DB37 T 3128.3—2020 Ⅰ群禽腺病毒感染诊断技术 第3部分:血清4型Ⅰ群禽腺病毒感染间接ELISA诊断技术.pdf
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1、ICS 65.020.30 B41 DB37 山东省 地方标准 DB37/T 3128.3 2020 群禽腺病毒感染诊断技术 第 3 部分: 血清 4 型群禽腺病毒感染间接 ELISA 诊断技术 Diagnostic techniques for fowl adenovirus group infection Part 3: An indirect ELISA for detection of antibody against fowl adenovirus group serotype 4 2020-06-08 发布 2020-07-08 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 31
2、28.3 2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。 本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:山东农业大学。 本标准主要起草人:刁有祥、唐熠、杨晶、王鸿志、陈浩、冯强、张吉、宋存鑫、李伟。 DB37/T 3128.3 2020 1 群禽腺病毒感染诊断技术 第 3 部分:血清 4 型群禽腺病毒感 染间接 ELISA 诊断技术 1 范围 本标准规定了间接酶联免疫吸附试验( ELISA)检测鸡血清 4型群禽腺病毒抗体的技术规范。 本标准所规定间接酶联免疫吸附试验( ELISA)适用于鸡血清 4型群禽腺病毒
3、感染抗体的特异 性检 验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 27401 实验室质量控制规范动物检疫 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 血清 4型群禽腺病毒 Fowl adenovirus group Serotype 4 是引起鸡心包积水 -肝炎综合征的病原,主要造成 3周龄 5周龄鸡突然死亡,并伴随有心包积水和 肝炎。 3.2
4、 一抗 Primary antibodies 第一抗体就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白。本标准的一抗为经离心后分离后鸡的血清待检样 品。 3.3 酶标二抗 HRP-labeled secondary antibodies 二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产 生的针对于此抗体的免疫球蛋白,同时用辣根过氧化物酶进行标记的抗体。本标准中的酶标二抗为兔抗 鸡辣根过氧化物酶标记的 IgG,其效价应在 1:32以上。 3.4 血清标准品 DB37/T 3128.3 2020 2 SPF鸡接种血清 4型群禽腺病毒经 PCR检测为阳性后,制备的血清为阳性血
5、清; SPF鸡的血清作为标 准阴性血清, PCR检测结果为阴性。 4 实验室要求 4.1 环境 4.1.1 实验室符合 GB 19489 和 GB/T 27401要求,实验室必须为生物安全级( BSL-2级)及以上实 验室。 4.1.2 生物样品应严格控制对环境的污染,试验结束后应将相关样品(血液)收集高压灭菌后,送有 资质的医用垃圾处理公司做最终处理。 4.2 人员 操作人员应接受实验室生物安全、实验室质量管理和血清学实验室检测技术培训。熟悉生物样品处 理以及熟悉间接 ELISA检测结果的判断方法 。 4.3 仪器设备 4.3.1 台式高速离心机(最大转速为 15000 rpm)。 4.3.
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