DB23 T 2979-2021 大豆对大豆拟茎点种腐病抗病性鉴定技术规程.pdf

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1、ICS 65.020.20ICS 65.020.20CCS B 15 DB23黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23/T 29792021大 豆 对 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 抗 病 性鉴 定 技 术 规 程 2021-09-08 发 布 2021-10-07 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 2979 2021 I 前 言本 文 件 按 照 GB/T1.1-2020 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起草 。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专

2、利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责 任 。本 文 件 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出 。本 文 件 由 黑 龙 江 省 农 业 标 准 化 技 术 委 员 会 归 口 。本 文 件 起 草 单 位 ： 中 国 科 学 院 东 北 地 理 与 农 业 生 态 研 究 所 。本 文 件 主 要 起 草 人 ： 许 艳 丽 、 陆 欣 春 、 韩 晓 增 、 潘 凤 娟 、 邹 文 秀 、 李 雪 光 、 战 丽 莉 、 严 君 、 陈 旭 。 DB23/T 2979 2021 1 大 豆 对 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 抗 病 性

3、 鉴 定 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 大 豆 对 由 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 菌 （ Phomopsis longicolla Hobbs） 引 起 的 种 腐 病 抗 病 性 鉴定 术 语 和 定 义 、 病 原 菌 接 种 体 制 备 、 大 豆 种 子 要 求 、 大 豆 种 子 抗 病 性 鉴 定 和 大 豆 植 株 抗 病 性 鉴 定 。本 文 件 适 用 于 大 豆 对 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 抗 病 性 的 鉴 定 和 评 价 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本

4、 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本文 件 。GB 4404.2 粮 食 作 物 种 子 第 2 部 分 ： 豆 类SN/T 4865 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 菌 检 疫 鉴 定 方 法3 术 语 和 定 义菌 丝 覆 盖 率是 指 在 大 豆 种 子 抗 病 性 鉴 定 中 ， 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 菌 接 种 的 种 子 中 ， 菌 丝 全 部

5、 覆 盖 的 种 子 数 占 供 试种 子 总 数 的 百 分 率 。4 病 原 菌 接 种 体 制 备 4.1 培 养 基 准 备病 原 菌 菌 株 纯 化 及 分 离 所 用 培 养 基 为 酸 性 PDA培 养 基 (APDA)， 配 方 为 马 铃 薯 200g、 葡 萄 糖 20g、琼 脂 条 20g， 待 PDA培 养 基 冷 却 到 45 50 时 ， 用 过 滤 除 菌 的 85%乳 酸 调 节 pH至 4.5 后 到 平 板 。4.2 病 原 菌 接 种 体 制 备挑 取 少 量 活 化 的 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 菌 菌 丝 到 APDA上 ， 25 28 12h光

6、 照 12h黑 暗 交 替 培 养 ，直 到 长 出 典 型 菌 落 ， 并 符 合 SN/T 4865的 规 定 。5 大 豆 种 子 要 求所 用 品 种 种 子 的 质 量 要 求 按 GB 4404.2的 规 定 执 行 。 6 大 豆 种 子 抗 病 性 鉴 定 DB23/T 2979 2021 2 6.1 鉴 定 方 法 和 公 式将 病 原 菌 接 种 于 APDA培 养 基 平 板 上 ， 25 暗 培 养 5d后 ， 选 取 健 康 大 豆 种 子 ， 经 75%酒 精 消 毒3min， 用 无 菌 水 冲 洗 3遍 ， 放 置 于 灭 菌 的 滤 纸 上 稍 风 干 ， 匀

7、 距 摆 放 在 菌 落 边 缘 ， 以 APDA培 养 基 上 不 接种 病 原 菌 的 大 豆 种 子 为 对 照 ， 继 续 25 暗 培 养 5d。 每 皿 10粒 ， 重 复 3次 。 接 种 后 第 4d和 第 5d分 别调 查 发 芽 种 子 数 ， 第 5d调 查 被 菌 丝 覆 盖 的 大 豆 种 子 数 ， 计 算 种 子 发 芽 势 、 发 芽 率 和 菌 丝 覆 盖 率 。计 算 公 式 ：种 子 菌 丝 覆 盖 率 (%)=(被 菌 丝 覆 盖 种 子 数 /鉴 定 种 子 总 数 ) 100发 芽 势 (%)= 发 芽 初 期 (第 4d)正 常 发 芽 种 子 数

8、 /鉴 定 种 子 总 数 100种 子 发 芽 率 （ %） =发 芽 终 期 （ 第 5d） 全 部 正 常 发 芽 总 数 鉴 定 试 种 子 总 数 1006.2 抗 病 评 价 标 准抗 病 标 准 以 种 子 菌 丝 覆 盖 率 、 种 子 发 芽 势 和 发 芽 率 降 低 率 综 合 评 定 ， 即 如 果 种 子 菌 丝 覆 盖 率 高 于 80.0%时 ， 以 种 子 菌 丝 覆 盖 率 为 主 要 评 价 指 标 ， 如 种 子 菌 丝 覆 盖 率 低 于 80.0%时 ， 以 种 子 发 芽 势 和发 芽 率 降 低 为 主 要 指 标 。标 准 如 下 ： 种 子 菌

9、 丝 覆 盖 率 ， 种 子 发 芽 势 和 发 芽 率 降 低低 于 40.0%： 抗 病 品 种 ；40.0%59.9%： 中 抗 品 种 ；60.0%79.9%： 中 感 品 种 ；80.0%99.90%： 感 病 品 种 ；100.0%： 高 感 品 种 。记 录 见 附 录 表 A。7 大 豆 植 株 抗 病 性 鉴 定7.1 植 株 准 备 采 用 苗 期 切 顶 端 接 种 法 。 在 温 室 花 盆 中 播 种 大 豆 ， 待 大 豆 植 株 的 第 一 片 三 出 复 叶 展 平 时 ， 在 茎 节 点下 面 的 横 切 面 上 将 茎 秆 剪 断 ， 下 部 植 株 用 于

10、 接 种 。7.2 鉴 定 方 法将 病 原 菌 在 APDA培 养 基 平 板 上 25 暗 培 养 10d， 在 菌 落 边 缘 用 打 孔 器 打 取 直 径 为 5m m 的 菌 丝 块 贴 于 刚 剪 断 的 植 株 茎 秆 横 切 面 上 ， 用 封 口 膜 包 住 接 种 体 和 植 株 茎 秆 横 切 面 ， 套 塑 料 袋 保 湿 48h， 接 种 30株 ； 以 直 径 5m m 的 APDA培 养 基 块 贴 于 大 豆 植 株 茎 秆 横 切 面 作 对 照 。7.3 抗 病 性 评 价 标 准接 种 后 2d取 下 接 种 体 ， 接 种 后 7d测 量 大 豆 植

11、株 茎 病 斑 长 度 ， 并 计 算 茎 病 斑 长 度 占 植 株 茎 长 度 的百 分 率 。茎 病 斑 长 比 率 （ %） =（ 茎 病 斑 长 度 植 株 茎 长 度 ） 100 茎 病 斑 长 度 占 植 株 茎 长 度 的 百 分 率 ：低 于 4.0%： 抗 病 品 种 ；4.0%5.9%： 中 抗 品 种 ； DB23/T 2979 2021 3 6.0%7.9%： 中 感 品 种 ；8.0%9.9%： 感 病 品 种 ；10.0%以 上 ： 高 感 品 种 。记 录 见 附 录 表 B。7.4 调 查 记 录详 细 记 载 调 查 方 法 和 鉴 定 过 程 ， 并 记

12、录 存 档 。 DB23/T 2979 2021 4 附 录 A（ 资 料 性 ）大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 种 子 抗 病 性 鉴 定 记 载 、 评 价 表表 A.1 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 种 子 抗 病 性 鉴 定 种 子 菌 丝 覆 盖 率 调 查 表接 种 日 期 ： 鉴 定 地 点 ： 调 查 日 期 ：调 查 人 ： 记 录 人 ： 单 位 ：鉴 定 编 号 重 复 鉴 定 种 子 数 被 菌 丝 覆 盖 种 子 数 种 子 菌 丝 覆 盖 率（ %）III IIIIIIIIIIIIIII 表 A.2 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 种 子 抗 病 性 鉴 定 种

13、子 发 芽 势 和 种 子 发 芽 率 调 查 表接 种 日 期 ： 鉴 定 地 点 ： 调 查 日 期 ： 调 查 人 ： 记 录 人 ： 单 位 ：鉴 定编 号 重 复 鉴 定种 子 数 种 子 发 芽 数 种 子 发 芽 势（ %） 种 子 发 芽 率 （ %）接 种 第 4d 接 种 第 5dIIIIIIIIIIIIIII III DB23/T 2979 2021 5 表 A.3 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 种 子 抗 病 性 鉴 定 评 价 表接 种 日 期 ： 鉴 定 地 点 ： 调 查 日 期 ：调 查 人 ： 记 录 人 ： 单 位 ：鉴 定 编 号 鉴 定 品 种种 子

14、菌丝 覆 盖率 （ %） IIIIII平 均降 低种 子 发 芽 势（ %） IIIIII平 均降 低种 子 发芽 率（ %） IIIIII平 均降 低抗 病 性 级 别抗 病 性 评 价 DB23/T 2979 2021 6 附 录 B（ 资 料 性 ）大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 植 株 抗 病 性 鉴 定 记 载 、 评 价 表表 B.1 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 植 株 抗 病 性 鉴 定 茎 病 斑 长 度 调 查 表播 种 日 期 ： 接 种 日 期 ： 调 查 日 期 ：调 查 人 ： 记 录 人 ： 鉴 定 地 点 ：鉴 定编 号 重 复 茎 病 斑 长 度（ m m ） 植 株 茎 长 度（ m m ） 茎 病 斑 长 占 植 株 茎 长百 分 比 （ %）III IIIIIIIIIIIIIII 表 B.2 大 豆 拟 茎 点 种 腐 病 植 株 抗 病 性 鉴 定 评 价 表鉴 定 编 号 鉴 定 品 种 茎 病 斑 长 占 植 株 茎 长 比 率 （ %） 抗 病 性 级 别 抗 病 性评 价I II III 平 均 _