GB 8276-1987 食品添加剂 糖化酶制剂.pdf
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1、中华人民共和国国家标准食品添加剂糖化酶制剂Fo。dadditive Glucoamvlase preperatlon UDC 661. 733 664 GB 8276-87 本标准适用于由发酵法生产,经提纯和j取,供食品生产作添加剂用的糖化酶制剂。1 技术要求1. 1 外观s固体时,粉状,无结块。液体时,黄褐色,允许有少量凝集物1. 2 项目和指标表1指标项目固体30 000, 40 000, 50 000, 60 000, 酶活力,u/g(mL) 80 ooo, 100 000, 150 ooo. 200 000 水分,%小于8 0 细度(通过40日铜网筛,%不低于80 酶活力保存率(室温,
2、半年),%不低于80 _j;金属以Pb计,%不超过0.004 铅,%不超过o. 001 呻(以A,计),%不超过o. 000 3 黄曲霉毒素酌,%不超过0 000 000 5 大肠菌群,个lOOg(mL) 不多于30 沙门氏菌不得栓出2试验方法2. 1 外观z用目视判定。中华人民共和国轻工业部198710-19批准90 液体20 000. 30 000 40 000 50 000 60 000. 80 000 1988 02-01实施2.2酶活力测定2 2. 1 试剂GB 8276-87 2 2. 1 1 o. IN乙酸乙酸销缓冲溶液(pH4.6) I称取6.7g乙酸纳(CH,COONa 3H
3、,0J,吸取冰乙酸2.6mL,用蒸馆水溶解定容至IOOOmL,上述缓冲榕液应以自费度计校正pH值。2 2. 1 2 O. 05N硫代硫酸铺溶液z按GB601化学试剂标准溶液制备方法中2.7执行。2213 O.lN礁液2按GB601 化学试剂标准溶液制备方法中2.10执行。2 2. 1 4 O. IN氢氧化锅溶液z按GB601 化学试剂标准溶液和j备方法中2.2执行。2-215 2N硫酸溶液z量取分析纯浓硫酸(比重J.84) 5. 6mL缓缓加入适量蒸偏水中,冷却后用蒸馆水定容至JOOmL,摇匀。2. 2. 1. 6 20 %氧氧化销榕液z称取20g分析纯氢氧化俐,用蒸馆水溶解定容至!OOmL.
4、2.2.1.7 2%可溶性淀粉溶液z称取可榕性淀粉2.00g,然后用少量蒸馆水调匀,徐徐倾入已沸的蒸馆水中,煮沸至透明,冷却,用蒸馆水定容至JOOmL,此榕液需当天配制。注可向野性淀粉应符合HG3 3095质量标准要求。2.2.2 测定程序2.2.2. 1 待测酶液的制备z称取酶粉2.000 Og (或J.OOmL酶液),但l入SOmL烧杯中用少量的乙酸乙酸锅缓冲溶液(pH4.6)溶解,并用玻璃棒捣碎,将上层清液小心倾入适当的容量瓶中,沉渣再加入少量上述缓冲溶液。如此反复捣研34次,最后全部移入容量瓶中,用缓冲溶液定容至刻度,摇匀,用4层纱布过滤。再用滤纸槽,滑,滤液供测定用。浓缩酶液可直接吸
5、取定量于容量瓶中,用缓冲溶液稀释定容至费l度。注2制备酶液时酶液浓度最仔控制在f肖娓O.OSN硫代硫酸销空白一一样品)的差数为36mL左有(以每毫升酶活力约5090单位均宦2.2.2.2 测定于甲、乙两支50mL比色管中分别加入2%可溶性淀粉溶液25mL,0.M乙酸乙酸纳缓冲溶液(pH4.6l5mL.摇匀a于40士o.2的恒温水浴中预热5IOn1in.在甲管中加入酶制备液z. Om_ (酶的总活力约l10 l 70单位)立即ic时,播匀。在此温度下准确反应lh后立即在甲、乙商管各加20%氮氧化锅溶液。2mL,摇匀将两管取出迅速用水冷却,并于乙管中补加酶制备液z.OmL 作为对照)取两管中七述反
6、应液各5mL放入礁量瓶中准确加入。IN棋液!OmL,再加O.N氢氧化饷溶液!5mL边加边摇晃),放置暗处ISmin,加入ZN硫酸ZmL.用o.05N硫代硫酸纳溶液滴定毫无色为终点。2. 2. 2. 3 计算lg酶粉或!mL酶液在40、H4.6的条件下,lh分解可溶性淀粉产生!mg葡萄糖的酶量为个酶活力单位。I 32. 2 X= A) x N 90. 05 x一一xn ”. . ( 1 ) 2 5 式中X一酶活力单位,叫区mL); A一一空白试验消耗硫代硫酸例溶液的毫升敬R一一样品消耗硫f.;.硫酸纳榕液的毫升数;N一硫代硫酸糊f阔的当量浓度:,稀释倍数:go. 05 lmL!N硫代硫俄纳相当葡
7、萄糖毫克数,l/2一一折算成ln1L酶液的量32. 2一反应液总体丰J .毫升数$5一一吸取反应液的毫升数。为计算方便可按稀辑倍数参考表计算系数乘以i滴定空白和样品所消耗。.05N硫代硫酸制溶液Yl 的差值(A-B)为酶活力单位表2为稀释倍数参考表。稀释倍敬原液2 5 10 15 20 25 30 2. 3 水分2.3. 1 测定程序事GB 8276-87 表Z稀释倍数参考表数精串倩数系数14-5 35 507. 5 29 40 580 72.5 45 652. 5 145 50 725 217.5 100 l 450 290 200 2 900 362-5 250 3 625 435 于己知
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