SN T 3767.24-2014 出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法 第24部分 水稻LLrice62品系.pdf
《SN T 3767.24-2014 出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法 第24部分 水稻LLrice62品系.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《SN T 3767.24-2014 出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法 第24部分 水稻LLrice62品系.pdf(8页珍藏版)》请在麦多课文档分享上搜索。
1、出国墙3金传单U毡i SN/3767.24-2014 晶中转等温扩增(第24部分:71福A哈A可ag6 飞Loop-mediaed isoher睡alamplification deecion mehod for ge到eticallymodified components in food for expor-Part 24: Rice LLRICE62 2014-01-13发布2014斗争01实施也乏与,Y飞af噩2飞网络w、飞IWcn刘fw315cm电运4y辛呛2315飞去11乃至中华人民共和且由发布国家庭贡量监督检拴捡痊总局SN/3767.24-2014 目。吕时刑人司华公津任中限刘阶责
2、、有:部拍院宣勇切仙究比志在俨哪蜘李这和澳家叫些Z旦别疫迪UM法只险M川江防如验叫颖品队Abx、龙hu检和配局Jgh疫君pi M川仁、检裕AH川局验张止,有疫检iu发。:主才川增的口地叫文扩丰15人wp因阻。千H金山山英啕辟材叮叮山拙和就晴是入广黄介即札刽础幅古小环.,.,。的专员如影卫晰暗暗L品采脱脱品时灿圳股阳周基,1协协MM肌阳1,毛品叫咱力肌毛?万加-M品ML本Mm时A共华圳吨以mMML4四日邸rM品山川削Mm口阳MM口阳四日四川4品咱附容监脱出川包且巳ZU川川Mm川川川mmmmmmntumzt四川刑时叫封封封封米一豆豆豆豆豆稻稻稻稻稻稻稻稻麦菜菜TWW,的认立金草出用选米米米米米米汗
3、玉玉玉玉玉大大大大大水水水水K水水水小甜油町G件家单检起川喃地摊433344VA川LK八川弘八KLLKLULL川LLUU七七七LLK札ULLS照文国草境要川时时时时附附时时机部部部部部部叩的背部配部配部甜部甜甜甜甜部部M时都川付印叫川一性nu-OLqu4AFDnbioOQdnu-品。qUA吐Jb巧iOOQUAUVW123456789111111111122222222223部标注部部海部卧第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第第本本请本本珠本国磊和石SNj3767.24一-2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法第24部分:水稻LLRICE62品系1
4、范围SNjT 3767的本部分规定了稻谷和大米中转基因水稻LLRICE62品系特异性的环介导等温扩增(LAMP)初筛检测方法。本部分适用于进出口的稻谷和本方法的定性检测低限为0.5的定性检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必件。凡是不注目期的引用文件,GBjT 19495.2 GBjT 19495.3 转基因产品GBjT 19495.7 转基因产品检测A哇nu 91 。乙巧inhu 巧,anUT ,/,rJ W川法方选)检测方法第2部分:筛3 防污染措施环介导等温扩增检测过程的4 抽样与制样按照GBjT19495.7的规定执行。5 核酸提取纯化按照GBjT19495.3的规定执行
5、。6 LAMP检测方法6.1 原理6. 1. 1 一般原理根据转基因水稻iLLRICE 62品系外源基因和水稻边界序列设计特异性内引物、外引物和成环引物SN/T 3767.24-2014 各一对,特异性目标序列和引物碱基序列参见附录A。引物特异性识别目标序列上的六个独立区域,利用Bst酶启动循环链置换反应,在水稻品系LLRICE62特异目标序列启动互补链合成,在同一链t互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎环DNA混合物;从dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Mg2结合,产生副产物(焦磷酸镜)形成乳白色沉淀,加入显色液,即可通过颜色变化观察判定结果。6. 1. 2 显色蔽显色原理在L
6、AMP反应体系中加入预先混合的钙黄绿素和锚离子,未发生反应时锯离子与钙黄绿素结合,钙黄绿素的荧光被评灭,呈现橙色。当扩增反应发生时,扩增过程中产生的焦磷酸根离子可与健离子结合,形成不可逆的沉淀物,将锚离子从钙黄绿素上释放下来,从而使钙黄绿素恢复荧光,同时-体系中的镇离子与钙黄绿素结合,进一步加强钙黄绿素的荧光,可在365口m紫外光激发下散发出约510日m的荧光,颜色也由橙色转为绿色。6.2 仪器和设备6.2.1 超纯水发生器。6.2.2 水浴锅或加热模板:63.0 oC士0.5oC和80.0oC士0.5oC。6.2.3 离心管:0.1mL、1.5mL。6.2.4 移液器:量程0.5fJ.L10
7、L;量程10L100L;量程100fJ.Ll 000Lo 6.2.5 计时器。6.3 试剂和材料除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生化试剂。6.3.1 实验用水:应符合GB/T6682中一级水的规格。6.3.2 dNTPs i容液:每种核背酸浓度10mmol/L。6.3.3 BstDNA聚合酶:酶浓度8U/fJ.L,建议采用NEB的Bst酶,或者具有同等效力的酶。6.3.4 10 ThermolPol缓冲液:含200mmol/L Tris-HCl (pH 值为8.8)、100mmol/L硫酸债、100 mmol/L氧化饵、20mmol/L硫酸镜、1%Triton X-100。6.3.5 硫酸镇
- 1.请仔细阅读文档,确保文档完整性,对于不预览、不比对内容而直接下载带来的问题本站不予受理。
- 2.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
- 3、该文档所得收入(下载+内容+预览)归上传者、原创作者;如果您是本文档原作者,请点此认领!既往收益都归您。
下载文档到电脑,查找使用更方便
5000 积分 0人已下载
下载 | 加入VIP,交流精品资源 |
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- SN 3767.24 2014 出口 食品 中转 基因 成分 环介导 等温 扩增 LAMP 检测 方法 24 部分 水稻 LLrice62 品系
![提示](http://www.mydoc123.com/images/bang_tan.gif)
链接地址:http://www.mydoc123.com/p-238974.html