SN T 1017.6-2019 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法.pdf
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1、书书书 犐犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛犖 犜 代替 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法 犕犲狋犺狅犱犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿狉犲狊犻犱狌犲犻狀犮犲狉犲犪犾狊犳狅狉犲狓 狆 狅狉狋 发布 实施 中华人民共和国海关总署发布 书书书 前 言 分为以下 个部分: 第 部分:出口粮谷中环庚草醚残留量检验方法; 第 部分:出口粮谷中丁胺磷残留量检验方法; 第 部分:出口粮谷和蔬菜中戊菌隆残留量检验方法; 第 部分:出口粮谷油籽中哒菌清残留量检验方法; 第 部分:出口粮谷油籽中快杀稗残留量检验方法; 第 部分:出口粮谷中叶枯酞残留量检验方法; 第 部
2、分:出口粮谷中涕灭威、甲萘威、杀线威、恶虫威、抗蚜威残留量的测定; 第 部分:进出口粮谷中吡虫啉残留量检验方法液相色谱法; 第 部分:进出口粮谷中吡氟乙草灵残留量检验方法。 本部分是 的第 部分。 本部分按照 给出的规则编写。 本部分代替 出口粮谷中叶枯酞残留量检验方法。 本部分与 相比,主要技术变化如下: 增加了液相色谱 串联质谱法作为第一法; 原方法变更为第二法,并对部分表述进行修改; 删去了抽样步骤。 本部分由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本部分起草单位:中华人民共和国天津海关。 本部分主要起草人:章骅、娄婷婷、崔颖、林安清、张靓文。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为: 。 犛
3、犖 犜 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法 范围 本部分规定了粮谷中叶枯酞残留量的气相色谱和液相色谱 串联质谱测定方法。 本部分第一法适用于出口糙米、小麦、玉米、扁豆中叶枯酞残留量的定量测定和确证; 本部分第二法适用于出口糙米中叶枯酞残留量的定量测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 分析实验室用水规格和试验方法 第一法 液相色谱 质谱质谱法 方法摘要 试样经水浸泡,用甲醇提取叶枯酞,固相萃取净化。用液相色谱 质谱质谱仪检测,外标法定量。 试剂和材料 除另
4、有规定外,所用试剂均为分析纯,水为 规定的一级水。 甲醇:色谱纯。 甲酸:色谱纯。 甲酸水溶液( ):吸取 甲酸,用水定容至 ,混合均匀。 硅藻土。 叶枯酞标准物质( , 号 , ):纯度大于或等于 。 叶枯酞标准储备溶液:准确称取适量的叶枯酞标准物质,用甲醇配制成浓度为 的标准储 备溶液, 冰箱中保存。 叶枯酞标准中间溶液:准确吸取适量的叶枯酞标准储备溶液( ),用甲醇配制成浓度为 的标准中间溶液, 冰箱中保存。 空白样品基质溶液:选取不含待测物的样品,按照步骤 和 操作,得到空白样品基质溶液。 叶枯酞标准基质溶液:根据需要使用前吸取适量的叶枯酞标准中间溶液( ),用空白样品基质溶 液( )
5、配制成适当浓度的标准基质溶液, 冰箱中保存,使用前配制。 仪器与设备 液相色谱 串联质谱仪:配备电喷雾离子源。 犛犖 犜 天平:感量 和 。 振荡器。 食品粉碎机。 固相萃取柱: ( , ),或相当者。使用前顺次用 甲醇, 水活化。 玻璃抽滤瓶。 锥形瓶: 。 试样制备与保存 试样制备 取有代表性样品约 (不可用水洗涤),将其可食部分切碎后,充分混匀后放入食品粉碎机中粉 碎,装入洁净容器,密封并标明标记。 试样保存 在制样的操作过程中,应防止样品污染或发生残留物含量的变化。试样于 以下避光保存。 测定步骤 提取 称取 试样(精确到 )于 锥形瓶中,加入 水,静置 。加入 甲醇, 震荡 。用上敷
6、 硅藻土的滤纸抽滤。再向锥形瓶中分别加入 和 甲醇,用上述 上敷 硅藻土的滤纸抽滤,合并滤液于 锥形瓶中。 净化 经上述溶液移入净化柱( )中,弃去前 流出液,收集后 流出液,供液相色谱 串联质 谱仪测定和确证。 测定 液相色谱条件 液相色谱条件如下: ) 色谱柱: 柱, , ,或相当者; ) 柱温: ; ) 进样量: ; ) 流速: ; 流动相及梯度洗脱条件见表 。 犛犖 犜 表 流动相及梯度洗脱条件 时间 ( ) 甲醇( ) 甲酸水溶液 ( ) 质谱参考条件 质谱条件如下: ) 电离方式:电喷雾电离( ); ) 扫描方式:负离子扫描; ) 检测方式:多反应监测( ); ) 电喷雾电压: ;
7、 ) 鞘气、辅助气均为高纯氮气,碰撞气为高纯氩气。使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达 到检测要求,参考条件参见附录 。 ) 监测离子对( ): (定量离子)、 。 液相色谱 串联质谱检测及确证 根据试样中被测样液的含量情况,选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定,如 果超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下叶枯酞的参考保留时间约为 ,标准溶 液的选择性离子流图参见附录 。按照液相色谱 串联质谱条件测定样品和标准工作溶液,样品中待测 物质的保留时间与标准溶液中待测物质的保留时间偏差在 之内。定量测定时采用标准曲线法。 定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致。相
8、对丰度允许偏差不超过表 规定的范围,则 可以判断样品中存在对应的被测物。 表 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 允许的相对偏差 空白实验 除不称取试样外,均按上述步骤进行。 结果计算和表述 用色谱数据处理软件或按式( )计算试样中叶枯酞残留量,计算结果需扣除空白值: 犡 犮犞 犿 ( ) 犛犖 犜 式中: 犡 试样中叶枯酞的残留量,单位为毫克每千克( ); 犮 从标准曲线上得到的叶枯酞溶液浓度,单位为微克每毫升( ); 犞 最终样液的体积,单位为毫升( ); 犿 最终样液所相当的试样质量,单位为克( )。 注:计算结果扣除空白值。 定量限和回收率 定量限 本方法的定量限为 。
9、 测定浓度范围及回收率 本方法添加浓度及回收率的实验数据参见表 。 表 糙米中对叶枯酞不同添加水平回收率范围 基质名称添加水平回收率范围 糙米 小麦 玉米 扁豆 第二法 气相色谱法 方法提要 试样中的叶枯酞用丙酮提取,经液液分配净化提取后,用无水乙酸使其产生分子内脱水反应,衍生 为亚氨叶枯酞,再用氯化钠水溶液和正己烷进行液液分配,硅胶柱净化。用气相色谱仪 电子俘获检测 器,外标法定量。 试剂和材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为 规定的一级水。 犛犖 犜 乙腈(正己烷饱和):色谱纯。 丙酮:重蒸馏。 乙酸乙酯:重蒸馏。 正己烷:重蒸馏(乙腈饱和)。 苯:重蒸馏。 氯化钠。 无水乙酸。
10、无水硫酸钠:经 灼烧 ,冷却后,置干燥器内备用。 硅藻土。 硅胶:层析用, 目 目。使用前于 烘约 。置于干燥器中保存一周。 叶枯酞标准品:纯度 。 叶枯酞标准溶液:准确称取适量叶枯酞标准品,用乙酸乙酯配制成浓度为 的标准储 备液。 仪器与设备 气相色谱仪:带有电子俘获检测器。 天平:感量 和 。 硅胶净化柱: ( )玻璃柱,依次装入 硅胶和 无水硫酸钠。使用前用 正己烷淋洗层析柱。 旋转蒸发器:配有 梨形蒸发瓶。 微量注射器: 。 试样制备与保存 试样制备 将样品按四分法缩分至 ,全部磨碎并通过 目筛,混匀,均分成两份,分别装入洁净的容器内 作为试样,密封并标明标记。 试样保存 将试样于 以
11、下避光保存。 注:在抽样和制样的操作过程中,防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 测定步骤 提取 称取试样约 (精确到 )于 锥形瓶中,加 水,静置 。加入 丙酮, 振荡 。用上敷 硅藻土的滤纸抽滤。再向锥形瓶加 丙酮,用上述上敷 硅藻土的 滤纸抽滤,合并滤液于 梨形瓶,于 水浴旋转浓缩至约 。 分别用 氯化钠水溶液及 乙酸乙酯将上述溶液洗入 分液漏斗中,振荡 ,静置分层,乙酸乙酯层转移另一个 锥形瓶。再用 乙酸乙酯进行同样操作。合并 滤液并加入 无水硫酸钠振摇后,过滤于 梨形瓶中。用 乙酸乙酯洗涤锥形瓶和滤纸 犛犖 犜 上的残渣,合并洗液于梨形瓶中,于 水浴中旋转浓缩至近干。 用 正己烷
12、( )及 乙腈( )将上述残渣洗入 分液漏斗,振荡 ,静置 分层,保留乙腈层。向正己烷层中加入 乙腈( ),重复上述操作,合并乙腈层于 分液 漏斗中。加入 正己烷,振荡 乙腈层转移至 梨形瓶中,于 水浴中旋转浓缩至 近干,残渣用 乙酸乙酯溶解。 脱水 向上述溶液中加入 无水乙酸,加塞。于 水浴中加热 ,冷却后用 正己烷及 氯化钠溶液洗入 分液漏斗中,振荡 ,静置分层,转移正己烷层于 锥形 瓶。加入 无水硫酸钠,振摇 ,过滤于 梨形瓶。用 正己烷洗涤三角瓶和滤纸 上的残渣,合并洗涤液于梨形瓶,于 水浴旋转浓缩至近干,加入 正己烷溶解残渣。 净化 将上述溶液移入净化柱( )中,用 苯 正己烷( )
13、混和液洗脱,收集流出液于 梨形瓶中。于 水浴旋转浓缩至近干。用 正己烷溶解残渣,溶液供气相色谱测定。 标准物的脱水 取 的叶枯酞标准溶液,在室温下用氮气吹干溶剂。残渣用 乙酸乙酯溶解,之 后按( )同样操作。此溶液根据需要再用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。 测定 色谱条件 色谱条件如下: ) 色谱柱: ( ) (膜厚),或相当色谱柱; ) 柱温: ; ) 进洋口温度: ; ) 检测器温度: ; ) 载气:氮气 纯度 ,流量: ; ) 尾吹气:氮气 纯度 ,流量: ; ) 进样量: 。 色谱测定 对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定,在上述色谱条件下,亚胺叶枯酞保留时间约为 。 标准品的
14、色谱图见附录 中图 。 空白试验 除不加试样外,均按上述步骤进行。 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式( )计算试样中叶枯酞残留含量: 犡 犺犮犞 犺犿 ( ) 犛犖 犜 式中: 犡 试样中叶枯酞残留量,单位为毫克每千克( ); 犺 样液中亚胺叶枯酞峰高,单位为毫米( ); 犺狊 标准工作溶液中亚胺叶枯酞的峰高,单位为毫米( ); 犮 标准工作溶液中叶枯酞的浓度,单位为微克每毫升( ) 犞 最终样液定容的体积,单位为毫升( ); 犿 最终样液所相当的试样量,单位为克( )。 注:计算结果扣除空白值。 定量限和回收率 定量限 本方法的定量限为 。 测定浓度范围及回收率 本方法添加浓度及回收率
15、的实验数据参见表 。 表 糙米中对叶枯酞不同添加水平回收率范围 基质名称添加水平回收率范围 糙米 犛犖 犜 附 录 犃 (资料性附录) 犔犆犕犛犕犛 参考条件 监测离子对及电压参数: ) 电离方式:电喷雾电离( ); ) 电喷雾电压: ; ) 鞘气压力: ; ) 辅助气压力: ; ) 离子源温度: ; ) 碰撞气压力: ; ) 扫描方式:负离子扫描; ) 检测方式:多反应监测( ); ) 定性离子对、定量离子对、透镜补偿电压及碰撞能量等参数见表 。 表 犃 定性离子对、定量离子对、透镜补偿电压及碰撞能量 被测物名称母离子( )子离子( )透镜补偿电压 碰撞能量 叶枯酞 定量离子 ) 非商业性声
16、明:附录 中所列参数是在 液相色谱 串联质谱仪上完成的。此处列出实验用仪 器型号仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。 犛犖 犜 附 录 犅 (资料性附录) 叶枯酞标准品多反应监测色谱图 图 犅 叶枯酞标准品色谱图(保留时间: 犿犻狀 ) 犛犖 犜 附 录 犆 (资料性附录) 叶枯酞标准品衍生物亚氨叶枯酞气相色谱图 图 犆 叶枯酞标准品衍生物亚氨叶枯酞气相色谱图 犛犖 犜 犉狅狉犲狑狅狉犱 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犻狀狊狋犲犪犱狅犳犛犖 犜 犿犲狋犺狅犱犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿狉犲狊犻犱狌犲 犻狀犮犲狉犲犪犾狊犳
17、狅狉犲狓狆狅狉狋 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犮狅犿狆犪狉犲狊狑犻狋犺犛犖 犜 , 犿犪犻狀狋犲犮犺狀狅犾狅犵狔犮犺犪狀犵犲狊犪狊犳狅犾犾狅狑狊 : 犪犱犱犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犿犲狋犺狅犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋犿犲狋犺狅犱 ; 犜犺犲狅狉犻犵犻狀犪犾犿犲狋犺狅犱犻狊犮犺犪狀犵犲犱狋狅狋犺犲狊犲犮狅狀犱犿犲狋犺狅犱 , 犪狀犱狉犲狏犻狊犲狆犪狉狋狅犳狋犺犲犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀 ; 犃犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犿犲狋犺狅犱狑犪狊犱犲狏犲犾狅狆犲犱 ; 犗犿犻狋狋犻狀犵狋犺犲犿犲狋犺
18、狅犱狅犳狊犪犿狆犾犻狀犵 。 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲狅犳犌犲狀犲狉犪犾犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳犆狌狊狋狅犿狊狅犳犘犚 犆犺犻狀犪 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犜犻犪狀犼犻狀犆狌狊狋狅犿狊犇犻狊狋狉犻犮狋犘犚犆犺犻狀犪 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱狉犪犳狋犲犱犫狔犣犺犪狀犵犎狌犪 , 犔狅狌犜犻狀犵狋犻狀犵 , 犆狌犻犢犻狀犵 , 犔犻狀犃狀狇犻狀犵犪狀犱犣犺犪狀犵犔犻犪狀 犵狑犲狀 犃犾犾狆狉犲狏犻狅狌狊犲犱犻狋犻狅狀狊狅犳狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狉犲狆犾犪犮犲犱犫狔狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪
19、狉犱犪狉犲犻狊狊狌犲犱犪狊犳狅犾犾狅狑狊 : 犛犖 犜 犛犖 犜 犕犲狋犺狅犱犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿 狉犲狊犻犱狌犲犻狀犮犲狉犲犪犾狊犳狅狉犲狓 狆 狅狉狋 犛犮狅 狆 犲 犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狊狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狉犲狊犻犱狌犲犫狔犵犪狊犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犿犲狋犺狅犱犪狀犱 犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犿犲狋犺狅犱犻狀犮犲狉犲犪犾狊犳狅狉犲狓狆狅狉狋 犜犺犲犳犻狉狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋
20、狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋犻狀 狌狀狆狅犾犻狊犺犲犱狉犻犮犲 , 狑犺犲犪狋 , 犮狅狉狀犪狀犱犺狔犪犮犻狀狋犺犫犲犪狀犳狅狉犲狓狆狅狉狋 犜犺犲狊犲犮狅狀犱犿犲狋犺狅犱狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋 犻狀狌狀狆狅犾犻狊犺犲犱狉犻犮犲犳狅狉犲狓狆狅狉狋 犖狅狉犿犪狋犻狏犲狉犲犳犲狉犲狀犮犲 犜犺犲犳狅犾犾狅狑犻狀犵犱狅犮狌犿犲狀狋狊犪狉犲犲狊狊犲狀狋犻犪犾犳狅狉狋犺犲狌狊犲狅犳狋犺犻狊犱狅犮狌犿犲狀狋犃狀狔犱犪狋犲犱狉犲犳
21、犲狉犲狀犮犲犱狅犮狌犿犲狀狋 , 犱犪狋犲犱犲犱犻狋犻狅狀 , 犪狆狆犾犻犲狊狅狀犾狔狋狅狋犺犻狊犱狅犮狌犿犲狀狋犃狀狔狌狀犱犪狋犲犱狉犲犳犲狉犲狀犮犲犱狅犮狌犿犲狀狋狑犺狅狊犲犾犪狋犲狊狋犲犱犻狋犻狅狀 ( 犻狀犮犾狌犱犻狀犵犪犾犾犿狅犱犻犳犻犮犪狋犻狅狀狊 ) 犪狆狆犾犻犲狊狋狅狋犺犻狊犱狅犮狌犿犲狀狋 犌犅 犜犠犪狋犲狉犳狅狉犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔狌狊犲犛狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱狋犲狊狋犿犲狋犺狅犱狊 犃 狆狆 狉狅犪犮犺犔犻 狇 狌犻犱犆犺狉狅犿犪狋狅 犵 狉犪 狆 犺 狔 犜犪狀犱犲犿犕犪狊狊犛 狆 犲犮狋狉狅犿犲狋狉 狔 犕犲狋犺狅犱 犘狉犻狀犮犻 狆 犾犲
22、 犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狑犪狊狊狅犪犽犲犱犻狀狑犪狋犲狉 , 犪狀犱狋犺犲狋犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犪狉犲犲狓狋狉犪犮狋犲犱 狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾犛狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狑犪狊狌狊犲犱犳狅狉狆狌狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犻狊犿犪犱犲犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅 犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋犲狉 , 狌狊犻狀犵犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱 犚犲犪 犵 犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊 犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱 , 犪犾犾狉犲犪犵犲狀狋狊狌狊犲犱
23、狊犺狅狌犾犱犫犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾狔狆狌狉犲 , 狑犪狋犲狉犻狊狋犺犲犳犻狉狊狋犵狉犪犱犲狑犪 犛犖 犜 狋犲狉狆狉犲狊犮狉犻犫犲犱犫狔犌犅 犜 犕犲狋犺犪狀狅犾 : 犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犵狉犪犱犲 犕犲狋犺犪狀犲犪犮犻犱 : 犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犵狉犪犱犲 犕犲狋犺犪狀犲犪犮犻犱犪狇狌犲狅狌狊狊狅犾狌狋犻狅狀 ( ): 犜犪犽犲犿犔狅犳犕犲狋犺犪狀犲犪犮犻犱犪狀犱犾犲狋犻狋狊犲狋狋犾犲狋狅犔 , 犿犻狓 狑犲犾犾 犆犲犾犻狋犲 犜犲犮犾犲犳狋犪犾犪犿狊狋犪狀犱犪狉犱 ( 犜犲犮犾狅犳狋犪犾犪犿 , 犆犃犛犖狅 , 犆犎犆犾犖犗 ): 狆狌狉犻狋狔 犜犲犮犾犲犳狋犪犾犪
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