GB T 17999.4-2008 SPF鸡.微生物学监测.第4部分 SPF鸡.血清平板凝集试验.pdf

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1、ICS 11220B 41 蝠园中华人民共和国国家标准GBT 1 799942008代替GBT 179993 1999SPF鸡 微生物学监测第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 4：Serum plate agglutination test for SPF chicken2008-12-31发布 2009050 1实施丰瞀霰鬻瓣警矬瞥霎发布中国国家标准化管理委员会仅19前 言GBT 1799942008GBT 17999SPF鸡微生物学监测分为10个部分：第1部分：SPF鸡微生物学监测总则；第2部分：S

2、PF鸡红细胞凝集抑制试验；第3部分：SPF鸡血清中和试验；第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验；一一第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验；第6部分：SPF鸡酶联免疫吸附试验；一一第7部分：SPF鸡胚敏感试验；第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验；第9部分：SPF鸡试管凝集试验；第10部分：SPF鸡间接免疫荧光试验。本部分为GBT 17999的第4部分。本部分修订参照了NYT 553 2002(禽支原体病诊断技术和NYT 5362002(鸡伤寒和鸡白痢诊断技术中的有关规定。本部分代替GBT 179993 1999SPF鸡血清平板凝集试验。本部分与GBT 179993 1999相比主要变化如下：一一增加了

3、生理盐水作为阴性对照。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国动物防疫标准化技术委员会(SACTC 181)归口。本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司。本部分主要起草人：曲连东、姜骞、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、孟庆文。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GBT 1799931999。1范围SPF鸡微生物学监测第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验GBT 1799942008GBT 17999的本部分规定了鸡血清平板凝集试验的技术要求。本部分适用于对SPF鸡进行以下病原微生物的血清抗体检测：鸡

4、白痢沙门氏菌(Salmonellapullorum)、鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum)、滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae)、副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragauinarum)。2原理血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与下，经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象，常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体。3试剂和材料31试剂311凝集抗原。312阴性血清、阳性血清。313被检血清。32材料玻璃板，移液器(TD 10 pL200 pL)及吸头。4操作程序41使用前10 min20 rain自冰箱取出抗

5、原、阴性标准血清、阳性标准血清及被检血清，使其达到室温。42用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴(o025 mLo05 mL)，垂直滴于玻璃板上，然后迅速在抗原旁边滴加同量的被检血清一滴(o025 mLo05 mL)。43用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1 cm2 cm的片状，不断摇动玻璃板，2 rain内观察结果。44试验应在2025条件下进行。45每批试验应设阳性血清、阴性血清及生理盐水对照。5结果判定在2 rain内出现50(+)以上凝集者为阳性。2 rain内不凝集(一)者为阴性，介于上述两者之间为可疑，进行复核试验，如仍为可疑，判为阳性。凝集判读标准见表1。GBT 1799942008表1 血清平板凝集试验结果类别 平板所见 结 果 判 定1 出现大的凝集块，底质清亮，即100凝集 +2 出现明显凝集块，底质稍有浑浊，即75凝集 + 阳性3 出现可见的凝集颗粒，底质混浊，即50凝集 +4 出现轻微可见的凝集颗粒，底质极混浊，即25凝集 土 可疑5 底质均匀一致极浑浊，无凝集现象，即不凝集 阴性2