GB 15193.9-2003 显性致死试验.pdf

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1、ICS 07. 100 c 53 中华人民共和国国家标准显性致死试Dominant lethal test 2003-09-24发布中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会GB 15193.9-2003 代替GB15193. 9 1994 验2004-05-01实施发布65 GB 15193.9-2003 前目本标准全文强制。本标准代替GB15193. 9-1994显性致死试验。本标准与GB15193. 9一1994相比主要修改如下在“范围”中增加了受试物的具体内容：食品生产、加工、保藏、运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的化学、生物和物理因素，检验对象包括食品添加剂含蓄养强化剂、

2、食品新资源及其成分、新资源食品、辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备、洗涤剂、消毒剂、农药残留、兽药残留、食品工业用微生物等；一一在“实验动物”中：将“成年小鼠（体重30g以上）或大鼠（体重zoog以上）”改为“成年小鼠（性成熟，体重30g以上）或大鼠（性成熟，体重200g以上）”，“动物数量”雄性动物每组不少于1015只，雌性动物每组不少于20只30只，改为雄性动物每组不少于15只，雌性动物每组不少于30只受孕鼠；将“分组”下的两项内容“组数”和“动物数量”合并改为“剂量及分组”，高剂量组的设计方法增加一条“急性毒性试验给予受试物最大给予剂量（最大使用浓度和最大灌胃容量）测不到LDs

3、时则以10g/kg体重、人的可能摄入量的100倍、或受试物最大耐受量为最高剂量飞增加“结果判定”内容。自本标准实施之日起，GB15193. 9 1994同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位同济医科大学、上海医科大学。本标准主要起草人2朱清华、柳启沛。本标准于1994年首次发布，本次为第次修订。66 GB 15193.9-2003 显性致死试验1 范围本标准规定了显性致死试验的基本技术要求。本标准适用于评价食品生产、加工、保藏、运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的化学、生物和物理因素的致突变作用和对人体可能产生的危害（检测染色体结构和数量的损伤，但不能检测基因

4、突变和毒性作用），检验对象包括食品添加剂（含营养强化剂）、食品新资源及其成分、新资源食品、辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备、洗涤剂、消毒剂、农药残留、兽药残留、食品工业用微生物等。2 原理致突变物可引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变，以致不能与异性生殖细胞结合或导致受精卵在着床前死亡，或导致胚胎早期死亡。3 试验动物选用健康动物，符合试验规格，且有合格证号。经生殖能力预试，受孕率应在70%以上者。雄性成年小鼠（性成熟，体重30g以上）或大鼠（性成熟，体重200g以上），预先接触受试物，再进行交配。交配用的成年雌鼠，不接触受试物。雌性鼠为雄性鼠的56倍量。每组雄鼠一般不少于15只，雄鼠与

5、雌鼠交配，使每组产生至少30只受孕雌鼠。4 剂量及分组试验至少设3个受试物剂量组。高剂量组应引起动物生育力轻度下降。各组受试物剂量可在1/10 1/3 ,050之间。急性毒性试验给予受试物最大剂量（最大使用浓度和最大灌胃容量）求不出LDo0时，则以10g/kg体重、人的可能摄入量的100倍、或受试物最大给予剂量为最高剂量，再下设2个剂量组，另设溶剂对照组和阳性对照组。阳性对照物可用环磷酷胶（40mg/kg体重）。雌性动物每组不少于30只受孕鼠。一般应同时做阳性和溶剂对照组。5 操作步骤5. 1 给予受试物5. 1. 1 给予途径：应采用灌胃法，或用喂饲法。5. 1. 2 给予受试物的方法：灌胃

6、法一般一日一次，或一日两次，连续6天或3个月。5. 2 交配给予雄鼠受试物后，按雌雄鼠2: 1比例同笼交配6天后，取出雌鼠另行饲养。雄鼠则于1天后，再以同样数量的另一批雌鼠同笼交配，如此共进行5批6批。5. 3 胚胎检查以雌雄鼠同笼日算起第15天17天，采用颈椎脱臼法处死雌鼠后，立即剖腹取出子宫，仔细检查、计数，分别记录每一雌鼠的活胎数、早期死亡胚胎数与晚期死亡胚胎数。5.4 胚胎鉴别活胎完整成形，色鲜红，有自然运动，机械刺激后有运动反应。早期死亡胚胎2胚胎形体较小，外形不完整，胎盘较小或不明显。最早期死亡胚胎会在子宫内膜上67 GB 15193.9-2003 隆起如一小瘤。如已完全被吸收，仅

7、在子宫内膜上留一隆起暗褐色点状物。晚期死亡胚胎z成形，色泽暗淡，无自然运动，机械刺激后无运动反应。6 数据处理孕鼠数受孕率（%）x 100 ( 1 ) 交配雌鼠数总着床数活胎数十早期胚胎死亡数晚期胚胎死亡数. ( 2 ) 总着床数平均着床数. ( 3 ) 受孕雌鼠数早（晚）期胚胎死亡数早晚期胚胎死亡率（%） 100 ( 4 ) 总着床数早期胚胎死亡数平均早期胚胎死亡数一一交手瓦国兹一. ( 5 ) 按试验组与对照组动物的上述指标分别用X检验、单因素方差分析或秩和检验法，进行统计分析，以评定受试物的致突变性。7 结果判定根据以上计算出的受孕率、总着床数、早期和晚期胚胎死亡率予以评价。试验组与对照组相比，受孕率或总着床数明显低于对照组s早期或晚期胚胎死亡率明显高于对照组，有明显的剂量反应关系并有统计学意义时，即可确认为阳性结果。若统计学上差异有显著性，但元剂量反应关系时，则须进行重复试验，结果能重复者可确定为阳性。68