GA T 1919-2021 法庭科学 琥珀胆碱和琥珀单胆碱检验 液相色谱-质谱和红外光谱法.pdf

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1、 HHP ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T 法庭 科学 琥珀胆碱 和琥珀单 胆碱检验 液相色谱- 质谱 和红 外光谱 法 Forensic sciences Examination methods for succinycholine and succinymonocholine LC-MS and IR - 发布 - - 实施 中华人民 共和国 公安部 发 布 GA/T I 前 言 本文件 按 照 GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分： 标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规定

2、起草。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利 。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由全 国刑 事技 术标 准化技 术委 员会 毒物 分析 分技术 委员 会 （SAC/TC 179/SC 1 ） 提 出并归口。 本文件 起草 单 位： 江 苏省公 安 厅 物证 鉴 定中 心 、公安 部 物 证鉴 定 中心 、 广西壮 族 自 治区 公 安厅 刑 事 侦 查总 队 、福 建 省公 安厅 刑 事技 术 总队 、 湖南 省公 安 厅物 证 鉴定 中 心、 江西 省 公安 厅 刑警 总 队、 广 东省公 安厅 刑事 技术 中心 、广州 市公 安局 刑事 技术

3、所。 本文件 主要 起 草人 ： 王学虎 、 张 前上 、 王瑞 花 、刘晓 锋 、 林葭 、 晏晓 军 、刘勇 孜 、 裴茂 清 、孙 立 敏。 GA/T 1 法庭科学 琥 珀胆 碱 和 琥珀 单胆碱 检验 液相色谱- 质谱 和 红外光谱 法 1 范围 本 文 件 规定 了 法 庭 科 学 生 物 检 材 （ 血 、 肌 肉 组 织 ） 中 琥 珀 胆 碱 和 琥 珀 单 胆 碱 的 液 相 色 谱- 质谱 （LC-MS ）和 体外 固体 样 品中 氯 化琥 珀胆 碱和 氯化 琥珀单 胆碱 的红 外光 谱 （IR ） 检验 方法 。 本文件 适用 于法 庭科 学生物 检材 （ 血、 肌肉 组

4、织 ） 中 琥珀胆 碱 和 琥珀 单胆 碱定性 定量 分析 和固 体样 品中氯 化琥 珀胆 碱与 氯化 琥珀单 胆碱 的定 性分 析 。 其他非 生物 检材 可参 照适 用。 2 规范 性引 用文 件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用于 本 文件。 GB/T 6682 分析 实 验室 用 水规格 和试 验方 法 GA/T 122 毒 物分 析名 词术 语 3 术语 和定

5、 义 GA/T 122 界 定的 术语 和定义 适用 于本 文件 。 4 液相 色谱-质 谱法 4.1 原理 以空白样 品和添加样品作 对照，按平行操作的要求 ，对生物检材 进行提取、 浓缩，采用液相色谱- 三重四 极杆 串联 质谱 或液 相色谱- 高分 辨质 谱检 测， 用外标 法进 行定 量 。 4.2 试 剂和 材料 4.2.1 试剂 实验用 水应 符合GB/T 6682 中规定 的 一 级水 。除 非另 有说明 ，在 分析 中使 用的 试剂均 为色谱 纯， 试 剂包括 ： a) 乙腈； b) 甲醇； c) 含 0.2% 甲酸 （v/v） 的 20.0mmol/L 乙酸 铵溶液 ：称取

6、1540.0mg 乙酸 铵，加入 100mL 水 溶解 ， 添加 2.0mL 甲酸 ，定 容至 1000mL ； d) 初始流 动相 ：取 含 0.2%甲酸 （v/v ）的 20.0mmol/L 乙酸铵 溶 液 10mL 与 乙腈 90mL 混 匀； e) 标准溶 液： 1) 1.0mg/mL 标准 物质 储备 液 ：根据 氯化 琥珀 胆碱 、氯 化琥珀 单胆 碱 标 准物 质的 纯度和 盐型 换算后， 各称 取适 量， 用 水分别 配制 成 1.0mg/mL 琥 珀胆碱、 琥珀 单胆 碱单一标准物 质储GA/T 2 备液， 密封 ， 于 塑料 试管 中-18 以下 保存 ，有 效期 6 个月

7、 。或 采用 市售 标准 溶液； 2) 1.0 g/mL 混合 标 准工 作 溶 液： 分别 移取 1.0mg/mL 琥 珀胆碱 、 琥 珀单 胆碱 标准 物 质储备 液， 用水配 制成 浓度 为 1.0 g/mL 混合 标准 工作 溶液 ，密 封， 于 塑料 试管 中 04 保存 ，有 效期 3 个月 ； 3) 0.01 g/mL 混合 标 准工 作 溶 液 ： 移 取 1.0 g/mL 混合标准工作 溶 液适量， 用 去 离子水 稀释 ， 配制 成 0.01 g/mL 溶液，现配现用 。 实验中所用其他浓度的混合标准 工 作 溶 液 均 由 1.0 g/mL 混 合标 准工 作溶 液配制

8、得到 ，现 配现 用。 4.2.2 材料 材料包 括 ： a) 微孔有 机滤 膜 ：0.22 m ； b) 塑料离 心管 ； c) 带塑料 内衬 的进 样瓶 。 4.3 仪 器和 设备 仪器和 设备 包括 ： a) 液相色 谱- 三 重四 极杆 串联 质谱仪， 配 有电 喷雾 离子 源 （ESI ） ； b) 液相色 谱- 四 极 杆 飞行 时间 质谱仪 ，配 有电 喷雾 离子 源 （ESI ） ； c) 电子天 平： 定性 检验 实际 分度值 d0.1mg ， 定量 检 验 实际 分度 值 d0.01mg ； d) 超声仪 ； e) 离心机 ； f) 浓缩器 ； g) 移液器 。 4.4 操

9、 作方 法 4.4.1 定性 分析 4.4.1.1 样 品前 处理 4.4.1.1.1 沉淀 蛋白 法 移取血 液 检 材样 品 0.5mL ，或称 取铰 碎 或 匀浆 的肌肉 组织 检材 样 品 0.5g 于 具 盖离心 管中 ，加入 乙 腈 1.5mL ，振荡 5min ， 不 低于 4000r/min 离心 5min ，取上 清液 置于 浓缩 器上 50 浓 缩至 干， 残留 物用 0.25mL 初始 流动 相溶解 ， 经有机 微孔 滤膜 过滤 ，作 为检材 样品 提取 液， 供仪 器检测 。 注：检材样品取样量、提取溶剂体 积、定容体积以及是否浓缩 可根据实际情况调整。 4.4.1.1

10、.2 质控 样品 制备 取等量 相似 基质 的空 白样 品两份 于具 盖离 心管 中， 一份作 为空 白 样 品， 一份 添加 1.0g /mL 混合 标 准物质 工作 溶液 ， 使 琥珀 胆碱、 琥珀 单胆 碱 浓 度为 0.01 g/mL(g) ， 作 为添 加样 品 ， 与 检材 样品 平行 操作 ， 得到空 白样 品提 取液 和添 加样品 提取 液 ， 供仪 器分 析。 4.4.1.2 仪 器检 测 4.4.1.2.1 液相 色谱-三 重 四极杆 串联 质谱 仪条件 GA/T 3 以下为 参考 仪器 及条 件， 可根据 不同 品牌 仪器 和不 同样品 等实 际情 况进 行调 整 ： a

11、) 色谱柱 ：Agilent HILIC Plus (2.1mm100mm,3.5m) 色谱 柱或 其他 等效 柱 ； 注： Agilent HILIC Plus 为美国 安捷伦公司产品的商品名称， 给出这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是表示 对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 流动相 ：流动相 A ：含 0.2% 甲酸 （v/v ）的 20mmol/L 乙 酸铵 溶液 ； 流 动相 B ：乙腈 ； c) 柱温：40 ； d) 流速：0.6mL/min ； e) 进样量 ：5 L ； f) 洗脱方式 ： 梯度 洗脱 ，梯 度洗脱 程序 见表 1

12、； 表 1 梯度 洗脱 程序 时间 min 流动相 A 流动相 B 1.0 10% 90% 6.0 65% 35% 6.1 95% 5% 8.0 95% 5% 8.1 10% 90% 11.0 10% 90% g) 扫描方 式 ： 电喷 雾电 离源 （ESI ）， 正离 子扫描 ； h) 检测模 式： 多反 应离 子监 测（MRM ） ； i) 碰撞气 ：氩 气； j) 雾化气 ：氮 气 3L/min ； k) 接口温 度：300 ； l) 加热块 温度 ：400 ； m) 加热气 ：氮 气 10 L/min ； n) 干燥气 ：氮 气 10 L/min ； o) 脱溶剂 管 （DL ） 温度

13、 ：250 ； p) 琥珀单 胆碱 和琥 珀胆 碱的 多反应 离子 监 测 参数 见 表 2。 表2 琥珀 胆碱 和琥 珀单 胆 碱的多 反应 离子 监测 参数 目标物 前体离子 m/z 二级质谱特征离子 m/z Q1 Pre 偏差 V 碰撞能量 V Q3 Pre 偏差 V 琥珀胆碱 145.1 115.6* -30 -14 -12 93.6 -30 -16 -21 琥珀单胆碱 204.1 99.0* -10 -24 -19 55.0 -10 -37 -24 注： * 表示定量离子。 4.4.1.2.2 液相 色谱-四极杆 飞行 时间 质谱 仪条件 以下为 参考 仪器 及条 件， 可根据 不同

14、 品牌 仪器 和不 同样品 等实 际情 况进 行调 整。 a) 色谱柱 ：Agilent HILIC Plus (2.1mm100mm,3.5m) 色谱 柱或 其他 等效 柱 ； GA/T 4 注： Agilent HILIC Plus 为安捷 伦公司产品的商品名称， 给出这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是表示对该 产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 流动相 ：流动相 A ：含 0.2% 甲酸 （v/v）的 20mmol/L 乙酸铵 溶 液； 流动 相 B ： 乙腈； c) 柱温：40 ； d) 流速：0.6mL/min ； e) 进样量 ：5 L

15、 ； f) 洗脱方式 ： 梯度 洗脱 ，梯 度洗脱 程序 见表 1； g) 扫描方 式 ： 电喷 雾电 离源 （ESI ）， 正离 子监 测模式； h) 检测方 式： 多反 应离子 监 测（MRM）； i) 扫描范 围：50 amu 300amu ； j) 碰撞气 （CAD ） ：50psi ； k) 气帘气 （CUR ） ：50 psi ； l) 雾化气 （GS1 ） ：30 psi ； m) 辅助加 热气 ：550 ； n) 电喷雾 电压 ：5500V ； o) 去簇电 压、 碰撞 能量 等电 压值应 优化 至最 优灵 敏度 ，见 表 3。 表3 定性 、定 量离 子对 和 去簇 电压 、

16、碰 撞能 量条 件 目标物 定性/ 定量离子对 m/z 去簇电压 V 碰撞能量 eV 琥珀胆碱 145.1097/115.5730 40 15 琥珀单胆碱 204.1230/145.0495 40 21 4.4.1.3 进样 分别吸 取 空 白溶 剂 、 添加 样品提 取液 、 空 白样 品提 取液 、 检材 样品 提取 液 、 混合 标 准工 作溶 液， 按 照4.4.1.2 仪 器条 件进行 检测 。进 样顺 序和 进样 次数 应 确保 结果 有效 。 4.4.2 定量 分析 4.4.2.1 样 品前 处理 移 取血 液 检 材样 品0.5mL 两份 ， 或称 取铰 碎或 匀浆的 肌肉 组

17、织 检材 样品0.5g 两 份， 按4.4.1.1进行 操 作，得到 检材 样 品提 取液 ，供仪 器检 测 。 取与检 材样 品等 量的 相似 基质空 白样 品， 与检 材样 品 平行操 作， 得到 空白 样品 提 取液 ， 供仪 器检 测 。 取与检 材样 品等 量的 相似 基质空 白样 品 两 份， 添加 琥珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱 标 准物质 工作 溶液 ， 作 为 添加样 品， 与检 材样 品平 行操作 ， 得 到添 加样 品提 取液 ， 供仪 器检 测 。 添加 样品中 目标 物含 量应 为检 材 样品中 目标 物含 量的 （100 50）% 。 取与检 材样 品等 量的 相似

18、基质空 白样 品， 添加 琥珀 胆碱和 琥珀 单胆 碱 标 准物 质工作 溶液 ， 配 制成 浓 度在0.016 g/mL0.120 g/mL 范围 内的5个 浓度 添加 样品 ， 与检 材样 品平 行操 作，得 到添 加样 品提 取液 ， 供仪器 检测 。 用 空白 样品 提取液 和添 加样 品提 取液 绘制标 准曲 线 。 检材 样品 中目标 物的 含量 应在 校准 曲 线的线 性范 围内 。 4.4.2.2 仪 器检 测 4.4.2.2.1 仪器 条件 GA/T 5 同 4.4.1.2 。 4.4.2.2.2 进样 分别吸 取检 材样 品提 取液 、 空 白样 品提 取液 、 添加 样品

19、提 取液，按4.4.1.2 仪 器条件 进样 分析 。 每份 检材样 品提 取液 和添 加样 品提取 液各 进样 分析23次 。 4.4.3 计算 4.4.3.1 计 算含 量 4.4.3.1.1 外标-校 准曲 线 法 记录检 材样 品提 取液 和添 加样品 提取 液中 目标 物的 保留时 间和 峰面 积值 ， 以 添 加样品 提取 液中 目标 物的峰 面积 的平 均值 为纵 坐标、 添加 样品 提取 液中 目 标物的 含量 为横 坐标 进行 线性回 归， 得到 线性 方程。 根据检 材样 品提 取液 中目 标物的 峰面 积值 ，按 公式(1) 计算 出检 材样 品中 目标 物的含量 。 a

20、 b y = . (1) 式中： 检 材样 品中 目标 物的 含量; y检 材样 品提 取液 中目 标 物的峰 面积 的平 均值 ； a 线 性方 程的 斜率 ； b 线 性方 程的 截距 。 4.4.3.1.2 外标-单 点校 正 法 记录检 材样 品提 取液 和添 加样品 提取 液中 目标 物的 保留时 间和 峰面 积值 ，按 公式（4） 计算 检材 样 品中目 标物 的含量 。 A A = . (2) 式中： 检 材样 品中 目标 物的 含量； A检 材样品 提取 液 中目标 物的 峰面 积 的 平均 值 ； A 添加 样品 提取 液 中目 标物 的峰 面积 的平 均值 ； 添加 样品

21、中 目 标物的 含量 。 4.4.3.2. 计算 相对 相差 记录 4.4.3.1 中 计算 得到 的 检材样 品中 目标 物的 含量 ，按公 式(3) 计 算相 对相 差 ： % RD 100 2 1 = . (3) 式中： RD相 对相 差 ， 用百 分比 （% ） 表示 ； 1 、 2 两 份检 材样 品中 目标物 的含 量； X 两份 检材 样品 中目 标物 含量的 平均 值。 4.5 结 果评 价 4.5.1 定 性结 果评 价 GA/T 6 4.5.1.1 液 相色 谱- 三重 四 极杆串联 质谱 结果 评价 4.5.1.1.1 阳 性结 果评 价 在相同 条件 下进 行样 品测

22、定时， 检材 样品 中 目 标物 的色谱 峰保 留时 间与 标准 工作溶液 一 致 （ 相对 误 差在 2.5% 之 内） 、 目标 物 的 两对定 性离 子 对与 标准工作 溶液 一致 ，且离 子 对 丰 度比与 浓度 接近的 标准 物质工 作溶液 相比， 相 对 偏差不 超过 表 4 规定 的范 围， 空白 样品 无干 扰， 则 可判断 检材 样品 中检 出目标 物。 表 4 离子 对丰 度比 的最 大允许 相对 偏差 范围 离子对丰度比 50% 20% 50% 10% 20% 10% 最大允许偏差范围 20% 25% 30% 50% 4.5.1.1.2 阴 性结 果评 价 检材样 品未

23、出现 与 目 标物 标准物 质工 作 溶 液一 致的 色谱峰 ， 且 添加 样品 中出 现 与 目标 物标准 工作 溶 液一致 的色 谱峰 ，空 白样 品无干 扰， 则可 判断 检材 样品中 未检 出 目 标物 。 4.5.1.2 液 相色 谱- 四极 杆 飞行时 间 质 谱结 果评 价 4.5.1.2.1 阳性 结果 评价 在相同 条件 下进 行样 品测 定时， 检材 样品 中 目 标物 的色谱 峰保 留时 间与 标准 工作 溶 液一 致 （ 相对 误 差在 2.5% 之 内） ， 且检材 样品中 目标 物 前 体离 子的 质荷比 与理 论质 荷比 一致 （质荷 比 大 于等 于 200 时

24、， 质量精 度 小 于等 于 5 10 -6 ；质 荷比 小于 200 时 ，质 量精度 小于 1mDa ）， 同时 至少 1 个二 级质 谱特 征离 子与标 准物 质工 作溶 液一 致 （质 荷比 大于 等 于 200 时 ，质 量精 度 小 于等 于 5 10 -6 ；质荷 比小于 200 时 ， 质量精 度小于 1mDa ）， 空 白样品 无干 扰， 则可 判断 检材样 品中 检出 目标 物 。 4.5.1.2.2 阴性 结果 评价 检材样 品未 出现 与目 标物 标准工作 溶液 一 致的 色谱 峰， 且 添加 样品 中出 现与 目 标物标 准工作 溶液 一 致的色 谱峰 ，空 白样 品

25、无 干扰， 则可 判断 检材 样品 中未检 出目 标物 。 4.5.2 定 量结 果评 价 检 材样 品中 目 标物含 量的RD 20% ，定 量数据 可靠， 其含 量按 两 份检材 的平均 值计 算。检 材样 品 中目标 物含 量的RD 20% ，定量 数据 不可 靠。 应按4.4.2重 新提 取检 验。 琥珀胆碱和琥珀单胆 碱的 性质 参 见附录A 中的A.1， 相关实验数据及谱图 参见 附录A 中的A.2和附 录 B中的 图B.1B.7。 5 红外 光谱 法 5.1 原理 分子受 到红 外光 谱的 辐射 会产生 振动 能级 （同 时伴 随转动 能级 ） 的 跃迁 ，在 振动 （ 转动 ）

26、 时 伴有 偶 极 矩 改变 者 会吸 收 红外 光， 形 成红 外 吸收 光 谱。 红外 光 谱中 的 每一 个 特征 吸收 谱 带都 包 含样 品 分子 中 基 团 和化 学 键的 信 息。 不同 化 合物 有 不同 的 红外 光谱 ， 将样 品 的红 外 光谱 图与 标 准物 质 的红 外 光谱 图 进行比 对， 根据 特征 吸收 峰法进 行定 性 。 5.2 试剂 GA/T 7 除非另 有说 明， 在分 析中 使用的 试剂 均为 分析 纯， 试 剂包 括： a) 氯化琥 珀胆 碱标 准物 质 ； b) 氯化琥 珀单 胆碱 标准 物质 ； c) 无水乙 醇： 分析 纯； d) 溴化钾 ：

27、分 析纯 。 5.3 仪 器和 设备 仪器 和 设备 包括 ： a) 傅里叶 变换 红外 光谱 仪 ： 波数范 围应 不少 于 4000cm -1 650cm -1 ， 分 辨率 应不 低 于 4cm -1 ， 配备 衰减全 反射 （ATR ） 测量 装置或 固体 制样 附件 ； b) 研磨仪 ； c) 手术刀 ； d) 镊子。 5.4 操 作方 法 5.4.1 样品 前处 理 5.4.1.1 衰 减全 反射 法（ATR ） 取研磨 均匀 的检材 固 体样 品适量 ， 均 匀铺 展 在 ATR 棱镜的 上表 面， 使紧 密接 触， 采 集全 反射 光谱 红 外光谱 。标准 物质 同 步操 作。

28、 5.4.1.2 溴 化钾 压片 法 取研磨 均匀 固体 检材 样品 1.0 mg 1.5 mg ， 置于 玛瑙 研钵中 ，加 入干 燥的 溴化 钾细粉 约 100 mg150 mg （与样 品的 比例 约为 100:1 ） 作为 分散 剂， 充 分研 磨均匀， 置于 压片 模具 中 ， 在压片 机上 压制 成透 明 片。 标 准物 质同 步操 作。 5.4.2 仪器 检测 以下为 参考 仪器 及条 件， 可根据 不同 品牌 仪器 和不 同样品 等实 际情 况进 行调 整。 a) 波数范 围：4000 cm -1 650 cm -1 ； b) 分辨率 ：4 cm -1 ； c) 扫描次 数：

29、不少 于 4 次。 5.4.3 红外 光谱图 采集 将制备 好的 样品 置于 傅里 叶红外 光谱 仪上 进行 测试 ，测试 时应 按照 如下 要求 ： a) 先采集 背景 红外 光谱 ，然 后采集 检材 样品 红外 光谱 ； b) 检材样 品红 外光 谱图 中所 有谱峰 的透 过率 均应 低 于 100% ， 最大 吸收 峰的 透过 率应低 于 50% ， 基线应 保持 平直 ； c) 应尽可 能减 少环 境中 的水 汽和二 氧化 碳对 红外 光谱 的影响 。如 果检材 样 品谱 图中 在 4000 cm -1 3500 cm -1 、1900 cm -1 1300 cm -1 和 2390

30、cm -1 2280 cm -1 区域有 明显 的吸 收， 可 能是环 境中 的 水汽和 二氧 化碳 所致 。可 通过适 当的 吹扫 或背 景扣 除方式 加以 减小 ； d) 在相同 测试 条件 下， 进行 标准物 质的 红外 光谱 的采 集。 5.4.4 红外 光谱 数据 记录 记录检 材 样 品和 相应 的标 准物质 的红 外光 谱图 ，标 定吸收 峰的 位置 。 GA/T 8 5.4.5 参考 谱图 氯化 琥 珀胆 碱和 氯化 琥珀 单胆碱 的特 征吸 收峰 见 表 5，谱 图 参 见附录 B 中 图 B.8 和 图 B.9 。 表5 氯化 琥珀 胆 碱和氯 化琥 珀单 胆碱 的红 外光

31、谱 的主 要特 征吸 收峰 中文 名称 英文 名称 主要特征吸收峰 cm -1 氯化琥珀胆碱 succinycholine 1735 、1627 、1482 、1428 、1312 、1146 、964 、946 、877 、816 氯化琥珀单胆碱 succinymonocholine 1733 、1696 、1417 、1405 、1202 、1163 、1091 、1063 、1035 、833 5.5 结 果评 价 将 检材 样品 的红 外光 谱图 与标准 物质 氯化 琥珀 胆碱 或氯化 琥珀 单胆 碱 的 红外 光谱图 进行 比对 ， 根 据 表 5 列 出的 特征 吸收 峰 进 行定

32、性 （波 数误 差应 小于 规定值 的 1cm -1 ）， 一致 可 判定检材 样品 中 检出 氯化 琥珀胆 碱 或 氯化 琥珀 单胆 碱 ； 检 材谱 图出 现标 准品 氯化琥 珀胆 碱或 氯化 琥珀 单胆碱 的特 征吸 收 峰 ， 但 有 其他杂 峰干 扰 ， 或 者检 材 的红外 光谱 特征 峰弱 ， 被 其他杂 峰掩 盖 ， 应 继续 采 用其他 方法 进一 步确 认或者 排除。 GA/T 9 附录 A （资料 性 ） 琥珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱相 关资料 A.1 氯 化琥 珀胆 碱和 琥珀 单胆碱 的相 关资 料 琥珀胆 碱(Succinylcholine) ， 化 学名 为2,2

33、- (1,4-二氧-1,4- 亚丁 基) 双( 氧)双 N,N,N- 三 甲基 乙胺 ， 常见琥 珀胆 碱季 铵盐 有 氯 化物 、 溴化 物和 碘化 物 （ 红外光 谱图 各不 相同 ） ， 临床上 常见 系其 氯化 物， 即 氯化琥 珀胆 碱( suxamethonium chloride) ， 主要 用途 是 作为兽 药或 人类 外科 手术 的麻醉 诱导 剂 ， 以 静脉 注 射或者 推注 的方 式给 药。 其中毒 具有 死亡 迅速 、致 死量低 的特 点， 而且 死者 多有尸 斑严 重、 面部 青紫 、 心肺表 面出 血点 等表 现， 与心脏 性猝 死、 窒息 死亡 较相似 。 氯化

34、琥 珀胆 碱进 入全 血中 首先被 血液 中的 丁酰 胆碱 酯酶水 解 为 肌松 作用 较弱 的琥珀 单胆 碱 ， 其次 以 组 织 分 布 的 形 式 从 全 血 中 消 除 ， 并 且 消 除 半 衰 期 较 快 ， 在 全 血 中 原 型 药 物 含 量 很 低 （ 大 多 数 不 超 过 50ng/mL ）。 氯化 琥 珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱均属 于季 铵盐 ， 容 易在 液相色 谱质 谱检 测仪器 的 管路中 形成 吸附 ， 因 此 检验时 需要 注意 仪器 残留 ， 不同 厂家 仪器 残留 有所 不同， 残留 严重 的类 型仪 器 低含 量时 需要 谨慎 下阳 性 结论。 琥珀

35、单 胆碱 最大 离子 对为204.1m/z/145.0m/z, 但人 血中 也会出 现该 离子 对， 而且 浓度较 大， 因此 使用 串联质 谱时 不宜 选择204.1m/z/145.0m/z 离子 对。 体外检 材以毒 镖最 为常见 ，红外 光谱法 检验 时 需 将 毒镖内 液体推 出， 烘干后 供检； 或取针 头内 白色 固体供 检 。 用 手术 刀、 镊 子 等工 具提 取固 体样 品晾 干后放 到红 外光 谱仪 的样 品池 上 。 提取 每一 个样 品 之 前， 应 该将 所有 提 取 工具 （镊子、 手术 刀等） 擦拭 干净， 保证 对待 检样 品没 有污染 。 提 取样 品时 尽量

36、 保 证样品 的纯 净， 减少 外来 的污染 。使 用金 刚石 池或 者 ATR 附 件时 ，需 要用 无 水乙醇 擦净 样品 台， 防止 污染。 A.2 方 法检 出限 、定 量限 琥 珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱 在 肌肉 和血 液 中 检测 限和 定量限 见表A.1 。 表A.1 琥 珀胆 碱和 琥珀 单 胆碱在 肌肉 和血 液中 的检 测限和 定量 限 名称 肌肉 组织检测限 ng/g 血液检测限 ng/mL 定量限 ng/ml 或 ng/g 液相色谱- 四极杆 飞行时间质谱 液相色谱- 串联质谱 液相色谱- 四极杆 飞行时间质谱 液相色谱- 串联质谱 液相色谱- 四极杆 飞行时间质谱

37、液相色谱- 串 联质谱 琥珀单胆碱 6 4 6 4 16120 16120 琥珀胆碱 6 4 6 4 16120 16120 GA/T 10 附 录 B （资料 性 ） 琥珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱的 相关谱 图 琥珀胆 碱和 琥珀 单胆 碱的 液相色 谱- 串 联质 谱谱 图见 图 B.1 和图 B.2 ； 液相 色 谱- 高分 辨质 谱谱 图见 图 B.3B.7 ；红 外光 谱图 见 图 B.8 和 B.9 。 3.50 3.75 4.00 4.25 0 50000 100000 150000 200000 204.1055.00(+) 204.1099.00(+) 204.1055.00

38、(+) 204.1099.00(+) 3.880 图B.1 琥珀 单胆碱 色 谱图 4.75 5.00 5.25 0 50000 100000 145.1093.60(+) 145.10115.60(+) 145.1093.60(+) 145.10115.60(+) 4.961 图B.2 琥珀 胆 碱 色谱 图 X IC of +TO F Product (145.1): Exp 4, 114.796 to 116.559 D a from Sam ple 1 (6ngdandajian10ngdanjain) of D ata2019081211.w iff (D uoSpray () M

39、ax. 4061.0 cps. 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 Tim e, m in 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200 2400 2600 2800 3000 3200 3400 3600 3800 4000 Intensity, cps 4.96 2.20 6.62 4.66 8.48 5.505.74 图B.3 空白 血添 加 琥 珀胆 碱 提取 离子 流 图(保 留时 间4.96min) GA/T

40、 11 +TO F Product (145.1): Exp 4, 4.9603 m in from Sam ple 1 (6ngdandajian10ngdanjain) of D ata2019081211.w iff a=5.73740628777075430e-004, t0=5.79380182911275240e-001 (D uoSpray () M ax. 811.0 cps. 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 m

41、/z, D a 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800 Intensity, cps 115.5730 93.5594 86.0957 79.5615 145.1095 65.5640 131.9614 60.0803 171.0649 99.0430 121.9657 158.1184 230.1378 62.9275 图B.4 琥珀 胆碱 高分 辨二 级质谱 图 X IC of +TO F Product (204.1): Exp 5, 144.737 to 145.604 D a from Sam

42、ple 1 (6ngdandajian10ngdanjain) of D ata2019081211.w iff (D uoSpray () M ax. 3.5e4 cps. 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 9.5 Tim e, m in 0.0 2000.0 4000.0 6000.0 8000.0 1.0e4 1.2e4 1.4e4 1.6e4 1.8e4 2.0e4 2.2e4 2.4e4 2.6e4 2.8e4 3.0e4 3.2e4 3.4e4 Intensity, cps

43、 4.01 图B.5 空白 血添 加 琥 珀单 胆碱色 谱图 （保 留时 间3.85min ） +TO F Product (204.1): Exp 5, 3.8996 m in from Sam ple 1 (6ngdandajian10ngdanjain) of D ata2019081211.w iff a=5.73739577372650430e-004, t0=5.43396600485077210e-001 (D uoSpray () M ax. 785.0 cps. 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 20

44、0 210 220 230 m /z, D a 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 785 Intensity, cps 145.0490 99.0431 101.0222 204.1232 图B.6 琥珀 单胆 碱 四 极杆- 飞行时 间 二 级质 谱图 GA/T 12 +TO F Product (204.1): Exp 5, 4.0108 m in from Sam ple 1 (6ngdandajian10ngdanjain) of D ata2019081211.w iff a=5.73741701

45、310190700e-004, t0=6.14285397593100630e-001 (D uoSpray () M ax. 1.1e5 cps. 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 m /z, D a 0.00 5000.00 1.00e4 1.50e4 2.00e4 2.50e4 3.00e4 3.50e4 4.00e4 4.50e4 5.00e4 5.50e4 6.00e4 6.50e4 7.00e4 7.50e4 8.00e4 8.50e4 9.00e4 9.50e4 1.00e

46、5 1.05e5 1.10e5 1.15e5 Intensity, cps 85.0275 204.1223 60.0799 145.0489 图B.7 人 血中 琥珀 单胆 碱 “干扰 物” 四极 杆- 飞行 时 间 二级 质谱 图( 保留 时间4.01min) 4000.0 3600 3200 2800 2400 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 650.0 31.3 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 98.2 cm-1 %T 氯化 琥珀 胆碱 3461.06 3402.71 3250.87 3021.21 29

47、59.33 2935.38 2112.55 1626.80 1496.97 1482.10 1447.04 1428.15 1377.33 1351.39 1312.28 1272.85 1146.79 1097.95 1047.07 1027.69 963.32 946.44 877.18 857.20 815.88 660.12 1735.77 图B.8 氯化 琥珀 胆 碱红 外 光谱 的 光谱 图 GA/T 13 4000.0 3600 3200 2800 2400 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 650.0 20.7 25 30 35 40 45 5

48、0 55 60 65 70 75 80 85 90 95 99.3 cm-1 %T 氯化 琥珀 单胆 碱 3027.84 2981.00 2780.73 2627.23 2558.17 2512.43 1732.94 1695.96 1494.99 1479.96 1453.87 1417.43 1405.12 1382.54 1353.85 1322.94 1299.49 1247.86 1162.69 1091.60 1062.86 1035.32 1022.10 1004.43 947.80 910.58 888.55 873.60 833.00 713.05 1202.87 1218.42 1664.72 图B.9 氯化 琥 珀单 胆碱 红 外光谱 的光 谱 图 _