CNS 12634-2006 Method of test for fruit and vegetable juice products - Determination of sugars by HPLC《水果及蔬菜汁饮料检验法－糖类之测定(HPLC法)》.pdf

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1、1 印月954月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 67.160.20 N622312634經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 7111月22日 954月19日 (共2頁)水果及蔬菜汁飲料檢驗法 糖類之測定（HPLC法） Method of test for fruit and vegetable juice products Determination of sugars by HPLC 1. 適用範圍：本標準規定水果及蔬菜汁飲料中以高效液相層析儀測定糖類之方法。 2. 檢驗方法 2.1 裝置：高效液相層析儀(high performance li

2、quid chromatography, HPLC)。 2.1.1 偵檢器：RI偵檢器(Refractive index detector)。 2.1.2 層析管：Lichrospher NH2，5 m，內徑4 mm 25 cm或同等級品。 2.2 器具及材料 2.2.1 冷凍離心機或超高速離心機。 2.2.2 濾膜：孔徑0.45 m，直徑13 mm。 2.3 試藥：乙醇採試藥特級，乙腈採液相層析級，木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖採試藥特級級。 2.4 試劑之調製 2.4.1 50%乙醇溶液：取酒精500 mL加二次去離子水，定容至1000 mL。 2.4.2 移動相溶液：乙腈與去離子水以82：18

3、 (v/v)比例混合後經濾膜過濾並脫氣。 2.5 標準溶液之配製 2.5.1 糖類標準溶液：取糖類標準品約3g，置於真空烘箱70 乾燥4小時以上。 2.5.1.1 葡萄糖(1.0%)溶液：稱取乾燥後葡萄糖標準品1.0 g，加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.1.2 果糖(1.0%)溶液：稱取乾燥後果糖標準品1.0 g，加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.1.3 蔗糖(1.0%)溶液：稱取乾燥後蔗糖標準品1.0 g，加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.2 糖類內部標準溶液：稱取木糖10 g於100 mL容量瓶中，精確稱定，以50%乙醇溶液使其完全溶解，再定容至

4、100 mL，供作10%木糖內部標準溶液。 2.5.3 糖類混合標準溶液：稱取葡萄糖、果糖及蔗糖各1.5 g，置於50 mL容量瓶中，精確稱定，以50%乙醇溶液使其完全溶解，再定容至50 mL。各取7 mL、4 mL、1 mL分別置於10 mL容量瓶中，各加入10%木糖內部標準溶液1 mL，再以50%乙醇溶液定容至10 mL，混合均勻後，以濾膜過濾後備用。 2.6 檢液之調製：將樣品充分混合均勻後，取適量體積於100 mL容量瓶，加入10%木糖內部標準溶液10 mL及50%乙醇溶液50 mL，混合均勻，定容至100 mL，以高速離心15分鐘後，取澄清液經濾膜過濾，供作檢液。 2 CNS 126

5、34, N 6223 2.7 鑑別試驗與含量測定：精確量取檢液及糖類混合標準溶液各20 L，分別注入高效液相層析儀中，參照下列條件進行液相層析，就檢液與標準溶液所得波峰滯留時間比較鑑別之，並依下列計算式求出檢體中糖類之含量(%)。 糖類(g/100 mL)X V1 D.F. V X：試樣溶液經鑑定後，其波峰面積代入標準曲線求得之濃度(g/100 mL) V1：定量體積(mL) V：樣品取樣體積(mL) D.F.：稀釋倍數 高效液相層析測定參考條件 層析管柱：Lichrospher NH2，5 m，內徑4 mm 25 cm 偵檢器：RI偵檢器 移動相溶液：依第2.4.2節所調製之溶液 移動相流速：1.0 mL/min 相對應國際標準：IFU Method No.67, 1996, Determination of Sugars and Sorbitol 修訂日期：第一次修訂：80年6月25日 第二次修訂：93年8月16日