【考研类试卷】浙江大学分子生物学真题2007年及答案解析.doc
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1、浙江大学分子生物学真题 2007 年及答案解析(总分:110.00,做题时间:90 分钟)1.分子生物学研究中,需要配制多种试剂、标样和凝胶等,以下是实验室现有有关母液和药品:10%SDS母液;5TBE 母液;10mg/ml 的溴化乙锭母液。NaCl 的分子量为 58.5;EcoR 的分子量为 125;BamH 的分子量为 415;EtBr 的分子量为 394;EDTA 的分子量为 416;Tris 的分子量为 121;HCl 的分子量为36.5;琼脂糖(Agarose)的分子量为 204。请利用以上物品,进行下列实验操作:(1)某一试剂 1 倍浓度的配方为 0.15M Tris;200mM
2、NaCl;pH 值为 8.0。请配制 400 毫升 10 倍浓度的母液(10)。(2)配制 200 毫升 1%的琼脂糖胶,含 1g/ml 的溴化乙锭;0.5的 TBE 缓冲液。(3)用浓度为 400g/ml 的商用 DNA 标样配制 200L,25g/ml 的 DNA 分子量标样。(4)现有浓度为 25g/ml 的 DNA 样品,需要进行 EcoR 和 BamH 双酶切,已知这二种酶可以用同一种酶切缓冲液。请写出对 200ng DNA 进行酶切反应的配方,请将反应体积定在 15l。(分数:20.00)_二、名词解释(总题数:5,分数:20.00)2.3非翻译区(分数:4.00)_3.酵母双杂交
3、(分数:4.00)_4.(分数:4.00)_5.蛋白糖基化(分数:4.00)_6.假基因(分数:4.00)_7.设计构建一个载体,将目的基因在植物根系表达并向根细胞外分泌。请详细写出各步骤。(分数:20.00)_8.两红眼长翅果蝇杂交,产生后代如表附录 5-2 所示,则此两果蝇的基因型如何?并图示它们杂交为什么会产生这样的实验结果。表附录 5-2雌 雄红眼长翅 3/43/8红眼短翅 1/41/8白眼长翅 3/8白眼短翅 1/8(分数:10.00)_9.分离了一系列突变,它们的生长都需要加 G。已知在 G 的生化合成途径中的成分是 A、B、C、D、E、G,但不知其顺序。经测验每一成分能通过突变体
4、(15)的生长来加以推测。在下表中“+”表示加入生长,“”表示加入不生长。(1)AE 的顺序如何排列?(2)在此途径的什么位置各种突变体都被阻断?成分测验,如表附录 5-3 所示。表附录 5-3A B C D E G1 - - - + - +2 - + - + - +3 - - - - - +4 - + + + - +5 + + + + - +(分数:10.00)_10.如何用实验来区分母性影响、伴性遗传和核外遗传?(分数:10.00)_11.端粒结构特点是什么?有何生物学功能?(分数:10.00)_12.基因突变有哪些分类方法?请至少写出 5 种。每种里面各有哪些类型?什么是 null 突变
5、,什么是 Ieaky突变?(分数:10.00)_浙江大学分子生物学真题 2007 年答案解析(总分:110.00,做题时间:90 分钟)1.分子生物学研究中,需要配制多种试剂、标样和凝胶等,以下是实验室现有有关母液和药品:10%SDS母液;5TBE 母液;10mg/ml 的溴化乙锭母液。NaCl 的分子量为 58.5;EcoR 的分子量为 125;BamH 的分子量为 415;EtBr 的分子量为 394;EDTA 的分子量为 416;Tris 的分子量为 121;HCl 的分子量为36.5;琼脂糖(Agarose)的分子量为 204。请利用以上物品,进行下列实验操作:(1)某一试剂 1 倍浓
6、度的配方为 0.15M Tris;200mM NaCl;pH 值为 8.0。请配制 400 毫升 10 倍浓度的母液(10)。(2)配制 200 毫升 1%的琼脂糖胶,含 1g/ml 的溴化乙锭;0.5的 TBE 缓冲液。(3)用浓度为 400g/ml 的商用 DNA 标样配制 200L,25g/ml 的 DNA 分子量标样。(4)现有浓度为 25g/ml 的 DNA 样品,需要进行 EcoR 和 BamH 双酶切,已知这二种酶可以用同一种酶切缓冲液。请写出对 200ng DNA 进行酶切反应的配方,请将反应体积定在 15l。(分数:20.00)_正确答案:(计算各组分用量如下:Tris 用量
7、:100.15mol/L0.400L121g/mol=72.6g;NaCl 用量:10200/1000mol/L0.400L58.5g/mol=46.8g。配制过程:分别称取 Tris 72.6g,NaCl 46.8g,置于烧杯中,加入 400ml 超纯水或蒸馏水溶解,用盐酸调节 pH 值至 8.0,混匀即可。(2)计算各组分用量如下:琼脂糖用量:200ml1%g/ml=2g;溴化乙锭用量:200ml1g/ml10g/ml=20l;所需 TBE 量:200ml0.55=20ml。配制过程:称取 2g 琼脂糖放入锥形瓶中,加入 180ml 超纯水或蒸馏水,加入 5TBE 母液 20ml,用微波炉
8、加热至沸腾 3 次以上(或 121湿热灭菌 15min),待溶液冷却至 5060,加入 10mg/ml 的 EtBr 20l,轻轻震荡混匀,倒入模具中即可。(3)计算 DNA 用量:200l25400=12.5l配置过程:用移液器吸取 400g/ml 的商用 DNA 标样 12.5l,加入 187.5l 无菌超纯水(可事先灭菌),吹打均匀即可。(4)进行酶切反应的配方如表附录 5-1 所示。表附录 5-1EcoR 0.2L BamH 0.2L10buffer1.5L 10BSA1.5LDNA 8L(200ng) ddH2O 3.6L操作过程:将酶切体系至于 37恒温条件反应 1h 后 65加热
9、 10min,使酶变性失活终止反应。)解析:二、名词解释(总题数:5,分数:20.00)2.3非翻译区(分数:4.00)_正确答案:(3非翻译区(3UTR)是 mRNA 序列上位于终止密码子后不翻译的下游非编码区,可以调控转录本的稳定性、亚细胞定位和翻译水平。与基因表达调控有关。)解析:3.酵母双杂交(分数:4.00)_正确答案:(酵母双杂交系统(Y2D:Yeast two-hybridization)一种常用的研究活细胞蛋白质间相互作用的技术。该技术在真核模式生物酵母中建立,通过对报告基因表达产物的检测可以获知蛋白质之间的相互作用,敏感性很高,即使很微弱或瞬时的作用也可以检测出。酵母双杂交的
10、主要原理如下:许多真核生物的转录激活因子都可分解为两个功能独立的结构域DNA 结合域(DNA binding domain,BD)和转录激活域(Activation domain,AD),例如酵母的转录激活因子 GAL4,就是由 N 端的 BD 和 C 端的 AD 组成的。GAL4 分子的 DNA 结合域可以和上游激活序列(upstream activating sequence,UAS)结合,而转录激活域则可以激活 UAS 下游的基因使之转录。但是 BD 和 AD 只有结合在一起才能发挥下游基因激活作用,单独的 BD 或 AD 都不能激活 UAS 的下游基因。基于此原理,酵母双杂交技术将两种
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