GA T 1915-2021 法庭科学 生物检材中硫化氢检验 气相色谱和气相色谱-质谱法.pdf

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1、 HHP ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T 法庭科学 生物检材 中硫化氢 检验 气相色谱 和气相色 谱- 质 谱法 Forensic sciences Examination methods for hydrogen sulfide in biological samples GC and GC-MS - 发布 - - 实施 中华人民 共和国 公安部 发 布 GA/T I 前 言 本文件 按 照 GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分： 标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定 起

2、草。 请 注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由全 国刑 事技 术标 准化技 术委 员会 毒物 分析 分技术 委员 会 （SAC/TC 179/SC 1 ） 提 出并 归口 。 本文件 起草单 位： 广东省 公安厅 刑事技 术中 心、公 安部物 证鉴定 中心 、广州 市公安 局刑事 技术 所 、 北京市 公安 局刑 侦总 队 。 本文件 主要起 草人 ： 裴茂 清、张 亮、施 文兵 、胡浩 浪、王 宾、徐 若沦 、董林 沛、王 松才、 辛国 斌 、 乔静。 GA/T 1 法庭科学 生 物检 材中硫化 氢检验 气相色谱

3、 和气相 色谱- 质谱法 1 范围 本 文件 规定 了法 庭科 学生 物检材 血液 中硫 化氢 的气 相色谱 、气 相色 谱- 质 谱定 性定量 检验 方法 。 本文件 适用 于 法 庭科 学生 物检材 血液 中 硫 化氢 的定 性 检验 ， 以 及新 鲜血 液检 材 中硫化 氢的 定量 检验 。 其他检材 可 参照 使用 。 2 规范 性引 用文 件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修

4、 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 6682 分析 实验室 用 水规格 和试 验方 法 GA/T 122 毒 物分 析名 词术 语 3 术语 和定 义 、 缩略 语 3.1 术 语和 定义 GA/T 122 界 定的 术语 和定 义适用 于本 文件 。 3.2 缩 略语 下列 缩 略语 适用 于本 文件 。 ATD ： 吸附 热脱 附 （Adsorption Thermal Desorption）； EI ：电子 轰 击（Electron Impact ） ； GC-MS ： 气相 色谱 质谱 （Gas Chromatography-Mass Spectrometer ） ； GC-

5、FPD ： 配有 火焰 光度 检 测器的 气相 色谱 （Gas Chromatography-Flame Photometric detector ） ； HS-ATD-GC-MS ： 顶空 吸 附热脱 附气 相色 谱质谱 （Headspace-Adsorption Thermal Desorption-Gas Chromatography-Mass Spectrometer ） ； HS-GC-FPD ： 顶空 气 相色 谱火焰 光度 （Headspace-Gas Chromatography-Flame Photometric detector ） ； HS-GC-MS ： 顶空 气相 色

6、 谱 质谱 （Headspace-Gas Chromatography-Mass Spectrometer ） 。 4 原理 以空白 样品 和添 加样 品作 对照 ， 按 平行 操作 的要 求 ， 对生物 检材 进行 前处 理 ， 采用 气 相色 谱或 气相 色谱-质谱 法 检测 ， 用 外标 法进行 定量 。 5 试剂 和材 料 5.1 试剂 GA/T 2 实验用 水应 符 合 GB/T 6682 中规 定的 三级 水。 除 非另 有说明 ， 在 分析 中使 用的 试剂均 为分 析纯 ， 试 剂包括 ： a) 浓磷酸 ； b) 6.0mol/L 的磷 酸溶 液： 可 参考如 下方 法配 制，

7、 吸取 85% （w/w ）的 浓磷酸 69.2g ，用 水稀 释至 100mL ； c) 标准溶 液 ： 1) 1.0mg/mL 的硫 离子 标准 物 质储备 溶液 ：称 取硫 化钠 标准物 质一 定量 ，用 水配 制成硫 离 子 含量 为 1.0mg/mL 的 溶液 ， 密封， 置于 冰箱 中 冷 藏保 存，现 用现 配； 2) 0.1mg/mL 的 硫离 子标 准物 质工作 溶液 ： 移取1.0mg/mL 的硫 离子 标准 物质 储备 溶液 1.0mL ， 用水定容 至 10.0mL ，混匀，现用现 配。 实验中所用 其他浓度 的 工作溶液均由 1.0mg/mL 标准物 质储 备溶 液配

8、 制得到 。 注：标准工作溶液的配制可根据实际情况进行调整。 5.2 材料 顶空进 样瓶 及瓶 盖。 6 仪器 和设 备 仪器和 设备 包括 ： a) GC-MS 仪 ：配 有 EI 源 ； b) ATD 仪 ： 应 配备 硫化 物专 用冷阱 ； c) GC-FPD 仪 ； d) 电子天 平 ： 定性 检验 实际 分度 值 d0.1mg ， 定量 检 验实际 分度 值 d0.01mg ； e) 振荡器 ； f) 移液器 。 7 操作 方法 7.1 定性 分析 7.1.1 样品 前处 理 7.1.1.1 顶 空前 处理 取 2.0mL 检材 ， 加入 0.5mL 6.0mol/L 的 磷酸 溶液

9、 混 匀并密 封， 用 HS-GC-MS 法、HS-ATD-GC-MS 法或 HS-GC-FPD 法 进行 检 测。 注： 检材样品取样量、提取溶剂体积可根据实际情况调整。 7.1.1.2 质控 样 品制 备 取等量 空白 血液 两份 ， 一 份作为 空白 样品 ， 一 份 加 入硫离 子标 准物 质工 作溶 液 使对 应硫 化氢 含量 为 1.0g /mL （HS-GC-MS 法） 、0.2g /mL （HS-ATD-GC-MS 法） 或 0.1g /mL （HS-GC-FPD 法） 作 为添加 样品， 与检 材样 品平 行操 作。 7.1.2 仪器 检测 7.1.2.1 仪 器条 件 GA

10、/T 3 7.1.2.1.1 HS-GC-MS 条件 7.1.2.1.1.1 HS 条件 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 平衡 温度 ：50 ； b) 平 衡时 间：5min ； c) 进样 量：200 L 。 7.1.2.1.1.2 GC-MS 条件 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 色谱柱 ：Elite-624 毛细 色 谱柱 （60m 0.32mm 1.8 m ）或其 他等 效柱 ； 注：Elite-624 毛细管色谱柱 是 P.E. 公司产品的商品名称，

11、 给出 这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是表示对 该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱 升温 程序 ：5 保持 1min ， 以 10/min 速率 升温 至 100 ， 保持 1min ； c) 进样口 温度 ：100 ； d) 传输线 温度 ：100 ； e) 载气： 氦气 ； f) 电子轰 击能 量：70eV ； g) 离子源 温度 ：280 ； h) 扫描方 式： 全扫 描（Scan ）； i) 溶剂延 迟： 无； j) 柱流量 ：1.0mL/min ； k) 进样方 式： 不分 流进 样； l) 质量范 围：30amu 50amu

12、 ； m) 定性定 量离 子：m/z 32、m/z 33、m/z 34 * 和m/z 36 。 注：* 表示定量离子。 7.1.2.1.2 HS-ATD-GC-MS 条件 7.1.2.1.2.1 HS 条件 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 平衡 温度 ：25 ； b) 平 衡时 间：5min ； c) 进样 量：5mL 。 7.1.2.1.2.2 ATD 条件 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 冷阱 吸附 温度 ：-30 ； b) 冷 阱脱 附温 度：200；

13、c) 脱附 气体 ：氦气 。 7.1.2.1.2.3 GC-MS 条件 同 7.1.2.1.1.2 。 GA/T 4 7.1.2.1.3 HS-GC-FPD 条件 7.1.2.1.3.1 HS 条件 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 平衡 温度 ：50 ； b) 平 衡时 间：5min ； c) 进样 量：500 L 。 7.1.2.1.3.2 GC-FPD 条件 1 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 色谱柱 ：DB-35MS 毛细 色 谱柱（30m 0.32mm

14、 0.25 m ）或其 他等 效柱 ； 注：DB-35MS 毛细色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称， 给 出这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是表示 对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱 升温 程序 ：50 保持 2min ， 以 20 /min 升温 至 100 ； c) 进样口 温度 ：250 ； d) 载气： 氮气 ； e) 柱流量 ：1.0mL/min ； f) 进样方 式： 分流 进样 ； g) 分流比 ：10:1 ； h) FPD 检 测器 ，温 度 250 ，氢 气 11.5 mL/min ， 空气 10 mL/mi

15、n ； i) 使用条 件 1 进行 定量 分析 。 7.1.2.1.3.3 GC-FPD 条件 2 以下为 参考 条件 ，可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 ： a) 色谱柱 ：HP-INNOWax 毛 细色谱 柱（30m 0.32mm 0.25 m ）或 其他 等效 柱 ； 注：HP-INNOWax 毛细色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称， 给出这一信息是为了方便本标准的使用者， 并不是 表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱 升温 程序 ：50 保 持 1min，以 25 /min 升温 至 210

16、 ； c) 进样口 温度 ：250 ； d) 载气： 氮气； e) 柱流量 ：1.0mL/min ； f) 进样方 式： 分流 进样 ； g) 分流比 ：10:1 ； h) FPD 检 测器 ，温 度 250 ，氢 气 11.5 mL/min ， 空气 10 mL/min 。 7.1.2.2 进样 分别取 空白 空气 、 添 加样 品、 空 白样 品、 检 材样 品 、 标准 物质 工作 溶液， 按7.1.2.1 仪 器条 件 进 行检 测。进 样顺 序和 进样 次数 应确保 结果 有效 。 7.2 定 量分 析 7.2.1 样品 前处 理 移取血 液 检 材样 品2.0mL两份 ，按7.1.

17、1 进行 操作 ，供 仪器检 测 。 取与检 材样 品等 量的 相似 基质空 白样 品， 与检 材样 品平行 操作 ，供 仪器 检测 。 GA/T 5 取与检 材样 品等 量的 相似 基质空 白样 品 两 份 ， 添 加 硫离子 标准 物质 工作 溶液 ， 得 到添 加样 品 ， 与检 材样品 平行 操作 ， 供仪 器 检测 。 添 加样 品中 目标 物 含量应 在检 材样 品中 目标 物含量 的 （100 50 ）% 范围 内。 7.2.2 仪器 检测 7.2.2.1 仪 器条 件 同 7.1.2.1 。 7.2.2.2 进样 分别取 检材 样品 、空 白样 品、添 加样 品，按7.1.2.

18、1 仪器条 件 进 样分 析。 7.2.3 计算 7.2.3.1 计 算含 量 记录检 材样 品和 添加 样品 中目标 物的 保留 时间 和峰 面积值 ，按 公式 （1 ）计 算 检材样 品中 目标 物的 含量。 = A A 34 32 . (1) 式中： 检 材样 品中 硫化 氢 的 含量； A 检材 样品 中 硫化 氢 的 峰 面积； A添 加样 品中 硫化 氢 的 峰面积 ； 添加 样品 中 硫 离子 的 含量。 7.2.3.2 计 算相 对相 差 记录 7.2.3.1 中 计算 得到 的 检材样 品中 目标 物的 含量 ， 按公 式(2) 计 算相 对相 差 ： 12 100% - R

19、D = .(2) 式中： RD相 对相 差， 用百 分比 （% ） 表示 ； 1 、 2 两 份检 材样 品中 目标物 的含 量； 两份 检材 样品 中目 标物 含量的 平均 值。 8 结果 评价 8.1 定 性结 果评 价 8.1.1 阳性 结果 评价 8.1.1.1 GC-MS 法 在相同 条件 下进 行样 品测 定时， 检材 样品 中目 标物 的色谱 峰保 留时 间与 标准 物质工 作溶 液一 致 （ 相 对误差 在 1% 之内 ） ， 且在 扣除背 景后 的检 材样 品质 谱图中 ，目 标物 的质 谱特 征离子 （不 少 于 3 个）与 标 准 物质 工 作溶 液 一致 ，特 征 离子

20、 丰 度比 与 浓度 接近 的 标准 物 质工 作 溶液 相比 ， 相对 偏差 不 超 过表 1 X GA/T 6 规定的 范围 ，空 白样 品无 干扰， 则可 判断 检材 样品 中检出 目标 物。 表 1 特征 离子 丰度 比的 最 大允许 相对 偏差 范围 特征离子丰度比 50% 20 50 1020 10% 最大允许相对偏差 10 15 20% 50% 8.1.1.2 GC-FPD 法 在相同 条件 下进 行样 品测 定时， 如果 在两 个仪 器条 件下， 检材 样品 中目 标物 的色谱 峰保 留时 间与 标 准溶液 均一致（相对 误差 在 1% 之内） ，空白样品无 干扰，则可判断检材

21、 样品 中检出目标物 。必要 时应 使用 GC-MS 方法 确认 结果 。 8.1.2 阴性 结果 评价 检材样 品未 出现 与目 标物 标准物 质工 作溶 液一 致的 色谱峰 ， 且 添加 样品 中出 现 与目标 物标 准物 质 工 作溶液 一致 的色 谱峰 ，空 白样品 无干 扰， 则可 判断 检材样 品中 未检 出目 标物 。 8.2 定 量 结果 评价 检 材样 品中目 标物含 量的RD 20% ，定 量数据 可靠， 其含量 按 两 份检材 的平均 值计算 。检 材样品 中目标 物含 量的RD 20% ，定量 数据 不可 靠 ， 应重 新提取 检验 。 相关实 验数 据及 谱图 参见

22、附录 A 和附 录 B 。 GA/T 7 附录 A （资料 性 ） 硫化氢 相关 资料 及谱 图 A.1 硫 化氢 的相 关资 料 中文名 ： 硫 化氢 ；英 文名 ：Hydrogen Sulfide ； 分子 式:H 2S ；分 子量:34.08 ；CAS 号 7783-06-4 。 A.2 硫 化氢 的相 关谱 图 硫化氢 的 GC-MS 离子 流图 和质谱 图见 图 A.1 和 A.2 ，GC-FPD 色 谱图 见图 A.3 和 A.4 。 图A.1 硫 化氢 的离 子流 图 A.2 硫化 氢的 质谱 图 GA/T 8 A.3 硫化 氢的GC-FPD 色 谱图（ 条 件1） A.4 硫化

23、 氢的GC-FPD 色 谱图（ 条 件2） A.3 检 出限 HS-GC-MS 法 分析 ，血液中 硫化 氢的 检出 限 为 1.0g/mL 。 HS-ATD-GC-MS 法 分析 ， 血液中 硫化 氢的 检出 限 为 0.2g/mL 。 HS-GC-FPD 法 分析 ，血液中 硫化 氢的 检出 限 为 0.1g/mL 。 GA/T 9 附录 B （资料 性 ） 腐败血 液检 材中 硫化 氢的 含量数 据 新 鲜 血 液检 材 存放 至 腐败会 逐 渐 产生 硫 化氢 。25敞 开 放 置条 件 下， 测 量的硫 化 氢 含量 数 据见 表 B.1 。 表B.1 新鲜 血液 检材 存放 至腐败 硫化 氢含 量数 据 存放时间 d 血液样品 1 硫化氢含量 g/mL 血液样品 2 硫化氢含量 g/mL 0 0 0 0.5 0.08 0.10 1 0.26 0.18 1.5 0.31 0.23 3 0.43 0.63 6 20.60 15.50 14 21.21 19.60 _