GA T 1790-2021 法庭科学 生物检材中α-硫丹等20种有机氯类杀虫剂检验 气相色谱-质谱法.pdf

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1、 HHP ICS 13.310 CCS A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA GA/T 法庭科学 生物检材中 -硫丹 等 20 种 有机氯类杀虫剂检验 气相色谱 -质谱法 Forensic sciences Examination methods for 20 organochloride insecticides including -endosulfan in biological samples GC-MS - -发布 - -实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的

2、规定 起草 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本 文件 由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1） 提出 并 归口。 本 文件 起草单 位： 南京市 公安局刑事科学技术研究所 、公安部物证鉴定中心、青岛市公安局技术处、 泰安市公安局刑事科学技术研究所 。 本 文件 主要起草人： 王勇 、 章志成 、 李黎明 、 刘俊宁 、 张云峰 、 王磊 、 王伟 、 周欣 、 孙鑫 、 王爱华 、 王瑞花 、 任昕昕 、 杨虹贤 、 郭杰 、 吕惊晗 、 李文海 。 GA/T 1 法庭科学 生物检材中 -硫丹 等 2

3、0 种有机氯类杀虫剂检验 气相色谱 -质谱法 1 范围 本 文件 规定了生物检材血液、尿液中 20 种 有机氯杀虫剂 的气相色谱 -质谱（ GC-MS）检验方法。 本 文件 适用于 法庭科学领域 生物检材血液、尿液中 20种 有机氯杀虫剂 的定性 分析和 定量分析。其他 检材可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件 。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定

4、义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对检材样品 中 20种有机氯杀虫剂 （详见附录 A） 进行提取、净化及浓缩，采用气相色谱 -质谱法检测， 以 保留时间 、质谱特征离子碎片峰和相对丰度或 峰面积 作为定性判断依据， 用 外标法 或内标法 进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682中规定的 三 级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试 剂包括： a) 无水硫酸 镁； b) 无水硫酸钠； c) 氯化钠； d) 浓硫酸； e) 甲醇； f) 乙酸乙酯； g) 乙腈 ； h)

5、环已烷； i) 正已烷； j) N-丙基乙二胺（ primary secondary amine, PSA）； k) 石墨碳黑（ graphitized carbon black, GCB）； GA/T 2 l) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL单一标准物质储备溶液 ：根据 20 种有机氯杀虫剂标准物质的纯度和盐型换算后， 各称取适量 ， 用甲醇分别配制 1.0mg/mL 20 种有机氯 标准物质溶液，混匀，密封， -18以 下保存， 有效期 6 个月 。或 采用市售单一标准溶液 ； 2) 1.0mg/mL混合标准物质储备溶液：根据 20 种有机氯杀虫剂 标准物质的纯度和盐型换算后， 各称取

6、适量，用 甲醇 配制成 1.0mg/mL 的混合标准物质储备溶液， 密封， -18以下保存，有 效期 6 个月。或采用市售混合标准溶液； 3) 单一标准 物质 工作溶液：移取 1.0mg/mL 的 20 种有机氯 标准物质 储备 液各 1.0mL， 用 甲醇 分别 配制成 浓度 为 0.1mg/mL 的 单一 标准物质工作 溶 液 ， 现用现配 ；实验中所用其 他 浓度的 单一标准工作溶液均由 1.0mg/mL 单一标准物质 储备 液用甲醇稀释得到 ； 4) 混合标准 物质 工作溶液： 移取 1.0mg/mL 的 20 种有机氯混合 标准物质 储备 液 1.0mL， 用 甲 醇 配制成浓度为

7、0.1mg/mL 的 混合 标准物质工作 溶 液 ， 现用现配 ；实验中所用其 他 浓度的混 合标准工作溶液均由 1.0mg/mL 混合标准物质 储备 液用甲醇稀释得到 ； 5) 1.0mg/mL 内标 储备溶 液： 以 环氧七氯 作为内标，根据其纯度和盐型换算后，用甲醇配制 1.0mg/mL 内标溶液，混匀，密封， -18以下保存，有效期 6 个月 ； 6) 0.1mg/mL 内标工作溶液：移取 1.0mg/mL 的 内标 储备溶液 ，用 甲醇 配制成浓度为 0.1mg/mL 的 内标 工作 溶 液 ，现用现配。 实验中所用其他浓度的 内标工作 溶液均由 1.0mg/mL 内标储备 溶液配制

8、 得到 。 5.2 材料 材料包括： a) 具塞 离心管 ； b) 具塞 玻璃试管 。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪 （ GC-MS） ：配有电子轰击源（ EI） ； b) 振荡器 ； c) 电子天平： 实际 分度值 d0.01mg； d) 离心机 ； e) 移液 器； f) 浓缩器 。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品前处理 7.1.1.1 分散固相萃取 移取血液等液体检材样品 2.0mL 于 具塞 离心管中。加入乙腈 4.0mL，振荡 5min， 加入氯化钠 1.0g， 振荡 1min， 离心 5min， 分离上层有机相 ，重复提取一次，合并两

9、次提取的 上层有机相 ， 加入无水硫酸 镁 100mg， PSA 100mg， GCB 10mg， 振荡 1min， 不低于 6000r/min 离心 5min， 取上层有机相置于尖底 GA/T 3 玻璃试管中 ，于浓缩器上 50浓缩至干， 残留物用 甲醇 0.1mL 溶解 ， 作为 检材 样品 提取液 ， 供仪器检 测 。 注 ：检材样品取样量、乙腈体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.2 液液萃取 移取血液等液体检材样品 1.0mL 于 具塞 离心管中。加入 乙腈 2.0mL，震荡 1min， 加入 乙酸乙酯 /环 已烷（体积比 3： 1）混合溶剂 2.0mL，振荡 5min，不

10、低于 6000r/min 离心 10min，分离有机相；重复提 取一次，合并两次提取的有机相，用无水硫酸钠脱水后，转入尖底玻璃试管中 ， 置于浓缩器上 50浓 缩至干，残留物用甲醇 0.1mL 溶解 ，作为 检材 样品 提取液 ，供仪器检测。 注 ：检材样品取样量、混合溶剂体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.3 质控 样品 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用 血液替代）两份于具盖离心管中，一份作 为空白 样品，一份添加 标准物质工作溶液， 使其 浓度为 0.5g/mL， 作为添加样品 ， 与检材样品平行操 作，得到空白样品提取液和添加样品提取液 ， 供仪器 检测 。

11、 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 气相色谱 -质谱仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整 ： a) 色谱柱： DB-5MS 毛细色谱柱 (30m0.25mm0.25m)或其他等 效柱； 注： DB-5MS 毛细色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示 对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 180保持 1min，以 15/min 速率升温至 225，保持 1min， 再以 10/min 速 率升温至 280，保持 10min； c) 进样口温度： 28

12、0； d) 传输线温度： 260； e) 载气：氦气； f) 电子轰击能量： 70eV； g) 离子源温度： 230； h) 扫描方式：全扫描（ SCAN）； i) 溶剂延迟： 3min； j) 柱流量： 1.0mL/min； k) 进样方式：分流进样 ； l) 分流比： 10:1； m) 质量范围： 40amu 450amu； n) 定性定量离子 ： 参见附录 A。 7.1.2.2 进样 分别吸取 空白溶剂、添加样品 提取液 、空白样品 提取液 、检材样品 提取液 、标准物质工作溶液， 按 7.1.2.1仪器条件 进 样 检测。进样顺序和进样次数应确保结果有效。 7.2 定量分析 7.2.1

13、 样品前处理 GA/T 4 移取血液等液体检材样品 2.0mL （液液萃取 1.0mL） 2份（采用内标法 时 ，则加入内标，使其浓度为 1.0g/mL，混匀），按 7.1.1进行操作 ，得到检材样品提取液，供仪器检测 。 取与检材样品等量的相似基质空白样品，与检材样品平行操作 ，得到空白样品提取液，供仪器检测 。 用单点校正法定量时，取与检材样品等量的相似基质空白样品 2份，添加标准物质（采用内标法时， 还需添加内标，使其浓度为 1.0g/mL），作为添加样品，与检材样品平行操作，得到添加样品提取液。 添加样品中目标物含量应 在 检材样品中目标物含量的（ 10050） %范围内 。 用校准曲

14、线法定量时， 取与检材样品等量的相似基质空白样品，添加标准物质工作溶液，配制成浓 度在 0.5g/mL 10g/mL范围内的添加样品，与检材样品平行操作，得到添加样品提取液，供仪器检测。 校准曲线应不少于 6个浓度点（包括空白样品）。 检材样品中目标物的含量应在校准曲线的线性范 围内。 7.2.2 仪器检测 7.2.2.1 仪器条件 同 7.1.2.1。 7.2.2.2 进样 分别吸取检材样品提取液、空白 样品提取液、添加样品提取液 ，按 7.1.2.1仪器条件 进样分析。若采 用内标法 ， 还应进样内标工作溶液 。 每份检材样品提取液和添加样品提取液各 进样分析 2 3次。 7.2.3 计算

15、 7.2.3.1 计算含量 7.2.3.1.1 内标 -校准 曲线法 记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物和内标的保留时间和峰面积值，以 添加样品提取 液中 目标物与内标物的峰面积比的平均值为纵坐标、 添加样品提取液中 目标物的含量为横坐标进行线 性回归，得到线性方程。根据检材样品提取液中目标物及内标的峰面积值，按公式 （ 1） 计算出检材样 品中目标物的 含量 。 =y-ba . (1) 式中： 检材样品中目标物的含量； y 检材样品提取液中 目标物 与内标物的峰面积比的平均值； a 线性方程的斜率 ； b 线性方程的截距 。 7.2.3.1.2 内标 -单点校正法 记录检材样品提取液

16、和添加样品提取液中目标物和内标的保留时间和峰面积值，按公式（ 2）计算 检材样品中目标物的含量。 =AAAA . (2) 式中： 检材样品中目标物的含量； A 检材样品 提取液 中目标物的峰面积 的平均值 ； A 添加样品 提取液 中目标物的峰面积 的平均值 ； GA/T 5 Ai 检材样品 提取液 中内标物的峰面积 的平均值 ； Ai 添加样品 提取液 中内标物的峰面积 的平均值 ； 添加样品中目标物的 含量 。 7.2.3.1.3 外标 -校准 曲线法 记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物的保留时间和峰面积值，以 添加样品提取液中 目 标物的峰面积的平均值为纵坐标、 添加样品提取液中

17、 目标物的含量为横坐标进行线性回归，得到线性方 程。根据检材样品提取液中目标物的峰面积值，按公式 （ 3） 计算出检材样品中目标物的 含量 。 =y-ba . (3) 式中： 检材样品中目标物的含量 ; y 检材样品提取液中目标物的峰面积的平均值； a 线性方程的斜率 ； b 线性方程的截距 。 7.2.3.1.4 外标 -单点校正法 记录检材样品提取液和添加样品提取液中目标物的保留时间和峰面积值，按公式（ 4）计算检材样 品中目标物的 含量 。 =AA . (4) 式中： 检材样品中目标物的含量； A 检材样品 提取液 中目标物的峰面积 的平均值 ； A 添加样品 提取液 中目标物的峰面积

18、的平均值 ； 添加样品中目标物的 含量 。 7.2.3.2 计算相对相差 记录 7.2.3.1 中计算得到的检材样品中目标物的含量， 按公式 （ 5） 计算相对相差： 12 100%-RD = . (5) 式中： RD 相对相差，用百分比（ %）表示； 1、 2 两份检材样品中目标物的含量； 两份检材样品中目标物含量的平均值。 8 结果评价 8.1 定性结果评价 8.1.1 阳性结果评价 在相同条件下进行样品测定时，检材样品中目标物的色谱峰保留时间与标准物质工作溶液一致（相 对误差在 1%之内），且在扣除背景后的检材样品质谱图中， 目标物质谱特征离子（不少于 3 个） 质谱 特征离子与标准物质

19、工作溶液一致，特征离子丰度比与浓度接近的标准物质工作溶液相比，相对偏差不 X GA/T 6 超过表 1 规定的范围，空白样品无干扰，则可判断检材样品中检出目标物。 表 1 特征离子丰度比的最大允许相对偏差范围 特征 离子丰度比 50% 20% 50% 10% 20% 10% 最大允许 相对偏差 10% 15% 20% 50% 8.1.2 阴性结果评价 检材样品未出现与目标物标准物质工作溶液一致的色谱峰，且添加样品中出现与目标物标准物质 工作溶液一致的色谱峰，空白样品无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物 。 8.2 定量结果评价 检材样品中 目标物含量的 RD 20%，定量数据可靠，其含量按

20、两 份检材的平均值计算。检材样品中 目标物含量的 RD 20%，定量数据不可靠。应按 7.2重新提取检验。 相关实验数据及谱图 参见附录 B和 附录 C。 GA/T 7 附录 A （ 资料性 ） 20 种有机氯杀虫剂的 相关信息 20种有机氯杀虫剂及内标 的相关信息见表 A.1。 表 A.1 20种有机氯杀虫剂及内标 的相关信息 编号 中文名称 CAS 编号 英文缩写 分子式 1 六六六 319 84 6 -BHC C6H6Cl6 2 六六六 319 85 7 -BHC C6H6Cl6 3 六六六 58 89 9 -BHC C6H6Cl6 4 六六六 319 86 8 -BHC C6H6Cl6

21、 5 七氯 76 44 8 - C10H5Cl7 6 艾氏剂 309 00 2 - C12H8Cl6 7 环氧七氯（内标） 1024 57 3 - C10H5Cl7O 8 顺式氯丹 5103 71 9 - C10H86Cl8 9 反式氯丹 5103 74 2 - C10H86Cl8 10 硫丹 959 98 8 - C9H6Cl6O3S 11 反式九氯 39765 80 5 - C10H5Cl9 12 p， p滴滴伊 72 55 9 p,p -DDE C14H8Cl4 13 狄氏剂 60 57 1 - C12H8Cl6O 14 异狄氏剂 72 20 8 - C12H8Cl6O 15 硫丹 33

22、213 65 9 - C9H6Cl6O3S 16 p， p滴滴滴 72 54 8 p,p -DDD C14H10Cl4 17 顺式九氯 5103 73 1 - C10H5Cl9 18 硫丹硫酸酯 1031 07 8 - C9H6Cl6O4S 19 p， p滴滴涕 50 29 3 p,p -DDT C14H9Cl5 20 异狄氏剂酮 53494 70 5 - C12H9Cl5O 21 甲氧滴滴涕（甲氧氯） 72 43 5 - C16H15Cl3O2 GA/T 8 附录 B （资料性） 20 种有机氯杀虫剂的相关数据 B.1 20种有机氯杀虫剂及内标的保留时间、特征离子碎片、定量离子 见表 B.1

23、。 表 B.1 20种有机氯杀虫剂及内标的保留时间、特征离子碎片、定量离子 编号 中文名称 保留时间 min 特征离子碎片 m/z 定量离子 m/z 1 六六六 3.94 181， 219， 109 181 2 六六六 4.19 181， 219， 109 181 3 六六六 4.32 181， 219， 109 181 4 六六六 4.64 181， 219， 111 181 5 七氯 5.34 100， 272， 237 100 6 艾氏剂 5.92 66， 263， 91 66 7 环氧七氯（内标） 6.54 353， 81， 237 353 8 顺式氯丹 6.94 373， 237，

24、272， 263 373 9 反式氯丹 7.16 373， 237， 272， 263 373 10 硫丹 7.19 195， 237， 207， 265 195 11 反式九氯 7.21 409， 237， 263 409 12 p， p滴滴伊 7.48 246.318， 176 246 13 狄氏剂 7.66 79， 108， 263， 277 79 14 异狄氏剂 8.05 81， 263， 243， 281 81 15 硫丹 8.23 195， 237， 207， 265 195 16 p， p滴滴滴 8.24 235， 165， 176 235 17 顺式九氯 8.29 409， 2

25、37， 263 409 18 硫丹硫酸酯 8.91 272， 237， 229， 387 272 19 p， p滴滴涕 8.93 235， 165， 176 235 20 异狄氏剂酮 9.79 67， 317， 250， 281 67 21 甲氧滴滴涕（甲氧氯） 9.91 227， 113， 152 227 GA/T 9 B.2 血液、尿液 中 20种有机氯杀虫剂的方法检出限及定量限（ QuEChERS法） 见表 B.2。 表 B.2 血液、尿液中 20种有机氯杀虫剂的方法检出限及定量限（ QuEChERS法） 名称 检出限（ g/mL） 定量限（ g/mL） 血液 尿液 血液 尿液 六六六

26、0.15 0.15 0.5 0.5 六六六 0.10 0.10 0.5 0.5 六六六 0.15 0.15 0.5 0.5 六六六 0.10 0.10 0.5 0.5 七氯 0.15 0.15 0.5 0.5 艾氏剂 0.10 0.10 0.5 0.5 顺式氯丹 0.10 0.10 0.5 0.5 反式氯丹 0.10 0.10 0.5 0.5 硫丹 0.15 0.15 0.5 0.5 反式九氯 0.10 0.10 0.5 0.5 p， p滴滴伊 0.10 0.10 0.5 0.5 狄氏剂 0.10 0.10 0.5 0.5 异狄氏剂 0.10 0.10 0.5 0.5 硫丹 0.15 0.15

27、 0.5 0.5 p， p滴滴滴 0.10 0.10 0.5 0.5 顺式九氯 0.10 0.10 0.5 0.5 硫丹硫酸酯 0.15 0.15 0.5 0.5 p， p滴滴涕 0.10 0.10 0.5 0.5 异狄氏剂酮 0.10 0.10 0.5 0.5 甲氧滴滴涕（甲氧氯） 0.10 0.10 0.5 0.5 B.3 血液 、尿液中 20种有机氯杀虫剂 的方法检出限及定量限 （ 液液萃 取法） 见表 B.3。 GA/T 10 表 B.3 血液、尿液中 20种有机氯杀虫剂的方法检出限及定量限（液液萃取法） 名称 检出限（ g/mL） 定量限（ g/mL） 血液 尿液 血液 尿液 六六六

28、 0.15 0.15 0.5 0.5 六六六 0.15 0.15 0.5 0.5 六六六 0.15 0.15 0.5 0.5 六六六 0.15 0.15 0.5 0.5 七氯 0.15 0.15 0.5 0.5 艾氏剂 0.15 0.15 0.5 0.5 顺式氯丹 0.15 0.10 0.5 0.5 反式氯丹 0.15 0.10 0.5 0.5 硫丹 0.15 0.15 0.5 0.5 反式九氯 0.15 0.15 0.5 0.5 p， p滴滴伊 0.10 0.10 0.5 0.5 狄氏剂 0.15 0.15 0.5 0.5 异狄氏剂 0.20 0.20 0.5 0.5 硫丹 0.10 0.1

29、5 0.5 0.5 p， p滴滴滴 0.10 0.10 0.5 0.5 顺式九氯 0.10 0.15 0.5 0.5 硫丹硫酸酯 0.15 0.15 0.5 0.5 p， p滴滴涕 0.10 0.10 0.5 0.5 异狄氏剂酮 0.20 0.20 0.5 0.5 甲氧滴滴涕（甲氧氯） 0.10 0.10 0.5 0.5 GA/T 11 附录 C （资料性） 20 种有机氯杀虫剂的相关谱图 C.1 20 种有机氯杀虫剂及内标 的 GC-MS 总离子流图，见图 C.1。 说明 ： 1 六六六 （ 3.94min）； 2 六六六 （ 4.19min）； 3 六六六（ 4.32min）； 4 六六六

30、（ 4.64min）； 5 七氯（ 5.34min）； 6 艾氏剂（ 5.92min）； 7 环氧七氯（ 6.54mi，内标）； 8 顺式氯丹（ 6.94min）； 9 反式氯丹（ 7.16min）； 10 硫丹（ 7.19min）； 11 反式九氯（ 7.21min）； 12 p， p滴滴伊（ 7.48min）； 13 狄氏剂（ 7.66min）； 14 异狄氏剂（ 8.05min）； 15 硫丹（ 8.23min）； 16 p， p滴滴滴（ 8.24min）； 17 顺式九氯（ 8.29min）； 18 硫丹硫酸酯（ 8.91min）； 19 p， p滴滴涕（ 8.93min）； 20 异

31、狄氏剂酮（ 9.79min）； 21 甲氧滴滴涕（甲氧氯）（ 9.91min）。 图 C.1 20 种有机氯杀虫剂及内标 的 GC-MS 总离子流图 GA/T 12 C.2 20 种有机氯杀虫剂及内标 的 质谱图，见图 C.2图 C.22。 图 C.2 -六六六质谱图 图 C.3 -六六六质谱图 图 C.4 -六六六质谱图 图 C.5 -六六六质谱图 GA/T 13 图 C.6 七氯质谱图 图 C.7 艾氏剂质谱图 图 C.8 环氧七氯质谱图 图 C.9 顺式氯丹质谱图 GA/T 14 图 C.10 反式氯丹质谱图 图 C.11 硫丹质谱图 图 C.12 反式九氯质谱图 图 C.13 p,p -滴滴伊质谱图 GA/T 15 图 C.14 狄氏剂质谱图 图 C.15 异狄氏剂质谱图 图 C.16 硫丹质谱图 图 C.17 p,p -滴滴滴质谱图 GA/T 16 图 C.18 顺式九氯质谱图 图 C.19 硫丹硫酸酯质谱图 图 C.20 p， p滴滴涕质谱图 图 C.21 异狄氏剂酮质谱图 GA/T 17 图 C.22 甲氧滴滴涕质谱图 _