 发芽 试验 GB/T 8170 数 值修 约规 则 与极限 数值 的表 示与 判定 GB/T 26462 种 子发 芽纸 3 术语和 定义 GB/T 3543.2 界 定的 以及 下 列术语 和定 义适 用于 本文 件。 3.1 种子活 力 seed vigour 在广泛 的田 间条 件下 ,决 定种子 迅速 整齐 出苗 和长
6、 成正常 幼苗 潜在 能力 的总 称。 3.2 种子批 seed lot 同一来 源、 同一 品种 、同 一年度 、同 一时 期收 获和 质量基 本一 致、 在规 定数 量之内 的种 子。 来源 :GB/T 3543.2 1995 ,3.1 3.3 送验样 品 submitted sample 送到种 子检 验机 构检 验、 规定数 量的 样品 。 来源 :GB/T 3543.2 1995 ,3.4 3.4 试验样 品( 简称 “试 样” ) working sample 在实验 室中 从送 验样 品中 分出的 部分 样品 ,供 测定 某一检 验项 目之 用。 来源 :GB/T 3543.2
7、1995 ,3.5 3.5 加速老 化测 定 accelerated ageing test 将试样 置于 高温 高湿 条件 下进行 人工 老化 处理 , 处 理后进 行标 准发 芽试 验 , 统计正 常幼 苗数 , 计算 发芽率 。 3.6 干旱胁 迫测 定 drought stress test DB 37/T 4484 2021 2 将试样 置于 含高 渗溶 液的 发芽床 上进 行干 旱胁 迫发 芽试验 ,定 期统 计正 常幼 苗数, 计算 发芽 率。 3.7 盐胁迫 测定 salt stress test 将试样 置于 含高 盐溶 液发 芽床上 进行 盐胁 迫发 芽试 验,定 期统 计
8、正 常幼 苗数 ,计算 发芽 率。 4 缩略语 下列缩 略语 适 用 于本 文件 。 AAT: 加速 老化 测定 (Accelerated Ageing Test ) DST: 干旱 胁迫 测定 (Drought Stress Test ) SST: 盐胁 迫测 定(Salt Stress Test ) 5 测定原 理 加速老 化法 5.1 采用高 温高 湿处 理种 子, 加速种 子老 化, 其劣 变程 度在几 天内 相当 于数 月或 数年之 久的 自然 劣 变 程 度。 高 活力 种子 经一 定条 件 的老化 处理 后仍 能正 常发 芽, 低 活力 种子 则产 生不 正 常幼苗 甚至 丧失
9、生活 力。 因此, 加速 老化 法能 较好 地预测 田间 出苗 率和 种子 耐贮藏 性。 干旱胁 迫法 5.2 小麦播 种常 遇干 旱等 逆境 胁迫 , 将 种 子 置于 干旱 胁 迫环境 中 , 模 拟田 间逆 境 条件 , 观 察种 子发 芽成 苗的能 力。 高活 力种 子耐 旱、 抗 旱能 力强 , 经 一定 条件的 干旱 胁迫 下仍 能正 常发芽 , 而 低活 力 则 产 生 不 正常幼 苗甚 至丧 失生 活力 。因此 ,干 旱胁 迫法 能较 好地预 测田 间出 苗率 。 盐胁迫 法 5.3 小麦播 种常 遇到 盐碱 等逆 境胁迫 , 将种 子置 于一 定 条件的 盐胁 迫环 境中 ,
10、 模 拟田间 逆境 条件 , 观察 种子发 芽成 苗的 能力 。 高 活力种 子细 胞膜 系统 完整 且修复 快, 抗盐 、 耐 盐能 力强, 盐胁 迫下 仍 能 正 常 发 芽,而 低活 力种 子则 产生 不正常 幼苗 甚至 丧失 生活 力。因 此, 盐胁 迫法 能较 好地预 测田 间出 苗情 况。 6 测定方 案 总则 6.1 在严格 控制 条件 下, 对试 样按模 拟逆 境处 理、 标准 发芽、 数据 分析 的程 序 ( 加速老 化法 ) 和 模 拟 逆 境发芽 、数 据分 析的 程序 (干旱 胁迫 法、 盐胁 迫法 )进行 测定 。 按规定 要求 填报 测定 结果 ,测定 报告 应注
11、明测 定方 案所规 定的 条件 。 样品 6.2 送验样 品为 小麦 种子 ,重 量应不 低于1 000 g。 测定平 台 6.3 人工气 候箱 、光 照培 养箱 、发芽 室或 其它 能够 精准 控温的 发芽 环境 。 测定条 件 6.4 DB 37/T 4484 2021 3 种子活 力测 定应 在有 利于 正确实 施测 定的 控制 条件 下进行 ,包 括但 不限 于下 列条件 : 种子检 验员 具备 熟悉 所使 用测定 方法 的知 识和 技能 ; 所有仪 器与 使用 的技 术相 适应, 并已 经过 定期 维护 、验证 和校 准。 7 试材和 设备 试材 7.1 7.1.1 老化盒 :100
12、 mm 100 mm 30 mm 等规 格。 7.1.2 尼龙网 袋:150 mm100 mm、400 mm 150 mm 等 规格 。 7.1.3 置种板 :可 辅助 小麦 种子 置床, 每次 可平 行或 交错 置种 50 粒或 100 粒。 7.1.4 数种板 :可 辅助 数取 一定 数目的 小麦 种子 。 7.1.5 自封袋 :12 号(450 mm340 mm )等 规格 。 7.1.6 发芽盒 (盘 ):120 mm120 mm 50 mm 等 规格 。 7.1.7 发芽纸 :GB/T 26462 ,110 mm110 mm 、380 mm 255 mm 等 规格 。 7.1.8 试
13、剂药 品: 次氯 酸钠 溶液 、聚乙 二 醇 6000 (Polyethylene Glycol-6000 ,PEG-6000 )、 氯化 钠 (NaCl )等 。 7.1.9 其它: 其它发 芽装 置、温 湿度计 、玻璃 棒、 三角瓶 、镊子 、蒸馏 水、 标签纸 、纱布 、油性 记 号 笔、酒 精等 。 设备 7.2 7.2.1 人工老 化处 理设 备: 种子 老化箱 等。 7.2.2 发芽设 备: 人工 气候 箱、 光照培 养箱 、发 芽室 、恒 温循环 槽或 其它 能够 精准 控温发 芽的 设备 。 7.2.3 消毒干 燥设 备: 高压 蒸汽 灭菌锅 、电 热鼓 风干 燥箱 等。 8
14、试验步 骤 加速老 化法 8.1 8.1.1 试样准 备 启封后 , 随机 数取 试样 净 种子100 粒,4 次重 复, 共400 粒。 种 子老 化处 理前 用1.0 % 的 次氯 酸钠 溶液 浸泡消 毒5 min , 消毒 后用 无菌蒸 馏水 冲洗3遍, 拭去 种子表 面浮 水, 备 用。 包 衣种子 可先 柔性 清洗 然 后 消毒, 或无 须消 毒处 理。 8.1.2 试验材 料准 备 发芽纸 :将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后,烘 干备 用。 发芽盒 :将 发芽 盒清 洗干 净后, 用75 %的 酒精 溶液 擦拭消 毒, 风干 备用 。 8.1.3 加速老 化
15、测 定 将种子 放入 老化 盒或 尼龙 网袋中 , 放入 种子 老化 箱 内, 控制 温度 在41 0.3 , 相对 湿度 不低 于 98 % , 加速 老化 处理72 h , 取出, 薄摊 ,回 干( 自然 晾干或 在不 高于60 的 条 件下烘 干) ,备 用。 纸上发 芽: 取2张 发芽 纸 (110 mm 110 mm) , 叠放 入 发芽盒 (120 mm120 mm50 mm ) 内, 加 入蒸 馏水 , 充 分润 湿, 用无 菌纱 布轻拭 床面 , 除去 余液 和纸 间气泡 后 , 置 种板 辅助 置种 , 纸 边距1 cm 1.5 cm 。DB 37/T 4484 2021 4
16、 种子置 床后, 盖上 发芽盒 盖,贴 好标签 并标 注品种 名称、 样品编 号、 重复次 数、置 床时间 等基 本信 息 , 后,放 入人 工气 候箱 。按 照GB/T 3543.4 ,20 0.5 标准 发芽8 d统 计正 常 幼苗数 ,计 算发 芽率 。 盖纸发 芽: 取2张 发芽 纸 (110 mm 110 mm) , 叠放 入 发芽盒 (120 mm120 mm50 mm ) 内, 加 入蒸 馏水 , 充 分润 湿, 用无 菌纱 布轻拭 床面 , 除去 余液 和纸 间气泡 后 , 置 种板 辅助 置种 , 纸 边距1 cm 1.5 cm 。 种子置 床后 , 加 盖1张 润湿 的发芽
17、 纸, 盖上 发芽 盒盖, 贴好标 签并 标注 品种 名称 、 样品 编号、 重复 次 数 、 置床时 间等 基本 信息 , 放 入 人工气 候箱 。 按 照GB/T 3543.4 , 20 0.5 标准 发 芽8 d 统计 正常 幼苗 数, 计算发 芽率 。 卷纸发 芽: 用75 % 的酒 精 溶液消 毒操 作台 , 将2 张发 芽纸 (380 mm 255 mm ) 叠 放好, 用油 性记 号笔 在发芽 纸一 角 较 小区 域标 识样品 信息 (或 备样 品信 息防水 条) , 如: 样 品名 称、 重 复编 号等。 发 芽 纸 用 蒸馏水 充分 润湿 , 用 无菌 纱 布轻拭 床面 ,
18、除 去余 液和 纸 间气泡 后, 置种 板辅 助交 错 置种, 种孔 朝向 一致 , 纸边距5 cm 。 种子 置床 后加 盖1张 润湿 的发 芽纸 , 将纸 床 ( 或夹 样品 信息 防水 条 ) 卷 起 , 纸 卷两 端整 平, 并用皮 筋扣 住。 将纸 卷放 入自封 袋密 封好 (朝 向一 致) , 在自 封袋 上粘 贴标 签纸或 用油 性记 号 笔 标 识 相 关 信 息 后 ,垂 直 放 入人 工气 候 箱 ( 纸卷 种 孔 端朝 下) 。 按 照GB/T 3543.4 ,20 0.5 标 准 发 芽8 d 统计正 常幼 苗数 ,计 算发 芽率。 同时按 照GB/T 3543.4 ,
19、 对 未老化 处理 的试 样种 子进 行标准 发芽 测定 。20 0.5 发芽8 d统 计正 常幼苗 数, 计算 发芽 率。 8.1.4 检查管 理 在种子 老化 处理 和发 芽期 间, 应进 行适当 的检 查管 理, 以维 持原有 老化 处理 及发芽 条件 。 老 化36 h 和发芽4 d 分别 检查1 次老 化和发 芽环 境, 若有 问题 及时进 行相 应维 护。 老化处 理: 温度 保持 在41 0.3 范围 内, 相对 湿度不 低于98 % 。 发芽床 检查 :发 芽床 始终 保持湿 润。 发芽温 度检 查: 温度 保持 在20 0.5 范围 内。 种子检 查:发霉的种子应及时取 出洗
20、涤去霉。当发霉种子 超过5 %时,应更换发芽床 ,以免霉菌 因 素影响 测定 结果 。如 发现 腐烂无 生活 力的 种子 ,应 及时去 除并 做好 相应 记载 。 8.1.5 数据记 录 按照GB/T 3543.4 中正常 幼 苗、新 鲜不发 芽种 子、硬 实、不 正常幼 苗和 死种子 的鉴定 标准进 行数 据 统计, 根据 正常 幼苗 数, 计算发 芽率 。 干旱胁 迫法 8.2 8.2.1 试样准 备 启封后 , 随机 数取 试样 净 种子100 粒,4 次重 复, 共400 粒。 种子置 床前 用1.0 % 的次氯 酸钠 溶液 浸泡 消毒5 min , 消 毒后 用无 菌 蒸馏水 冲洗3
21、遍 , 拭去 种子 表面浮 水 , 备 用 。 包 衣种 子 可先柔 性清 洗然 后消 毒, 或无须 消毒 处理 。 8.2.2 试验材 料准 备 发芽纸 :将 发芽 纸121 1 高压 蒸汽 灭菌20 min 后,烘 干备 用。 发芽盒 :将 发芽 盒清 洗干 净后, 用75 %的 酒精 溶液 擦拭消 毒, 风干 备用 。 配制够 量的15 % 的PEG-6000 溶液 。 参 考配 制方 法: 称 取PEG-6000 溶质150 g, 溶 于蒸馏 水中 , 定 容至 1 000 mL , 备用 。 8.2.3 干旱胁 迫测 定 DB 37/T 4484 2021 5 采取纸 上或 纸间 (
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