（浙江选考）2019版高考生物二轮专题复习加试非选择题综合应用特训第32题1生物技术实践（A）.doc

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1、1第 32 题 1.生物技术实践(A)1.铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：新生营养芽 丛状苗 幼苗原 球 茎类 似 愈 伤 组 织 长 芽 长 根 请回答以下问题：(1)选用新生营养芽为培养材料的原因是_，原球茎细胞的细胞壁_(填“厚”或“薄”)。(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光各自的作用，进行了对照实验，结果如下：培养条件 加蔗糖 不加蔗糖光 正常生长，分化 不生长，死亡暗 只生长，不分化 不生长，死亡根据以上实验结果，下列说法正确的是_。A.光为生长提供能量，蔗糖促进细胞分化B.整个组培过程中，培养基中都不用加入蔗糖也可发

2、育成幼苗C.光照只会影响到光合作用的效率D.蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化(3)生物碱属于铁皮石斛的_代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过_悬浮培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。答案 (1)分裂旺盛，全能性容易表达 薄 (2)D (3)次生 液体解析 (1)新生的芽幼嫩，分裂能力强，全能性易表达，植物组织培养过程中一般选用新生营养芽为培养材料。原球茎细胞类似愈伤组织，由于愈伤组织是一团未分化的薄壁细胞，因此，原球茎细胞的细胞壁薄。(2)通过对比加蔗糖条件下，有光组能够正常分化，无光组无法发生分化，说明光能促进细胞分化；比较不加蔗糖

3、条件下，有无光照均死亡，说明蔗糖为生长提供能量。若保证组培正常，需要加入蔗糖，故 A、B、C 错误，D 正确。(3)生物碱属于铁皮石斛的次生代谢产物，获取方法可以从植株中提取，也可以通过液体悬浮细胞培养，将愈伤组织(原球茎)分散成单细胞，然后通过培养特定细胞系实现工业化生产。2.利用废弃的秸秆生产燃料乙醇，不仅缓解了资源危机、环境污染，同时更为可持续发展提2供了保证。下面是利用玉米秸秆来生产乙醇的流程：玉 米 秸 秆 预 处 理 纤 维 素 微 生 物 1 发 酵 葡 萄 糖 微 生 物 2 发 酵 乙 醇(1)从纤维素丰富的土壤中获取微生物 1，进行一系列的操作后，用_将菌种涂布在相应的固体

4、培养基中。(2)下列有关涂布分离法的叙述，错误的是_。A.从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液B.接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃C.培养后菌落在整个平板表面分散均匀D.涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落(3)为了提高生产效率，也可通过培养微生物 1 获得_酶，并将该酶固定在某介质上制成固定化酶。(4)微生物 2 通常是_，为了确保获得产物乙醇，接种微生物 2 时要注意避免_，发酵时要注意_。发酵获得的低浓度乙醇经过蒸馏、提纯等加工，才可以得到浓度大于 90%的燃料乙醇。答案 (1)玻璃刮刀 (2)A (3)纤维素 (4)酵母菌 杂菌污染 无氧3.(2018金华十校期末调研)回答与“-淀

5、粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”有关的问题：(1)在酶的固定化时，共价偶联法比吸附法对 -淀粉酶活性的影响更_(填“大”或“小”)。(2)实验室常用枯草芽孢杆菌来制备 -淀粉酶，枯草芽孢杆菌的 -淀粉酶的最适 pH 范围是_。(3)在固定化 -淀粉酶水解淀粉作用的检测实验中，固相淀粉酶水解淀粉的鉴定实验结果为：淀粉溶液加指示剂呈蓝色；_加指示剂呈红色。(4)枯草芽孢杆菌也是制备蛋白酶的良好原料，为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产菌株，将分别浸过不同菌株(ae)的分泌物提取液及无菌水(f)的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在 37 恒温箱中放置 23 天，结果如下图。若需要保存 a

6、 菌株，可将其接种至斜面上，培养后置于_中保存。菌株 b 提取物周围没有形成明显清晰区的原因：_；_。3答案 (1)大 (2)5.57.5 (3)亲和层析洗脱液 (4)4 冰箱 不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足 合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足 分泌的蛋白酶活性低(任意答出两点)4.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变_色。(2)在 5 个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为 105的土壤样品溶液 0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为 13、156

7、、462、178 和 191。该过程采取的接种方法是_，每克土壤样品中的细菌数量为_10 8个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_。答案 (1)尿素 酚红 红 (2)涂布分离法 1.75 少解析 (1)脲酶由分解尿素的细菌产生，故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，故培养基中加入酚红指示剂后，菌落周围将出现红色。(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数，在计数时一般选择菌落数在30300 的平板进行计数，并取平均值。因培养基上两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计结果往往较实际数目少；而用血细胞计数板计

8、数时，死亡的、活的菌体都计数在内。5.(2018湖州、衢州、丽水教学质量检测)猕猴桃是人们非常喜爱的一种水果，人们不仅直接食用猕猴桃，还对其进行深加工，制成猕猴桃果汁、果酒等。下图为生产猕猴桃果汁和果酒的流程示意图，请回答下列问题：(1)在生产猕猴桃汁的流程中，为了提高出汁率，可在压榨前加入一定量的_处理 1 小时。(2)猕猴桃汁在保藏期的某一阶段会产生酚类物质导致果汁褐变或二次浑浊，后来人们发现，漆酶能有效降解酚类物质，使果汁澄清。将漆酶应用于果汁澄清的过程中，可采用交联法固4定该酶，固定化酶技术的优点是_。工业上固定化酶的方式较多，除上述方法外，还有吸附法、_、共价偶联法等。(3)制作好的

9、果汁也可继续用于猕猴桃酒的生产。在进行发酵前需要在猕猴桃汁中接入的菌种是_，同时添加适量蔗糖，主要目的是_。在发酵时，当出现_现象，即表示发酵完毕。(4)当主体发酵结束后，需将上层“酒液”转移到另一灭菌容器中进行后续贮藏，此时为了防止醋酸菌污染，加入容器中“酒液”的量应为_(A.注满 B.2/3 C.1/3 D.无特殊要求)，以保证果酒的品质。答案 (1)果胶酶 (2)酶与产物易分离或酶可反复利用，提高酶的利用率(答出一点即可) 包埋法 (3)酵母菌 提高果酒的酒精度或甜度(含糖量) 停止产生气泡 (4)A6.利用酵母菌生产乳糖酶首先要筛选高产乳糖酶的酵母菌种。具体如下：(1)在无菌条件下，将

10、经过处理的马奶酒进行稀释，然后用_法接种于含有乳糖的固体培养基上。培养后观察到_；其周围出现水解圈，水解圈的直径大小与_强弱相关。(2)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行扩大培养。扩大培养通常用_培养基，培养时需要_，其主要目的是供氧。(3)若要保存菌种，可以采用的保存条件是_。A.平面培养基、37 B.平面培养基、4 C.斜面培养基、37 D.斜面培养基、4 答案 (1)涂布分离 单菌落 乳糖酶的活性 (2)液体 振荡 (3)D7.(2018全能生 B 卷)焚烧农作物秸秆给农村带来了极大污染，为了实现可持续发展的目标，我 国 科 学 家 想 到 利 用 特 定 的 微 生 物 将 秸 秆

11、 中 的 纤 维 素 分 解 成 葡 萄 糖 ， 再 发 酵 产 生 清 洁 能 源乙 醇 。(1)欲从土壤中分离获取上述分解秸秆的特定微生物，所用培养基以_为唯一碳源。在培养基上完成接种后，需将培养皿_，然后置于恒温箱中培养。(2)将上述菌株进行培养，从中分离得到纤维素酶并制成酶液，将该酶液和秸秆粉碎物混合，从发酵物中分离得到葡萄糖，但是酶不可重复利用，因此需要采用_技术。在合适条件下，将提纯的该酶与石英砂混合后，不时搅拌，该方法是_。(A.吸附法 B.包埋法 C.交联法 D.共价偶联法)。(3)酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，发酵瓶需要定期排气的主要原因是_。发酵一定时间后，观察

12、到发酵瓶内液面_，说明发酵基本完毕。影响乙醇发酵的因素很多，下图是某研究小组的研究成果，请写出该图的名称：_。5答案 (1)纤维素 倒置 (2)固定化酶 A (3)发酵过程中会产生大量 CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂 停止出现气泡 发酵天数和 pH 对发酵产生的乙醇浓度的影响8.(2018浙江 11 月选考，32(一)回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从_时开始计时。对于不耐热的液体培养基，一般可将其转入 G6 玻璃砂漏斗中，采用_方式可较快地进行过滤灭菌。(2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加_的过程。某醋化醋杆菌培

13、养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是_。(3)为筛选胞外 -淀粉酶分泌型菌种，一般从_(A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个_比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取_用于检测酶活性。答案 (1)达到设定的温度或压力值 抽滤(2)将淀粉分解成糖 作为碳源(3)C 水解圈直径与菌落直径 上清液解析 (1)高压蒸汽灭菌的计时时间从达到设定的温度或压力值开始，采用抽滤方式用 G6 玻璃砂漏斗进行过滤灭菌。(2)将 淀 粉 分 解 成 糖 ， 便 于 微 生 物 的 利 用 ， 醋 化 醋 杆 菌 培 养 基 中 的 甘 露 醇 的 主 要 作 用 是 作 为碳 源 。(3)筛选富含 -淀粉酶的菌种要在富含淀粉的环境中筛选，故选 C。水解圈直径与菌落直径比值越大说明菌种分泌的酶活性越高。