DB35 T 2039-2021 蝴蝶兰杂交育种技术规程.pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 62 35 福建省地方标准 DB35/T 20392021 蝴蝶兰杂交育种技术规程 Technology standard for the crossbreeding of Phalaenopsis 2021 - 12 - 29发布 2022 - 03 - 29实施 福建省市场监督管理局 发布DB35/T 20392021 I 目次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 缩略语 . 1 5 亲本的选择 . 1 6 杂交技术 . 1 7 F1代无菌苗培育 . 2 8 子代测定 . 3 9 优良单株选择与
2、扩繁 . 3 10 档案管理 . 5 附录 A(资料性) 蝴蝶兰主要病害防治表 . 6 附录 B(资料性) 蝴蝶兰杂交育种技术档案记录表 . 8 附录 C(资料性) 子代生物学性状类别和测定内容 . 9 附录 D(资料性) 蝴蝶兰杂交育种技术档案记录表 . 10 DB35/T 20392021 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由福建省林业局提出并归口。 本文件起草单位:福建农林大学、漳州钜宝生物科技有限公司、福州市于山风景名胜公园管
3、理处、 福建省林业科技试验中心、福州旗山花卉有限公司、山东省农业科学院蔬菜花卉研究所。 本文件主要起草人:兰思仁、刘江枫、艾叶、何碧珠、邹双全、彭东辉、刘仲健、黄瑞宝、王勇、 吴沙沙、周育真、翟俊文、李明河、汪长水、吕晓惠、钱春光、朱尾银、徐建球、徐喆、陈进燎、 刘舒雅。 DB35/T 20392021 1 蝴蝶兰杂交育种技术规程 1 范围 本文件规定了蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)杂交亲本的选择、杂交技术、F1代无菌苗培育、子代 测定、优良单株选择与扩繁、档案管理。 本文件适用于人工控制下的蝴蝶兰杂交育种。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必
4、不可少的条款。 其中, 注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 8321(所有部分) 农药合理使用准则 GB/T 286832012 蝴蝶兰栽培技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 类原球茎 Protocorm-like bodies,PLB 种子萌发时,形成球状浅黄色原胚,为短缩、珠粒状的胚性细胞、类似幼茎的器官。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 MS:MS培养基(MS culture medium) NAA:萘乙酸(Naphthaleneacetic Acid) 6-B
5、A:6-苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine) 5 亲本的选择 选择花、叶等性状优良且配合力高、遗传力强、抗性强和生长势好的优良品种作为亲本。 6 杂交技术 6.1 杂交母株选择 从选定的亲本群体中选择健壮无病虫害的植株作为杂交母株。 DB35/T 20392021 2 6.2 授粉环境 选择晴朗天气进行人工授粉,授粉环境为遮光度75%、温度为25 2 、相对湿度为60%80%。 6.3 授粉过程 先将母本花粉块除去(去雄),并剪除萼片、花瓣和唇瓣后,取父本新鲜的花粉块放置于母本柱头 蕊腔内。每个母株授粉1个花葶,每个花葶授粉13朵花,剪除花葶其余花朵。所用工具均用75%酒精擦
6、拭消毒。 6.4 标记 授粉后用铅笔写好标记牌并记录父母本信息及授粉日期,系挂在授粉母株花序梗上。 6.5 授粉后管理 授粉后2 d3 d,蕊腔闭合、柱头膨大,期间控制浇水,避免将水滴浇灌到柱头上;约7 d9 d 子房开始膨大,水肥管理按照GB/T 286832012的规定执行。主要病虫害防治见附录A和附录B,农药的 使用应符合GB/T 8321(所有部分)的规定。 6.6 蒴果采收及保存 6.6.1 蒴果采收 人工授粉后蒴果表皮由绿色转为黄色且尚未裂开时采收。 6.6.2 蒴果保存 蒴果采摘后应随即播种。如需保存可用75%酒精擦拭蒴果表面,放入牛皮纸袋,置于4 冰箱内冷 藏,冷藏时间不宜超过
7、10 d。 7 F1代无菌苗培育 7.1 蒴果灭菌 将蒴果放在烧杯中,加少量洗衣粉,用流水冲洗干净后,纯水冲洗23遍,置超净工作台上用75% 酒精浸泡10 s15 s,5%次氯酸钠浸泡10 min15 min,无菌水冲洗34遍备用。 7.2 无菌播种 将消毒后蒴果取出放在无菌纸上,吸干表面水分,用解剖刀纵向切开蒴果,用镊子将种子取出并均 匀撒播到灭菌的萌发培养基上。培养基配方的主要成分为:基本培养基(花宝1号)2.0 g/L2.5 g/L、 有机添加物(蛋白胨)1.8 g/L2.5 g/L、蔗糖18.0 g/L25.0 g/L、琼脂6.0 g/L8.0 g/L、活性炭 粉1.8 g/L2.5
8、g/L,pH值为5.55.8。 7.3 种子萌发 接种后置培养架上暗培养5 d10 d,再提供光照,光照强度500 lx1 000 lx、光照时间(5 h 8 h)/d,培养温度23 2 。 DB35/T 20392021 3 7.4 分化培养 将萌发的类原球茎转接到分化培养基上进行培养,培养基配方的主要成分为:基本培养基(花宝1 号)2.2 g/L2.8 g/L、有机添加物(蛋白胨1.8 g/L2.5 g/L香蕉泥45.0 g/L55.0 g/L)、蔗糖 8.0 g/L12.0 g/L、琼脂6.0 g/L8.0 g/L、活性炭粉0.8 g/L1.5 g/L,pH值为5.35.5。培养条 件:
9、光照强度1 000 lx1 500 lx、光照时间10 h/d、培养温度25 2 。 7.5 生根培养 诱导出初代丛芽后,进行分株转接到生根培养基上。培养基配方的主要成分为:基本培养基(花宝 1号)2.8 g/L3.5 g/L、有机添加物(蛋白胨2.8 g/L3.5 g/L香蕉泥90.0 g/L110.0 g/L柠檬 酸28.0 g/L35.0 g/L)、蔗糖12.0 g/L18.0 g/L、琼脂6.0 g/L8.0 g/L、活性炭粉0.8 g/L1.5 g/L,pH值为5.15.3。光照强度1 500 lx2 000 lx、光照时间12 h/d、培养温度25 2 。 7.6 炼苗 生根苗的根
10、数达到13条、长1 cm3 cm时,连同培养瓶一起从培养室转移到炼苗棚,用遮光度为 60%70%遮阳网覆盖,闭口炼苗20 d30 d,炼苗温度为20 25 。 7.7 移栽定植 出瓶定植前3 d5 d打开培养瓶盖,移栽时取出生根苗,用清水冲洗干净根部残留培养基,再用多 菌灵1 5002 000倍液浸泡3 min5 min后,置阴凉处晾干至根系发白,采用细碎松树皮:珍珠岩=2:1 体积混合作为基质移栽定植。移栽后前7 d注意遮光,空气湿度保持在70%80%,遮光率50%,光照强度 3 000 lx5 000 lx,环境温度控制在白天25 28 ,晚上23 26 。 7.8 田间管理 从小苗到植株
11、开花过程的田间管理按照GB/T 286832012中第4章的规定执行。主要病虫害防治见 附录A和附录B,农药的使用应符合GB/T 8321(所有部分)的规定。 8 子代测定 对子代生物学性状进行测定及描述,测定与描述指标见附录C。 根据育种目标选择生物学性状优良的单株,如植株长势旺盛、根系健壮;叶片椭圆形、肥厚挺立; 花芽分化整齐,开花时间一致;花梗高度适中,花朵排列整齐,花朵数多,花瓣质地较厚,观赏期长, 花色艳丽的单株。此外,有较强抗病性,适应性强等也可以作为优良单株选择的标准。 9 优良单株选择与扩繁 9.1 优良单株选择 选择长势旺盛、根系健壮、花葶高度适中、花朵排列整齐、花型圆整、花
12、朵数多,花期长等性状优 良的单株作为扩繁母株。 DB35/T 20392021 4 9.2 优良单株扩繁 9.2.1 外植体选取 选取生长健壮、无病虫害的扩繁母株的花梗作为外植体。 9.2.2 外植体消毒 将带节花梗剪成2 cm3 cm长茎段放在烧杯中,加少量洗衣粉,用流水冲洗干净,纯净水冲洗23 遍后将材料置超净工作台内用75%酒精浸泡30 s40 s,用5%次氯酸钠浸泡消毒10 min15 min,无菌 水冲洗35遍备用。 9.2.3 丛生芽诱导 在超净工作台上将消毒处理后的外植体置于培养皿上,切掉与次氯酸钠接触过的切口,将外植体接 种到培养基中进行丛生芽诱导培养。 培养基配方的主要成分为
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