DB42 T 1698-2021 辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程.pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 DB42 湖北省 地方 标准 DB42/T 1698 2021 辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程 Technical regulation for evaluation of pepper resistance to bacterial spot 2021-06-21 发布 2021-07-21 实施 湖北省市场监督管理局 发 布 DB42/T 1698 2021 DB42/T 1698 2021 I 目 次 前 言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 接种 . 1 5 抗性鉴定接种操作 . 2 6 病情
2、调查方法 . 3 7 抗病性评价 . 4 8 记载表格 . 4 附录 A (资料性) 辣椒疮痂病病原菌和生理小种 . 6 DB42/T 1698 2021 DB42/T 1698 2021 II 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 湖北省农业科学院经济作物研究所 提出。 本文件由 湖北省农业农村厅 归口。 本文件起草单位: 湖北省农业科学院经济作物研究所、湖北省蔬菜办公室、华中农业大学。 本文件主要起草人: 李宁、尹延旭、王飞、高升华、
3、余楚英、姚明华、袁尚勇、焦春海、张成、张 余洋。 本文件实施应用中的疑问,可咨询湖北省农业农村厅,联系电话: 027-87665821,邮箱: 。对本文件的有关修改意见建议请反馈至湖北省农业科学院经济作物研究所,联系电话: 027-87380819,邮箱: 。 DB42/T 1698 2021 DB42/T 1698 2021 1 辣椒疮痂病抗性鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了辣椒疮痂病抗性鉴定的术语和定义、接种、抗性鉴定 接种操作 、病情调查 方法 、抗病 性评价以及记载表格。 本文件适用于辣椒疮痂病的抗病性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不
4、可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 NY/T 1858.5 番茄主要病害抗病性鉴定技术规程 第 5部分:番茄抗疮痂病鉴定技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 感病对照 disease-susceptible control 为 辣椒品种 Early Cal Wonder( ECW,感疮痂病品种) ,接种后的病情指数 DI50 。 3.2 抗病对照 disease-resistant control 为 辣椒材料 ECW-20R(含 Bs2 基因) ,接种后的病情指数
5、DI20 。 4 接种 4.1 病原物的纯化与保存 4.1.1 病原物的纯化 采集田间具有典型疮痂病症状的病叶,用常规组织平板稀释法从叶部病斑上分离病原物。分离物经 过培养性状、菌体形态特征、生理生化反应、分子生物学鉴定等确认为黄单 胞杆菌属细菌 菌株,再进行 分离物纯化和致病性测定。 4.1.2 接种体保存 短期保存 将新鲜菌落转移到保存培养基斜面上, 28 下培养 48 h后,置 4 下 备用 。 长期保存 将 新鲜菌液加入已灭菌的脱脂牛奶中制成 细菌悬浮液 ,经冷冻干燥抽真空后保存于密闭塑料管中, -20 以下的冰箱中长期保存。 4.2 接种体繁殖和保存 DB42/T 1698 2021
6、 2 4.2.1 接种体繁殖 用接种针挑取保存的疮痂病菌落,在 NA培养基的平板上划线,置于 28 恒温培养箱中培养 36 h 48 h,选取边缘清晰、有光泽、粘稠状的单菌落转移到培养基中 28 恒温震荡培养 16 h,加灭菌蒸馏 水配制成浓度为 210 8 cfu/mL的菌悬液。 5 抗性鉴定接种操作 5.1 鉴定室 鉴定室应具备可调节温度、湿度和光照的条件,创造良好的发病环境。 5.2 设置对照 设“ ECW”辣椒为感病对照品种,“ ECW-20R”辣椒为抗病对照品种; 接种菌株 Xcv23-1为湖北省辣 椒疮痂病优势菌株,鉴定为生理小种 P0; 辣椒 -番茄疮痂病菌模式菌 株 ICMP6
7、3( X.campestris pv. vesicatoria)为对照菌株 (参见附录 A) 。 5.3 育苗 待鉴定的辣椒种子经 10%次氯酸钠溶液浸种 8 min 10 min,灭菌水冲洗干净后置于 28 的恒温培 养箱中催芽,露白后播种于育苗穴盘中。 穴盘宜采用 50孔穴盘,每穴播种 1粒种子。 育苗基质经 121 高温蒸汽灭菌 40 min。 在 20 30 温室或大棚中育苗,幼苗应生长健壮、大小一致。 5.4 接种 5.4.1 接种时期 在幼苗 4片 6片真叶期进行接种。 5.4.2 接种体浓度 宜为 210 8 cfu/mL。 5.4.3 鉴定设计 鉴定材料随机排列,每份鉴定材料重
8、复 3次,每 次 重复 10株。 5.4.4 接种方法 5.4.4.1 注射法接种 用去针头的注射器将菌悬液注入待鉴定辣椒 的第 3片到第 4片 叶背面, 每片叶接种一个点, 形成直径 为 1 cm 2 cm的水浸区域。 以 接种 辣椒 -番茄疮痂病菌模式菌株 ICMP63为对照, 接种 灭菌 水为空白对照。 5.4.4.2 喷雾法接种 按照 NY/T 1858.5 的方法执行。以喷洒辣椒 -番茄疮痂病菌模式菌株 ICMP63为对照,喷洒灭菌水为 空白对照。在鉴定材料数量较少情况下宜采用注射法,大量材料需鉴定情况下宜采用喷雾法。 5.4.5 接种后的管理 DB42/T 1698 2021 3
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