GB T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法.pdf
《GB T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《GB T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法.pdf(16页珍藏版)》请在麦多课文档分享上搜索。
1、ICS 65.020.01 B 16 望中华人民共和国国家标准GB/T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法Detection and identification of Clados porium cucumerinum EII. et Arthur 2013-07-19发布2013-12-06实施kf飞中华人民共和国国家质量监督检验检捷总局串舍lf伍中国国家标准化管理委员会GB/T 29584-2013 前本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位z中华人民共和国内蒙古出人境检验检疫局、中
2、华人民共和国厦门出人境检验检疫局、中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。本标准主要起草人z杨永生、罗志挥、吕国忠、陈青、敖威华、郭铁筝、尹凤民、张永宏、朱子平、白桦、李刚。I GB/T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法1 范围本标准规定了黄瓜黑星病菌Cladosoriumcucumerinum Ell. et Arthur以植株症状、病原菌形态特征为依据的检疫鉴定方法。本标准适用于黄瓜及其他葫芦科植物的种子、秧苗上黄瓜黑星病菌的检疫和鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注目期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本包括
3、所有的修改单)适用于本文件。SN/T 1157 进出境植物苗木检疫规程SN/T 1809 进出境植物种子检疫规程3 黄瓜黑星病菌基本信息中文名称=黄瓜黑星病菌。学名:Cladosporiumcucumerinum Ell. et Arthur 1889. 异名:Scolecotrichum melohthorum Prill. &. Delacr 1891, Macnosporium melophthorum Postrup 1893; Cladosorium cucumeris Frank 1893; Cladosporium.scabies Cooke 1903。病害英文名:cucumbe
4、rscab. 属于真菌界Fungi,有丝分裂抱子真菌Mitosporicfungi.该病菌的有性型为子囊菌门球腔菌科Mycosphaerellaceae、球腔菌属MycosphaerellaJohanson.在传统分类上,该菌属于半知菌亚门Deuteromycotina、丝抱纲Hyphomycetes、丝抱目Hyphomycetales、暗色抱科Dematiaceae、枝抱属Clados-porium. 黄瓜黑星病菌的其他信息参见附录A.4 方法原理通过现场检查植株症状、实验室检验,利用病原菌在寄主植株上的症状、病原菌的形态学特征、致病性测定等依据进行鉴定。5 仪器及用具5. 1 体视解剖镜。
5、5.2 生物显微镜。5.3 高压灭菌锅。1 GB/T 29584-2013 5.4 生物培养箱。5.5 超净工作台。5.6 pH计。5. 7 电子天平。5.8 冰箱。5.9 培养皿、慑子、解剖刀、载玻片、盖玻片、酒精灯。6 试剂和培养基6. 1 次氯酸铀。6.2 葡萄糖。6.3 琼脂,6.4 酒精。6.5 PDA培养基z马铃薯200g,葡萄糖.20g,琼脂17g-20gQ马铃薯切块煮沸10min,纱布过滤,加人葡萄糖、琼脂,pH值至i-8,加水定容至1000 mL. 121 c高压灭菌20min.分装各用。7 现场检测7. 1 现场植株症状检查按照SN/T1157规定执行。现场检查中根据黄瓜黑
6、星病在秧苗、瓜条下的症状,将具有典型症状及疑似症状的叶片、茎蔓、果实用塑料袋装好,加贴标识后送实验室进行病原菌分离和鉴定,7.2 种子抽样按照SN/T1809规定执行。8 实验室检测8. 1 植株病组织检测从现场检疫中采集的感病植物组织上挑取灰黑绿色霉层或用刀片于叶背病斑处刮取病菌子实体,移于载玻片中央的水滴中,盖上盖玻片,进行显微镜栓观察。8.2 种子栓测8.2.1 PDA培养基培养法取试验样品种子400粒,经3%-5%次氯酸铀消毒5min - 15 min.将以上处理的种子按每皿10粒-15粒摆放于PDA平板上,置于20c - 22 c恒温箱中培养7d-ll d,待长出菌落后,挑选典型菌株
7、,接种在PDA培养基上进行纯化培养,待形成子实体后进行显微镜检观察。8.2.2 致病性测定选用黄瓜感病品种(如津杂2号)在温室培养至长出两片真叶的幼苗,将待测菌株制备成抱子悬浮2 、电A GB/T 29584-2013 液(浓度为2X106个抱子/mL),采用喷雾接种法接种黄瓜幼苗,罩上塑料袋保湿过夜,在20.C22 c 条件下孵育7d14 d,进行症状检查,并对病原菌进行显微镜检观察。9 鉴定特征9. 1 植株症状特征9. 1. 1 叶片症状叶片受害初期为近圆形褪绿色小斑点,后扩展成直径2mm3 mm黄白色圆形病斑,后期病斑易呈星状开裂穿孔,孔洞边缘锯齿状,周围叶组织扭皱z病斑具黄白色晕圈,
8、后期不明显。叶脉上病斑一般为长纺锤形,后形成木栓化组织龟裂。9. 1. 2 茎、叶柄、果柄、卷须症状茎、叶柄、果柄处初呈水浸状暗绿色梭形病斑,大小不等,最长可达4cm左右,泼黄褐色,中间开裂下陷、龟裂,少数病斑开裂深度可达2mm3 mm。发病初期,病斑处有透明分泌物,后变为琼瑶色肢状物,胶状物脱落后,病斑龟裂成疮躏状。空气湿度大时,病斑长出灰黑绿色霉层。卷须顶端及中间易被侵染,病斑长梭形,受害部分变为褐色或黑揭色,呈成段萎焉,直至整个卷须干枯,失去功能。9. 1. 3 果实症状瓜条被害病斑龟裂成疮蹦状,果实畸形,病斑凹陷一般深2mm3 mm,最深可达5mm,病瓜一般不腐烂。病斑处溢出半透明胶状
9、物,后变为就瑞色。空气湿度大时,病斑上长出灰黑绿色霉层。参见附录B中的图B.。9.2 病原菌特征9.2. 1 培养性状PDA培养基上菌落为圆形、平展、绒状、灰黑绿色。菌丝白色至灰色,具分隔,具分枝。菌丝白色至灰色、有时卷曲。菌落背面为绿黑色。9.2.2 形态特征分生殖子梗细长,单生或丛生,淡褐色至褐色,基部常膨大,顶部或近顶部有少量分枝,大小平均为(76m380m) X (3.2m5m)。分生抱子芽殖,串生,形成分枝的长链,谈褐色至褐色,椭圆形或拧攘形,多数单胞、少数具一隔,分隔处略锺缩。光滑或具微刺,大小差异很大,单胞抱子大小平均为(3.8m23. 5m)X(2.5m6m);双胞抱子大小平均
- 1.请仔细阅读文档,确保文档完整性,对于不预览、不比对内容而直接下载带来的问题本站不予受理。
- 2.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
- 3、该文档所得收入(下载+内容+预览)归上传者、原创作者;如果您是本文档原作者,请点此认领!既往收益都归您。
下载文档到电脑,查找使用更方便
5000 积分 0人已下载
下载 | 加入VIP,交流精品资源 |
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- GB 29584 2013 黄瓜 病菌 检疫 鉴定 方法
