DB43 T 2326-2022 桑黄液体菌种生产技术规程.pdf

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1、Technical regulations for liquid spawn production of Sanghuangporus桑黄液体菌种生产技术规程发 布 湖南省市场监督管理局 2022-05 发 布-0643湖南省地方标准ICSCCS 67.080B 31DB43/T2326 2022 2022-08 实 施-06DB43/T 23262022 I 目 次 前言 1 范围 1 2 规 范性 引用 文件 1 3 术 语和 定义 1 4 场 地环境 1 5 生 产工 艺 2 6 液 体菌 种质 量指 标 3 7 贮存 3 8 档 案管 理 4 附录A（资 料性）常用 摇瓶种 培养 基配

2、 方 5 附录B（资 料性）常用 液体发 酵培 养基 配方 6 附录C（资 料性）桑黄 液体菌 种生 产档 案 7 DB43/T 23262022 II DB43/T 23262022 III 前 言 本文件 按 照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标 准化 文件 的结 构和起 草规 则 的规定起草。请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任。本文件 由湖 南省 农业 农村 厅提出。本文件 由湖 南农 业标 准化 技术委 员会 归口。本文件 起草 单位：湖 南省 微生物 研究 院、湖南 湘蕈 生物科 技有 限

3、公 司。本文件 主要 起草 人：唐少 军、许 隽、喻桃 生、雷平、邵晨 霞、贺月 林、吴胜 莲、靳 磊、杨祎。DB43/T 23262022 IV DB43/T 23262022 1 桑黄液体 菌种生 产技术规 程 1 范围 本文件 规定 了桑 黄液 体菌 种生产 的术 语和 定义、生 产要求、生 产工 艺、液体 菌种质 量指 标、贮存 和档案管 理等。本文件 适用 于桑 黄液 体菌 种的生 产。2 规 范性 引用 文件 下列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用 文 件，仅该 日 期

4、 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改 单）适 用 于 本 文 件。GB 4789.28 食 品微 生物 学检验 培 养基 和试 剂的 质量要 求 GB 5749 生活 饮用 水卫 生 标准 GB/T 12728 食 用菌 术语 NY/T 528 食用 菌菌 种生 产技术 规程 NY/T 1284 食 用菌 菌种 中 杂菌及 害虫 的检 验 NY/T 1731 食 用菌 菌种 良 好作业 规范 NY/T 1935 食 用菌 栽培 基 质质量 安全 要求 3 术 语和 定义 GB/T 12728 界 定的

5、以及 下 列术语 和定 义适 用于 本文 件。3.1 桑黄 sanghuangporus 桑黄在分类上属于担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲（Agaricomycetes）、锈 革 孔 菌 目（Hymenochaetales）、锈革 孔 菌 科（Hymenochaetaceae），桑黄 菌 属（Sanghuangporus），是 一 类珍 贵 的具有重 要药 用价 值的 大型 真菌。4 场 地环 境 4.1 场地 菌种制 作场 地环 境条 件应 符合 NY/T 528 的规 定。用水符 合 GB 5749 的规 定。4.2 环境 环 境卫 生应 符合 NY/T 528 的规 定。4

6、.3 厂房 条件应 符 合NY/T 528 和NY/T 1731 的规 定。DB43/T 23262022 2 5 生 产工 艺 5.1 工艺 流程 母种 摇瓶 种 发酵 罐清 洗空 灭 投料 与定 容 灭菌 冷却 接 种 发酵 培养 检测 贮 存 5.2 母种 制备 母种制 备应 符 合NY/T 528 的要求。5.3 摇瓶 种制 备 5.3.1 培 养基 原料应 符 合NY/T 1935 的 规定，参照 附 录A 配 制。5.3.2 装 液量 采用1000 mL 的 常规 三角 瓶，每 瓶装 液量 为 200 mL 300 mL，用八 层纱 布和 牛皮纸 封口。5.3.3 灭菌 在 121

7、 126，0.14 MPa 0.16 MPa 的 压力 下，保 持 25 min。5.3.4 接种 将灭菌 后的 培养 基冷 却 至30 以下，无 菌条 件下 用 打孔法（10 mm 孔径）将菌 丝块接 种到 摇瓶 中，每 100 mL 液体 培养 基接 种 35 个 菌丝 块。5.3.5 培养 接种后 移至 摇床，在 26，130 r/min 条件 下培 养 10 d 5.4 发酵 罐清 洗 5.4.1 检查 罐上全 部阀 门、安全 阀、压力表 等要 求完 好，工作 正常。5.4.2 清洗 流水清 洗罐 体内 外，达到 无死角、内 壁无 任 何 培养 料残余 物的 洁净 程度。5.5 空灭

8、空罐灭 菌，应在 压 力 0.14 Mpa 0.16 Mpa、温 度 121 126 下 持续 灭 菌40 min。5.6 培养 基配 制 材料应 符 合NY/T 1935 的 规定，参照 附 录A 规 定配 制。5.7 装液 量 发酵罐 总体 积 的60 70。DB43/T 23262022 3 5.8 灭菌 用夹层 预热 培养 基 至 80 后，蒸汽 进罐 升温 至 121 126，0.14 MPa 0.16 MPa 保 压恒 温40 60 min。5.9 冷却 培养基 冷却 至26 28。5.10 接种 按常规 接种 方式 接种，接 种量 为 10（V/V）。5.11 发酵 培养 罐温为

9、26 28，罐 压为0.02 0.04 MPa，通气 量为10.5 V/V min，搅 拌速度 为130 r/min 160 r/min，培 养时 间为8 10 d。5.12 检测 发酵后 第4 d 开 始定 期检 测，检 测方 法应 符 合 NY/T 1284 的规 定。6 液 体菌 种质 量指 标 6.1 感官 指标 6.1.1 形 态与 色泽 具有“毛刺”的球 状菌 丝 体呈黄 色，菌液 呈棕 色。菌液稍 粘稠，有 大量 菌丝 球悬浮、分 布均 匀、不上浮、不下 沉、不迅 速 分 层，液 体不 浑浊。6.1.2 菌 液气 味 培养器 排气 口气 味正 常，有桑黄 菌丝 气味，无 酸、臭味

10、等。6.2 理化 指标 6.2.1 酸 碱度 pH 值 4.5 6.0。6.2.2 菌 丝量 菌丝湿 重（g/L）120。6.2.3 纯度 无杂菌 7 贮存 7.1 标签 生产的 菌种 必须 贴有 质量 合格标 签，其内 容包 含菌 种种类、级 别、品种、生 产单位、接 种日 期。DB43/T 23262022 4 7.2 贮存 条件 7.2.1 摇 瓶种 保存 4、暗光 条件 下可 保 存5 d7 d。7.2.2 种 子罐 液体 菌种 保 存 15 20 可 保 存 2 d 3 d。8 档 案管 理 生产档 案应 有电 子档 案和 纸质档 案保 存，资料 记录 完整准 确，档案 内容 见附

11、录 C。档案 记录 一式 2份保存 于生 产基 地和 技术 指导单 位，档案 保 存3 年 以上。DB43/T 23262022 5 附 录 A（资料 性）常用摇 瓶种 培养 基配 方 A.1 玉米 粉（或玉 米淀 粉）1，蔗糖 2，蛋 白胨 0.2，酵 母粉 0.3 0.5，磷酸 二氢 钾 0.1，硫酸镁 0.06。A.2 葡萄 糖3，豆 饼粉2，玉 米粉1，酵母 粉0.5，磷酸 二氢 钾0.1，碳酸 钙 0.2，硫酸镁0.05，pH 值 6.0。玉米 粉，豆 饼粉 均 过 80 目筛。DB43/T 23262022 6 附 录 B（资料 性）常用液 体发 酵培 养基 配方 B.1 黄豆 粉

12、 3，葡萄 糖 4，蛋白 胨 0.2，硫 酸铵 0.2，氯 化钠 0.25，磷 酸二 氢钾 0.1。B.2 可溶 性淀 粉3 6，白 砂糖1，磷 酸二 氢 钾 0.3，硫 酸镁0.15，酵母 膏0.1，pH 值 6。DB43/T 23262022 7 附 录 C（资料 性）桑黄液 体菌 种生 产档 案 表1 桑黄 液体 菌种 生产 档案 编号：基地名称 联系人 联系电话 地址 所属单位名称 发酵技术情况 培养基 配制 时间 发酵体积 培养基 配方 灭菌条件 记录人 接种 时间 温度 菌种名称 接种量 记录人 发酵培养管理 转速 温度 罐压 通气量 菌种质量检测 形态色泽 气味 酸碱度 菌丝亮 贮存 时间 温度 记录人 其他情况 记录人：年 月 日