GB T 5009.209-2008 谷物中玉米赤霉烯酮的测定.pdf

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1、ICS 67040C 53 圆亘中华人民共和国国家标准GBT 5009209-2008谷物中玉米赤霉烯酮的测定2008-1 1-21发布Determination of zearaIenone in cereals2009-03-0 1实施宰篓发布中国国家标准化管理委员会仪”。前 言GBT 5009209-2008本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。本标准由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中国疾病预防控制中心营养与食品安全所负责起草，北京中检维康技术有限公司参加起草。本标准主要起草人：隋凯、李凤琴、李军、罗雪云、李莉、孙兴权。1 范围谷物中玉米赤霉

2、烯酮的测定本标准规定了符物中玉米赤霉烯酮的测定方法。本标准适用于谷物(玉米、小麦等)中玉米赤霉烯酮的测定本标准打法检出限为5 pg，kg。2原理GBT 5009 209-2008试样巾的玉米赤霉烯酮片J乙腈水提取后，提取液经免疫亲和柱净化、浓缩后，用配有荧光检测器的液相色谱仪进行测定外标法定量。3试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相当纯度的去离子水。31 甲醇(1H。()H)：H11I，(1级。32 乙腈(CH，CN)：HPI。c级。33乙腈水(9一1)：取90 mI。乙腈加10 ml。水。3 4氯化钠(NaCI)。3 5玉米赤霉烯酮免疫亲和柱。36玻璃纤维滤纸。37玉米

3、赤霉烯酬(zearalenone)标准品：纯度98。38玉米赤霉烯酮标准溶液：准确称取适量的=叵米赤霉烯酮标准品，用乙腈配成浓度为01 mgmI。的标准储备液，20冰箱中避光保存。使用前用流动相稀释成适当浓度的标准工作液。4仪器和设备4 1 液相色谱仪配有荧光检测器。42粉碎机。43高速均质器。4，4氯吹仪。45空气压力泵。46玻璃注射器：20 mI。47天平：感量o000】g。5分析步骤51提取称取40 g粉碎试样(精确到001 g)置于250 mI。具塞锥形瓶中，加入4 g氯化钠和100 nat，乙腈一水(9+1)，以均质器高速搅拌提取2 min，通过折叠快速定性滤纸过滤，移取100 ml

4、，滤液并加入400 mI。水稀释混匀，经玻璃纤维滤纸过滤1次2次，至滤液澄清后进行免疫亲和柱净化操作。1GBT 5009209-200852净化将免疫亲和柱连接于20 mI，玻璃注射器下。准确移取1 00 n1I(相当于o8 g样品1)51的提取滤液，注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以1滴st 2滴s的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至有部分空气通过柱体。以5 mI。水淋洗柱子1次，弃去全部流出液，并使部分空气通过柱体。准确加入1j ml。叶醇(31)洗脱，流速为1 mLmin，收集洗脱液于玻璃试管中，于55以下氮气吹_f=-后，用10 mI流动相j31 b)溶解残渣，

5、供液相色谱测定。53测定531液相色谱条件a) 色潜柱：(1l 8柱，1 50 n11114 6 mnl(内径)，粒度4,aria，或相当者；b)流动相：乙腈水甲醇(46_468)；()流速：0 FllIrain；d) 检测波长：激发波长274 Iqlq2，发射波长440 11131；e) 进样量：100”L；f)柱温：摩温。532色谱测定分B|J取样液和标准溶液各00 pL注入高效液相色谱仪进行测定，以保留时间定性，峰面积定量。在上述色谱条件下，玉米赤霉烯酮的保留时间约为34 rnn。玉米赤霉烯酮标准溶液色谱图见图1。图1 玉米赤霉烯酮标准品的液相色谱图54空白试验除不加试样外，均按上述步骤

6、进行。55结果计算按外标法计算试样中玉米赤霉烯酮的含量，计算结果需将空白值扣除。见式(1)、， 1 000(A A，、)(V111 000A。，n式中：x 试样中玉米赤霉烯酮的含量，单位为微克每千克(t,gkg)1)对于玉米赤霉烯酮含量较高的样品，n，将提取滤液进行适当稀释，以保证玉米赤霉烯酮的含量不超过免疫亲和柱的最大毒素负荷量。U525I2lA一一样液中玉米赤霉烯酮的峰面积；A。空白样液中玉米赤霉烯酮的峰面积；f一标准工作溶液中玉米赤霉烯酮的浓度，单位为微克每毫升(zgmI)v一一-样液最终定容体积，单位为毫升(mI。)；m最终样液所代表的试样量，单位为克(g)；A。一一标准工作溶液中玉米赤霉烯酮的峰面积。GBT 5009209-20086精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1 5。