GB T 5513-2008 粮油检验.粮食中还原糖和非还原糖测定.pdf
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1、ICS 67.040 X 04 中华人民共和国国家标准粮油检验GB/T 5513-2008 代替GB/T5513-1985 粮食中还原糖和非还原糖测定Inspection of grain and oils一Determination of reduced sugar and non-reduced sugar in grain 2008-11-04发布2009-01-20实施中华人民共和国国家质量监督检验检菠总局借东中国国家标准化管理委员会认叩目。吕本标准代替GB/T5513-1985(粮食、油料检验还原糖和非还原糖测定法。本标准与GB/T5513-1985相比主要变化如下:一一增加了范围;
2、一一增加了规范性引用文件;一一增加了术语和定义;一一增加了原理;一一一改变了原标准的顺序;一一将原标准中的单位当量浓度改为我国法定计量单位摩尔每升。本标准的附录A是资料性附录。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位z南京财经大学。本标准主要起草人:王素雅、杨慧萍、袁建。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:一一一GB/T5513-19850 GB/T 5513-2008 I GB/T 5513-2008 粮油检验粮食中还原糖和非还原糖测定1 范围本标准规定了还原糖和非还原糖测定的术语和定义以及两种测定方法的原理、试剂、仪器和用具、操作步骤、结果计算及重复性
3、。本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。其中铁氧化饵法主要适用于小麦粉的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682一2008,IS03696:1987 ,MOD) 3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 还原糖reducing s
4、ugar 分子结构中含有游离半缩醒瓷基或半缩酣起基的糖。3.2 非还原糖non-reducing sugar 分子结构中不含游离半缩醒瓷基或半缩翻起基的糖。第一法铁氨化饵法4 原理还原糖在碱性溶液中将铁氧化饵还原为亚铁氧化饵,本身被氧化为相应的糖酸。过量的铁氧化饵在乙酸的存在下,与腆化饵作用析出殃,析出的腆以硫代硫酸纳标准溶液滴定。通过计算氧化还原糖时所用去的铁氧化御的量,查经验表得试样中还原糖的百分含量。5 试剂除非另有说明,本标准仅使用确认为分析纯的试剂。5. 1 水:符合GB/T6682中三级水要求。5.2 95%乙醇。5.3 乙酸缓冲液z将3.0mL冰乙酸、6.8g元水乙酸纳和4.5m
5、L密度为1.84 g/mL的浓硫酸混合溶解,然后稀释至1000 mL。5.4 12.0%鸽酸纳溶液:将12.0g鸽酸销(NazW04 2Hz 0)溶于100mL水中。1 GB/T 5513-2008 5.5 o. 1 mol/L碱性铁氧化饵溶液:将32.9 g纯净干燥的铁氧化饵凡Fe(CN)6与44.0g碳酸锅(Na2C03)溶于1000 mL水中。5.6 乙酸盐溶液:将70g纯氯化饵(KCl)和40g硫酸钵(ZnS04 7H20)溶于750mL水中,然后缓慢加入200mL冰乙酸,再用水稀释至1000 mL,混匀。5.7 10%殃化饵溶液:称取10g纯腆化饵溶于100mL水中,再加一滴饱和氢氧
6、化铀溶液。5.8 1%淀粉溶液z称取1g可溶性淀粉,用少量水润湿调和后,缓慢倒入100mL沸水中,继续煮沸直至溶液透明。5.9 o. 1 mol/L硫代硫酸纳溶液:按GB/T601配制与标定。6 仪器和用具6. 1 分析天平:分度值0.0001 g。6.2 振荡器。6.3 磨口具塞锥形瓶:100 mLo 6.4 量筒:50mL、25mL。6.5 移液管:5mL。6.6 玻璃漏斗。6. 7 试管z直径1.8 cm2. 0 cm,高约18cm。6.8 铝锅:作沸水浴用。6.9 电炉:2000 W。6. 10 锥形瓶:100mL。6. 11 微量滴定管:5mL或10mL。7 操作步骤7. 1 样品液
7、制备精确称取试祥5.675 g于100mL磨口锥形瓶(6.3)中。倾斜锥形瓶以便所有试样粉末集中于一侧,用5mL乙醇(5.2)浸湿全部试样,再加入50mL乙酸缓冲液(5.3) ,振荡摇匀后立即加人2mL鸽酸纳溶液(5.4) ,在振荡器(6.2)上混合振摇5min。将混合液过滤,弃去最初几滴滤液,收集滤液于干净锥形瓶(6.10)中,此滤液即为样品测定液。另取一锥形瓶(6.10)不加试样,同上操作,滤液即为空白液。7.2 还原糖的测定7.2.1 氧化z用移液管(6.5)精确吸取样品液5mL于试管(6.7)中,再精确加入5mL碱性铁氧化梆溶液(5.5),混合后立即将试管浸入剧烈沸腾的水浴中(6.8)
8、,并确保试管内液面低于沸水液面下3cm 4 cm,加热20min后取出,立即用冷水迅速冷却。7.2.2 滴定:将试管内容物倾人100mL锥形瓶(6.10)中,用25mL乙酸盐溶液(5.6)荡洗试管一并倾入锥形瓶中,加5mL 10%映化饵溶液(5.7),混匀后,立即用0.1mol/L硫代硫酸锅溶液(5.9)滴定至淡黄色,再加1mL淀粉溶液(5.8),继续滴定直至溶液蓝色消失,记下用去硫代硫酸锅溶液体积(V1)。7.2.3 空白试验:吸取空白液5mL,代替样品液按7.2. 1和7.2.2操作,记下消耗的硫代硫酸销溶液(5.9)体积(Vo)。7.3 非还原糖的测定分别吸取样品液(7.1)及空白液各5
9、mL于试管中,先在剧烈沸腾的水浴中加热15min(样品液中非还原糖转化为还原糖),取出迅速冷却后,加入碱性铁氧化饵溶液(5.5)5mL,混匀后,再放入沸腾水浴中继续加热20min,取出迅速冷却后,立即按7.2.2方法进行滴定,分别记下滴定样品液及空白液消耗硫代硫酸纳(5.9)的体积(V1,Vo )。G/T 5513-2008 8 结果计算8. 1 还原糖含量的计算根据氧化样品液中还原糖所需0.1mol/L铁氧化御溶液的体积查表A.1,即可查得试样中还原糖(以麦芽糖计算)的质量分数。铁氧化饵溶液体积(V3)按式(1)计算:式中zV写一(Vo- V 1 ) x c - O. 1 V3一一氧化样品液
10、中还原糖所需0.1mol/L铁氟化饵溶液的体积,单位为毫升(mL); V o -滴定空白液消耗0.1mol/L硫代硫酸纳溶液的体积,单位为毫升(mL);V1一滴定样品液消耗0.1mol/L硫代硫酸纳溶液的体积,单位为毫升(mL);C一一硫代硫酸纳溶液实际浓度,单位为摩尔每升(mol/L)。计算结果保留小数点后两位。0.1 mol/L铁氧化御体积与还原糖含量对照可查表A.1o注:还原糖含量以麦芽糖计算。8.2 非还原糖含量的计算. ( 1 ) 非还原糖含量根据氧化样品液中总还原糖所需的0.1mol/L铁氧化饵溶液的体积(V4),减去氧化样品液中还原糖所需的铁氧化饵溶液体积(V3),最后再根据民一
11、只的结果查表A.2,即可查得试样中非还原糖(以煎糖计的质量分数。铁氧化饵溶液的体积(V4)按式(2)计算:式中zV.t一(Vo- V/) x c 一噜O.1 V4一氧化样品液中总还原糖所需0.1mol/L铁氧化饵溶液体积,单位为毫升(mL);Vo滴定空白液消耗硫代硫酸纳溶液体积,单位为毫升(mL);V1 滴定样品液消耗硫代硫酸纳溶液体积,单位为毫升(mL);c 硫代硫酸纳溶液实际浓度,单位为摩尔每升(mol/L)。计算结果保留小数点后两位。0.1 mol/L铁氧化御体积与非还原糖含量对照可查表A.2。注:非还原糖含量以煎糖计算。9 重复性( 2 ) 同一实验室,由同一操作者使用相同设备,按照相
12、同的测试方法,并在短时间内,对同一被试对象,相互独立进行测试获得的两次独立测试结果差的绝对值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。如果两次测定结果符合要求,则取结果的平均值。第二法费林试剂法10 原理还原糖将费林试剂中的铜盐还原为氧化亚铜,加人过量的酸性硫酸铁溶液后,氧化亚铜被氧化为铜盐而溶解,而硫酸铁被还原为硫酸亚铁。高锺酸饵标准溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐。根据高锺酸饵标准溶液消耗量,计算氧化亚铜含量,再查表得到还原糖的量。11 试剂和材料11. 1 费林试剂甲液:取硫酸铜(CUS04 5H20)34. 639 g,加适量水溶解,加硫酸0.5mL,再加水至GB/T 5513-2008 5
13、00 mL,用精制石棉过滤。11.2 费林试剂乙液:取酒石酸饵纳173g与氢氧化纳50g,加适量水溶解,稀释至500mL,用精制石棉过滤,贮存于具橡皮塞的玻璃瓶内。11. 3 3 mol/L盐酸z取浓盐酸25mL,加水至100mL。11. 4 精制石棉:先用3mol/L盐酸(11.3)将石棉浸泡2d-3 d后,用水洗净。再加10%氢氧化纳溶液浸泡2d3 d,倾去溶液,用热费林试剂乙液浸泡数小时,用水洗净。再用3mol/L盐酸浸泡数小时,用水洗至不呈酸性,使之成为微细的软纤维,用水浸泡贮存于玻璃瓶内,作填充古氏增塌用。11. 5 o. 1 mol/L高锺酸锦标准溶液:按GB/T601进行配制和标
14、定。11. 6 1. 0 mol/L氢氧化纳溶液:取氢氧化锅4.0g,加水溶解至100mL。11. 7 硫酸铁溶液:取硫酸铁50g,加水200mL溶解,然后慢慢加入浓硫酸100mL,冷却后加水至1 000 mL。11.8 6 mol/L盐酸:取浓盐酸100mL,加水至200mL。11. 9 甲基红指示液:0.1%甲基红乙醇溶液。11. 10 20%氢氧化纳溶液:取氢氧化铀4.0g,加水溶解至100mL。12 仪器和用具12. 1 天平:分度值0.01g。12.2 粉碎磨。12.3 古氏士甘捐:25mL。12.4 抽滤瓶:500mL。12.5 真空泵或水泵。12.6 烧杯:400mL。12. 7
15、 移液管:50mLo 12.8 滴定管。12.9 容量瓶:250mL、1000 mL。13 操作方法13. 1 试样制备取混合均匀的试样,用粉碎磨(12.2)粉碎,使90%通过孔径。.27mm(60目)筛,合并筛上、筛下物,充分混合,保存备用。13.2 试样处理称量试样(13.1) 10 g-20 g,精确至0.01g,置于250mL容量瓶(12.9)中,加水200mL,在45oc 水浴中加热1h,并不断振荡,待冷却后加水定容。静置后,吸取澄清液200mL置于另一250mL容量瓶中,加费林试剂甲液(11.1) 10 mL和1mol/L氢氧化纳溶液(11.6) 4 mL,摇匀后定容,然后静置30
16、 min。用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,其余滤液供测定还原糖和非还原糖用。13.3 还原糖测定移取试样溶液50mL于400mL烧杯02.6)中,加入费林试剂甲、乙液(11.1、11.2)各25mL,加盖表面皿,置电炉上加热,并在4min内沸腾,再煮沸2min,趁热用铺有石棉的古氏站塌02.3) (或垂融增塌)抽滤(12.4,12.5),并用600C热水洗涤烧杯和沉淀,至洗液不呈碱性为止。向古氏士甘塌中加人硫酸铁溶液01.7)和水各25mL,用玻璃棒搅拌,使氧化亚铜完全溶解,用前面使用过的烧杯(12.的收集溶液,以0.1mol/L高锺酸饵标准溶液(11.5)滴定至微红色。同时取水50mL,加费林试
17、剂甲、乙液01.1、11.2)各25mL,做试剂空白试验。G/T 5513-2008 13.4 非还原糖测定吸取已制备的样品液(13.2) 50 mL,转移至1000 mL容量瓶(12.9)中,加6mol/L盐酸(11.8) 5 mL,在68oC-70 oC水浴中加热15min,冷却后加甲基红指示液(11.9)2滴,用20%氢氧化纳溶液(11. 10)中和,加水至刻度,混匀,然后按13.3测定样品液中总还原糖。14 结果计算14. 1 还原糖的计算相当于试样中还原糖质量的氧化亚铜质量按式(3)计算:x = (V - Vo) x c X 71. 54 ( 3 ) 式中zX一一相当于试样中还原糖质
18、量的氧化亚铜的质量,单位为毫克(mg); V一一试样消耗高锺酸饵标准溶液的体积,单位为毫升(mL);V o -试样空白消耗高锺酸锦标准溶液的体积,单位为毫升(mL);C一一高锺酸饵标准溶液的摩尔浓度,单位为摩尔每升(mol/L); 71. 54一一-1mol/L高锺酸锦标准溶液1mL相当于氧化亚铜的毫克数。由所得的氧化亚铜质量,按表A.3查出相当的还原糖(以葡萄糖计)的质量。还原糖干基含量(Y)以质量分数(%)表示,按式(4)计算:lw x-mw m叫一Y . ( 4 ) 式中zml一一由表A.3中查得的还原糖(以葡萄糖计)的质量,单位为毫克(mg); m一一试样质量,单位为克(g); W 试
19、样水分含量,%;计算结果保留小数点后两位。注1:煮沸时间应控制在4min内。可先取水50mL.加碱性酒石酸铜甲、乙液各25mL.调节好适当的火力后,再测样品液。注2:煮沸后的溶液如不呈蓝色,表示糖量过高,可减少试样量,重新测定。14.2 非还原糖的计算非还原糖干基含量(Z,以藤糖计)以质量分数(%)表示,按式(5)计算:z = 6 25_0_X ._ X : -mXVX Cl OO-W) ( 5 ) 式中20.95一一还原糖(以葡萄糖计换算为庶糖的因数;m2一一转化后测得的还原糖(以葡萄糖计)质量,单位为毫克(mg); m一一原测定还原糖时试样质量,单位为克(g); V一一转化后用于测定还原糖
20、的样品液的体积,单位为毫升(mL); W一一试样水分含量,%。计算结果保留小数点后两位。15 重复性同一实验室,由同一操作者使用相同设备,按照相同的测试方法,并在短时间内,对同一被试对象,相互独立进行测试获得的两次独立测试结果差的绝对值不大于这两个测定值的算术平均值的5%,如果两次测定结果符合要求,则取结果的平均值。5 GB/T 5513-2008 附录A(资料性附录)含量对照表表A.1 O. 1 mol/L铁氟化饵与还原糖含量对照表0.1 mol/L 还原糖/0.1 mol/L 还原糖/0.1 mol/L 还原糖/K3Fe(CN)sl % K3Fe(CN)sl % K3Fe(CN)s! %
21、mL mL mL 0.10 0.05 2.30 1. 16 4.50 2.37 0.20 0.10 2.40 1. 21 4.60 2.44 0.30 0.15 2.50 1. 26 4. 70 2.51 0.40 0.20 2.60 1. 30 4.80 2.57 0.50 0.25 2. 70 1. 35 4.90 2.64 0.60 0.31 2.80 1. 40 5.00 2. 70 O. 70 0.36 2.90 1. 45 5.10 2. 76 0.80 0.41 3.00 1. 51 5.20 2.82 0.90 0.46 3. 10 1. 56 5.30 2.88 1. 00
22、0.51 3.20 1. 61 5.40 2.95 1. 10 0.56 3.30 1. 66 5.50 3.02 1. 20 0.60 3.40 1. 71 5.60 3.08 1. 30 0.65 3.50 1. 76 5. 70 3. 15 1. 40 0.71 3.60 1. 82 5.80 3.22 1. 50 O. 76 3. 70 1. 88 5.90 3.28 1. 60 0.80 3.80 1. 95 6.00 3.34 1. 70 0.85 3.90 2.01 6.10 3.41 1. 80 0.90 4.00 2.07 6.20 3.47 1. 90 0.96 4. 10
23、 2.13 6.30 3.53 2.00 1. 01 4.20 2. 18 6.40 3.60 2. 10 1. 06 4.30 2.25 6.50 3.67 2.20 1. 11 4.40 2.31 6.60 3. 73 注:还原糖含量以麦芽糖计算。6 0.1 mol/L 还原糖/K3Fe(CN)sl % mL 6. 70 3. 79 6.80 3.85 6.90 3.92 7.00 3.98 7.10 4.06 7.20 4.12 7.30 4. 18 7.40 4.25 7.50 4.31 7.60 4.38 7.70 4.45 7.80 4.51 7.90 4.58 8.00 4.65
24、 8.10 4. 72 8.20 4. 78 8.30 4.85 8.40 4.92 8.50 4.99 8.60 5.05 8. 70 5.12 8.80 5.19 GB/T 5513-2008 表A.20.1 mol/L铁氧化饵与非还原糖含量对照表0.1 mol/L 非还原糖/0.1 mol/L 0.1 mol/L 0.1 mol/L K3FeCCN)61 K3 Fe CCN)sl 非还原糖/K3 FeCCN)sl 非还原糖/K3 Fe CCN)sl % % % mL mL mL mL o. 10 0.05 2.30 1. 09 4.50 2. 14 6. 70 3.18 0.20 0.1
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