GB T 23208-2008 河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品残留量的测定.液相色谱-串联质谱法.pdf
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1、ICS 67050X 04 囝囤中华人民共和国国家标准GBT 23208-2008河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法Determination of 450 pesticides and related chemicals residuesin fugu,eel and prawnLC-MSMS method200812-31发布 200905-0 1实施丰瞀鹊鬻瓣訾辫瞥星发布中国国家标准化管理委员会促1”前言一1 范围2规范性引用文件3原理4试剂和材料5仪器6试样制备与保存一7测定步骤8结果计算9精密度附录A(资料性附录)标准溶液浓度附录B(资料性附
2、录)时间附录C(资料性附录)附录D(资料性附录)附录E(资料性附录)目 次GBT 232082008450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合450种农药及相关化学品监测离子对、碰撞气能量、源内碎裂电压和保留450种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图 450种农药及相关化学品精密度数据表450种农药及相关化学品英文中文名称对照索引(按英文字母顺序),222556加船船刖 罱本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。本
3、标准主要起草人:庞国芳、郑锋、范春林、李岩、王明林。GBT 23208-2008河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱一串联质谱法GBT 23208-20081 范围本标准规定了河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品(参见附录A和附录E)残留量液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于河豚鱼、鳗鱼和对虾中450种农药及相关化学品的定性鉴别,也适用于其中380种农药及相关化学品的定量测定。本标准定量测定的380种农药及相关化学品方法检出限为002 pgkg01 95 mgkg(参见附录A)。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期
4、的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件。其最新版本适用于本标准。GBT 63791 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第l部分:总则与定义(GBT 63791 2004,ISO 57251:1994,IDT)GBT 63792测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GBT 63792-2004,Is()5725 2:1 994,IDT)GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682 2008
5、,1S0 3696:1 987,MOD)GBT 969519肉与肉制品取样方法(GBT 96951 9 1988,neqISODIS 3100 l:1 984)3原理试样用环己烷+乙酸乙酯(1+1)均质提取,凝胶渗透色谱净化,液相色谱串联质谱仪测定,外标法定量。4试剂和材料水为GBT 6682规定的一级水。41乙腈:色谱纯。42环己烷:色谱纯。43乙酸乙酯:色谱纯。44甲酸:优级纯。45乙酸胺:优级纯。46甲醇:优级纯。47甲苯:优级纯。48丙酮:优级纯。49无水乙酸钠:分析纯。410微孑L过滤膜(尼龙):13 133Ill02弘m,1 3 mm045 gm。1GBT 23208-200841
6、1无水硫酸钠:分析纯。用前在650灼烧4 h。贮于干燥器中,冷却后备用。412 01甲酸溶液(体积分数)。413 5 mmolL乙酸铵溶液:称取0375 g乙酸铵,加水稀释至1 000 mL。414农药及相关化学品标准物质:纯度95。415环己烷+乙酸乙酯混合溶剂:1+l(体积比)。416农药及相关化学品标准溶液4161标准储备溶液准确称取5 mg10 mg(精确至01 mg)农药及相关化学品各标准物质分别放入10 mL容量瓶中,根据标准物质的溶解度选甲醇、甲苯、丙酮、乙腈等溶解并定容至刻度(溶剂选择参见附录A)。标准储备溶液避光4保存,可使用一年。4162混合标准溶液按照农药及相关化学品的保
7、留时间,将450种农药及相关化学品分成A、B、c、D、E、F、G七个组并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度,确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对450种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液浓度参见附录A。依据每种农药及相关化学品的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度,移取一定量的单个农药及相关化学品标准储备溶液于】00 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光4保存可使用一个月。4163基质混合标准工作溶液农药及相关化学品基质混合标准工作溶液是用样品空白溶液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液A、B、c、D、E、F、G,用于做标准工作曲线。基质混合标准工作溶液应现用现
8、配。5仪器51 液相色谱串联质谱仪:配有电喷雾离子源。52凝胶渗透色谱仪:配有360 HIIll25 film,内装BIO Beads S X3填料的净化柱或相当者。53分析天平:感量01 mg和001 g。54旋转蒸发器。55均质器:最大转速为24 000 rmin。56离心机:最大转速为4 200 rmin。57鸡心瓶:200 mI。58移液器:1 m1。59氮气吹干仪。6试样制备与保存61试样的制备按GBT 96951 9抽取的样品用绞肉机绞碎,充分混匀,用四分法缩分至不少于500 g作为试样装入清洁容器内,密封后,标明标记。62试样的保存将试样于18冷冻保存。7测定步骤71提取称取10
9、 g试样(精确至001 g),放人盛有20 g无水硫酸钠的joml离心管中,加入35mL环己烷+2GBT 23208-2008乙酸乙酯(1+1)混合溶剂。用均质器在1 5 000 rrain均质提取15 rain,在3 800 rrain离心3 rain。上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗,收集于100 mI。鸡心瓶中,残渣用35 mL环己烷+乙酸乙酯(1+1)混合溶剂重复提取一次,经离心过滤后,合并两次提取液,将提取液于40水浴用旋转蒸发器旋转蒸发至约5 mL,待净化。若以脂肪计,将提取液收集于已称重的鸡心瓶中,40旋转蒸发至约5 mI。后,然后再用氮气吹于仪吹于残存的溶剂,称重鸡心瓶,记下
10、脂肪质量,待净化。72凝胶渗透色谱净化721条件a)净化柱:360 mm25 mm,内装BIOBeads S-X3填料或相当者;b)检测波长:254 nm;c)流动相:乙酸乙酯+环己烷(1+l,体积比);d)流速:47 mLmin;e)进样量:5 mL;f)开始收集时间:26 rain;g)结束收集时问:44 min。722净化将浓缩的提取液或脂肪用乙酸乙酯+环己烷混合溶剂(1+1)溶解转移至10 mL容量瓶中,用约5 mI,环己烷+乙酸乙酯混合溶剂分两次洗涤鸡心瓶,并转移至上述10 mL容量瓶中,再用环己烷+乙酸乙酯混合溶剂定容至刻度,摇匀。样液通过045 pm滤膜过滤人10 mL试管中,用
11、凝胶渗透色谱仪净化,收集26 min44 rain的馏分,在40水浴中旋转浓缩至约05 mL,于35下氮气吹干,1 mL乙腈+水(3+2)溶解残渣,02 pm微孔滤膜过滤后供液相色谱一串联质谱分析。同时取不含农药及相关化学品的河豚鱼、鳗鱼和对虾样品,按71和72步骤制备样品空白提取液,用于配制基质混合标准工作溶液。73液相色谱一串联质谱测定731条件7311 A、B、c、D、E、F组液相色谱串联质谱仪器条件a)色谱柱:ZORBAX SB-C35 pm,100mm21 ram(内径)或相当者;b) 流动相及梯度洗脱条件见表1;表1 流动相及梯度洗脱条件时间rain 流速(pLmin) 流动相A(
12、O1甲酸水) 流动相B(乙腈)000 400 990 1 03 00 400 70 0 3006 00 400 60 0 40 09 00 400 600 40015 00 400 400 60 019 00 400 10 9902300 400 1 0 99023 0l 400 99 0 l 0c) 柱温:40;d) 进样量:10肛L;e) 电离源模式:电喷雾离子化f) 电离源极性:正模式;GBT 23208-2008g)雾化气:氮气;h)雾化气压力:028 MPa;i)离子喷雾电压:4 000 V:j)干燥气温度:350;k)干燥气流速:10 Lrain;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内
13、碎裂电压参见附录B。7312 G组液相色谱串联质谱仪器条件a)色谱柱:ZORBAX SBC18,35 pm100 mm21 ram(内径)或相当者b) 流动相及梯度洗脱条件见表2;表2流动相及梯度洗脱条件总时间min 流速(pLmin) 流动相A(5 mmoI乙酸铵水) 流动相B(乙腈)0 00 400 99 0 103 00 400 70 0 30 0600 400 60 0 400900 400 60 O 40015 00 400 400 6001900 400 10 99 02300 400 1 0 99 023 01 400 99 0 1 0c)柱温:40;d)进样量:10 pI,;e
14、) 电离源模式:电喷雾离子化;f)电离源极性:负模式;g)雾化气:氮气;h)雾化气压力:028 MPa;i)离子喷雾电压:4 000 V;j)干燥气温度:350;k)于燥气流速:10 Lmin;1) 监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。732定性测定在相同实验条件下进行样品测定时,如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致并且在扣除背景后的样品质谱图中,所选择的离子均出现而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致(相对丰度50,允许20偏差;相对丰度2050,允许25偏差;相对丰度1020,允许30偏差;相对丰度10,允许50偏差),则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。
15、733定量测定本标准中液相色谱一串联质谱采用外标一校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响,定量用标准溶液应采用基质混合标准工作溶液绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药及相关化学品的响应值均在仪器的线性范围内。450种农药及相关化学品多反应监测(MRM)色谱图参见附录c。74平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验。dGBT 23208-200875空白试验除不称取试样外,均按上述步骤进行。8结果计算液相色谱一串联质谱测定采用标准曲线法定量,标准曲线法定量结果按式(1)计算:x,一鲁揣 式中:x。斌样中被测组分残留量,单位为毫克每升(ragL);C。从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度,单
16、位为微克每毫升(vgmL);V。样品溶液定容体积,单位为毫升(mL);m样品溶液所代表试样的质量,单位为克(g)。计算结果应扣除空白值。9精密度本标准精密度数据是按照GBT 63791和GBT 63792的规定确定的获得重复性和再现性的值是以95的可信度来计算。本标准方法的精密度数据参见附录D。GBT 23208-2008附录A(资料性附录)450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度见表A1。表A1 450种农药及相关化学品中、英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准
17、溶液浓度检出限 混合标准溶液序号 中文名称 英文名称 溶剂(pgkg) 浓度(mg。)A组l 苯胺灵 propham 44 00 甲苯 11002 异丙威 092 甲醇 0 233 3,4,5混杀威 3,4,5 trimethacarb 014 甲醇 0 034 环莠隆 0 08 甲醇 0025 甲萘威 carbaryl 413 甲醇 1036 毒草胺 propachlor 0L1 甲醇 0037 吡咪唑 rabenzazoe 053 甲醇 0138 西草净 005 甲醇 0019 绿谷隆 1 42 甲醇 0 3610 速灭磷 0 63 甲苯 0 1 6il 叠氮津 azlProtryne 0
18、 55 甲醇 0 1412 密草通 0 03 甲醇 0 01】3 嘧菌磺胺 cyprodinil 0 30 甲醇 00714 播土隆 3 j8 甲醇 0901 5 双酰草胺 carbetamide 1 46 甲醇 0 3616 抗蚜威 0 06 甲醇 0 0217 异呼草松 0 1 7 甲醇 0 0418 氰草津 0 07 甲醇 00219 扑草净 0 07 甲醇 0 0220 甲基对氧磷 paraoxon ITleIhy 0 31 甲醇 0082l 4,4一二氯二苯甲酮8 44 dlchlorobenzonhenone 5 44 甲醇 13622 噻虫啉 tdacloprid 0 15 甲醇
19、 0 0423 吡虫啉 lmidacloprid 880 甲醇 2 2024 磺噻隆 ethidimuron 0 60 甲醇 01525 T嗪草酮 0 43 甲醇 0 ll26 燕麦敌 diallate 35 68 甲醇 8 9227 乙草胺 acemchkjr 18 96 甲醇 -1 7428 烯啶虫胺。 niIenPyrain 6 85 甲醇 1 71表A1(续)GBT 23208-2008检出限 混合标准溶液序号 中文名称 英文名称 溶剂(pgkg) 浓度(ragL)29 盖草津。 melhoprotryne 0 10 甲醇 0 0230 二甲酚草胺 dimethenamid 172 甲
20、醇 0 4 331 特草灵 terrbuearb 0 84 甲醇 02132 戊菌唑 080 甲醇 02033 腈菌唑 myclobutanil 040 甲醇 0 1034 咪唑乙烟酸 imazethapyr 045 甲醇 0 1135 多效唑 paclobutraz01 023 甲醇 0 0636 倍硫磷亚砜 enthion sulfoxide 013 甲醇 00337 三唑醇 triadimen01 422 甲醇 1 0638 仲丁灵 butralin 076 甲醇 01939 螺啄茂胺 002 甲醇 00140 甲基立枯磷 mIeloos methyl 2662 甲醇 6 664I 甜菜
21、胺 desmedipham 1 6l 甲醇 0 4042 杀扑磷 methidathioa 426 甲醇 L 0743 烯丙菊酯 allethrin 24 1 6 甲醇 6 0444 二嗪磷 029 甲蓉 00745 敌瘟磷 edifenphos 0 30 甲醇 0 0846 丙草胺 Dretllachlor 0 13 甲醇 0 0347 氟硅唑 flusilazole 0 23 甲醇 00648 丙森锌 iprovalicarb 093 甲醇 02349 麦锈灵 benodaniI 1 0) 甲醇 03550 氟酰胺 flulolanil 0 4 6 甲醇 O 125l 氨磺磷 farnph
22、u r l 44 甲醇 0 3652 苯霜灵 benalyxyl 0 50 甲醇 0 1 253 苄氯三唑醇 diclobutrazole 01 9 甲醇 00554 乙环唑 0 71 甲醇 01 855 氯苯嘧啶醇 fenarimol 0 24 甲醇 0 0656 酞酸二环己基酯 phthalic acid,dicyclobexyl ester 0 80 甲醇 0 2057 胺菊酯 0 73 甲醇 0 1858 抑菌灵8 dlchlofluanld l 04 甲苯 0 26j9 解草酯 cloquintocet mexyl 075 甲醇 0 1960 联苯三唑醇 bltertanol 133
23、6 甲醇 3 346l 甲基毒死蜱 chlmprifos methyl 6 40 甲醇 l 6062 吡哺草酮 lepraloxydim 4 88 甲醇 l 22GBT 232082008表A1(续)检出限 混合标准溶液序号中文名称 英文名称 溶剂(pgkg) 浓度(mgI。)63 益棉磷 azinphos ethyl 4357 甲醇 108964 炔草酸8 clodinafop propargyl 098 甲醇 02465 杀铃脲 triflumuron 1 57 甲醇 03966 异唾氟草 isoxaflutole 1 56 甲醇 03967 莎稗磷 anilofos 029 甲醇 007
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