DB61 T 1138-2018 水质 粪大肠菌群的测定 酶底物法.pdf

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1、ICS 13.060.70Z 16 DB61陕 西 省 地 方 标 准DB 61/T 1138 2018水 质 粪 大 肠 菌 群 的 测 定 酶 底 物 法 Water quality Determination of fecal coliforms Enzyme substrate method 2018 -04- 12发 布 2018- 05-12实 施陕 西 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB61/T 11382018 I 目 次前 言 .II1 范 围 .12 规 范 性 引 用 文 件 .13 术 语 和 定 义 .14 方 法 原 理 .15 试 剂 与 材 料 .16

2、 仪 器 与 设 备 .27 样 品 .2 8 分 析 步 骤 .39 结 果 计 算 与 表 示 .410 质 量 保 证 和 质 量 控 制 .511 废 物 处 理 .5附 录 A （ 资 料 性 附 录 ） 酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分 . 6附 录 B （ 规 范 性 附 录 ） 粪 大 肠 菌 群 检 数 表 .7附 录 C （ 规 范 性 附 录 ） 51孔 定 量 孔 板 MPN 表 .8附 录 D （ 规 范 性 附 录 ） 97孔 定 量 孔 板 MPN 表 .1 DB61/T 1138 2018 II 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1 2009

3、和 HJ 168 2010给 出 的 规 则 起 草 。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站 和 陕 西 省 环 境 保 护 厅 提 出 。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 保 护 厅 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 许 锋 、 张 会 强 、 刘 敏 、 周 弛 、 吴 卫 东 、 马 文 鹏 、 张 秦 铭 、 宁 西 翠 、 许 伊 蕾 、 张静 雪 。本 标 准 由 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站 负 责 解 释 。本 标 准 首 次 发 布 。联 系 信 息 如 下 ：

4、 单 位 ： 陕 西 省 环 境 监 测 中 心 站电 话 ： 029-85429127地 址 ： 陕 西 省 西 安 市 雁 塔 区 西 影 路 106号邮 编 ： 710054 DB61/T 11382018 1 水 质 粪 大 肠 菌 群 的 测 定 酶 底 物 法1 范 围本 标 准 规 定 了 水 中 粪 大 肠 菌 群 测 定 的 酶 底 物 法 的 术 语 和 定 义 、 方 法 原 理 、 试 剂 与 材 料 、 仪 器 与 设备 、 样 品 、 分 析 步 骤 、 结 果 计 算 与 表 示 、 质 量 保 证 和 质 量 控 制 、 废 物 处 理 的 要 求 。本 标 准

5、 适 用 于 地 表 水 、 生 活 污 水 和 废 水 中 粪 大 肠 菌 群 的 测 定 。当 接 种 量 为 300mL时 ， 方 法 的 检 出 限 为 3MPN/L， 检 测 范 围 为 3MPN/L 230MPN/L； 当 接 种 量 为 100mL时 ， 方 法 的 检 出 限 为 10MPN/L， 采 用 51孔 定 量 孔 板 的 检 测 范 围 为 10MPN/L 2005MPN/L， 采 用 97孔 定 量 孔板 的 检 测 范 围 为 10MPN/L 24196MPN/L。2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少

6、 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB/T 5750.12 生 活 饮 用 水 标 准 检 验 方 法 微 生 物 指 标GB/T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 粪 大 肠 菌 群 fecal coliforms粪 大 肠 菌 群 ， 又 称 耐 热 大 肠 菌 群 （

7、 thermotolerant coliforms） 。 是 一 种 通 常 在 44.5 下 培 养 发酵 乳 糖 产 酸 产 气 、 需 氧 及 兼 性 厌 氧 的 革 兰 氏 阴 性 无 芽 胞 杆 菌 。 3.2 最 可 能 数 most probable number； MPN基 于 泊 松 分 布 的 一 种 间 接 计 数 方 法 。4 方 法 原 理粪 大 肠 菌 群 在 邻 硝 基 苯 - -D-吡 喃 半 乳 糖 苷 （ ONPG） 培 养 基 上 培 养 产 生 -D-半 乳 糖 苷 酶 （ -D-galactosidase） ， 该 酶 可 以 分 解 色 源 底 物

8、释 放 出 黄 色 的 邻 硝 基 苯 酚 ， 通 过 颜 色 变 化 定 性 ， MPN法 定量 。5 试 剂 与 材 料 DB61/T 1138 2018 2 5.1 除 非 另 有 说 明 ， 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ， 水 为 符 合 GB/T 6682中 规 定 的 一 级 水 。5.2 培 养 基 选 择 市 售 商 品 化 酶 底 物 法 试 剂 ， 或 自 行 配 制 培 养 基 ， 基 本 成 分 参 照 附 录 A。5.3 硫 代 硫 酸 钠 （ Na2S2O3） 。5.4 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠 （ EDTA-Na2） 。5.5 氯 化 钠 （ NaC

9、l） 。5.6 硫 代 硫 酸 钠 溶 液 ： （ Na2S2O3） 0.10g/mL。注 ： 称 取 硫 代 硫 酸 钠 （ 5.2） 10g， 适 量 水 溶 解 ， 定 容 至 100mL， 临 用 现 配 。5.7 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠 （ EDTA-Na 2） 溶 液 ： （ C10H14N2O8Na2 2H2O） 0.15g/mL。注 ： 称 取 乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠 （ 5.3） 15g， 适 量 水 溶 解 ， 定 容 至 100mL， 摇 匀 ， 常 温 下 可 存 放 30d。5.8 灭 菌 生 理 盐 水 : （ NaCl） =0.9%（ m/v） 。

10、注 ： 称 取 氯 化 钠 （ 5.4） 0.9g， 适 量 水 溶 解 ， 定 容 至 100mL， 经 121 高 压 蒸 汽 灭 菌 20min， 备 用 。6 仪 器 与 设 备6.1 采 样 瓶 ： 500mL 棕 色 磨 口 玻 璃 瓶 。6.2 恒 温 培 养 箱 ： 44.5 0.5 。6.3 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 ： 121 、 0.101Mpa。6.4 冰 箱 ： 0 4 。6.5 恒 温 干 燥 箱 ： 0 300 。6.6 程 控 定 量 封 口 机 ： 带 51 孔 和 97孔 胶 托 。 6.7 51孔 和 97 孔 定 量 孔 板 ： 无 菌 。6.8 10

11、0mL 无 菌 取 样 瓶 。6.9 试 管 ： 15mm 150mm， 带 透 气 胶 塞 。6.10 标 准 阳 性 比 色 盘 。6.11 移 液 管 ： 1mL、 10mL， 也 可 采 用 体 积 可 调 式 移 液 器 。6.12 锥 形 瓶 ： 500mL。6.13 量 筒 ： 100mL。6.14 移 液 管 、 试 管 、 量 筒 、 采 样 瓶 等 均 需 包 扎 后 经 121 高 压 蒸 汽 灭 菌 20min， 备 用 。7 样 品7.1 样 品 采 集 7.1.1 与 其 他 项 目 一 同 采 样 时 ， 先 单 独 采 集 微 生 物 样 品 。 采 样 瓶 （

12、 6.1） 不 得 用 水 样 洗 涤 ， 按 照 无 菌操 作 的 要 求 采 集 水 样 于 灭 菌 的 采 样 瓶 中 。7.1.2 采 集 江 、 河 、 湖 、 库 等 地 表 水 时 ， 可 握 住 瓶 子 下 部 直 接 将 带 塞 采 样 瓶 插 入 水 中 ， 距 水 面 约 10cm15cm处 ， 瓶 口 朝 水 流 方 向 ， 拔 玻 璃 瓶 塞 ， 使 水 样 灌 入 瓶 内 然 后 盖 上 瓶 塞 ， 将 采 样 瓶 从 水 中 取 出 。 如 果没 有 水 流 ， 可 握 住 瓶 子 水 平 前 推 。 采 样 后 瓶 内 要 留 足 够 的 空 间 ， 一 般 采

13、 样 量 为 采 样 瓶 容 量 的 80%左 右 。采 好 水 样 后 ， 迅 速 盖 好 瓶 盖 并 扎 上 无 菌 包 装 纸 。7.1.3 从 龙 头 装 置 采 集 样 品 时 ， 要 选 用 完 好 无 损 的 龙 头 ， 采 水 前 将 龙 头 打 开 至 最 大 ， 放 水 3min 5min；然 后 将 龙 头 关 闭 ， 用 火 焰 灼 烧 约 3min灭 菌 ， 开 足 龙 头 ， 再 放 水 1min。 采 样 时 控 制 水 流 速 度 。7.1.4 采 集 地 表 水 、 废 水 样 品 及 一 定 深 度 的 水 样 时 ， 可 使 用 灭 菌 过 的 专 用 采

14、 样 装 置 采 样 。 在 同 一 采 样点 进 行 分 层 采 样 时 ， 应 自 上 而 下 进 行 。 DB61/T 11382018 3 7.2 样 品 保 存样 品 在 10 以 下 冷 藏 运 输 ， 运 输 时 间 不 超 过 6h。 实 验 室 接 样 后 不 能 立 即 展 开 检 测 的 ， 应 将 样 品 放入 0 4 冰 箱 （ 6.4） 保 存 ， 在 2h内 检 测 。7.3 干 扰 和 消 除酸 性 样 品 ， 应 在 分 析 前 按 无 菌 操 作 要 求 调 节 样 品 pH值 至 7.0 8.0。 在 采 样 瓶 灭 菌 前 加 入 0.4mL硫 代硫 酸

15、 钠 溶 液 （ 5.5） 以 除 去 余 氯 对 细 菌 的 抑 制 作 用 ； 在 采 样 瓶 灭 菌 前 加 入 1.2mL乙 二 胺 四 乙 酸 二 钠（ EDTA-Na 2） 溶 液 （ 5.6） 以 除 去 重 金 属 对 细 菌 的 抑 制 作 用 。8 分 析 步 骤8.1 水 样 接 种 量水 样 充 分 混 匀 后 ， 根 据 水 样 污 染 的 程 度 确 定 水 样 的 接 种 量 ， 水 样 的 接 种 量 可 参 考 表 1。表 1 水 样 接 种 量 参 考 表水 样 类 型 接 种 量 （ mL）300 100 10 1 10 -1 10-2 10-3 10-4

16、 10-5 10-6地 表 水 （ 湖 、 库 ） 地 表 水 （ 江 、 河 ） 生 活 污 水 废 水 （ 工 业 废 水 ） 废 水 医 疗 机 构 排 放 污 水 （ 处 理 前 ） 废 水 医 疗 机 构 排 放 污 水 （ 处 理 后 ） 废 水 (畜 禽 养 殖 业 等 排 放 废 水 ) 注 ： 接 种 量 为 10 -1 10-6mL时 ， 需 要 稀 释 或 逐 级 稀 释 ， 稀 释 方 法 见 8.2.2。8.2 接 种8.2.1 清 洁 水 样8.2.1.1 接 种 量 为 300mL 时 ， 接 种 水 样 为 2 份 100mL 和 10 份 10mL。8.2.1

17、.2 量 取 2 份 100mL 水 样 ， 分 别 加 入 2 个 100mL 无 菌 取 样 瓶 （ 6.8） 中 ， 各 加 入 2.7g 0.5g酶 底物 法 试 剂 （ 5.1） ， 充 分 混 匀 溶 解 ； 量 取 100mL 灭 菌 生 理 盐 水 （ 5.7） ， 加 入 2份 2.7g 0.5g酶 底 物 法试 剂 （ 5.1） ， 充 分 混 匀 溶 解 ， 分 装 于 10 个 无 菌 试 管 （ 6.9） 中 ， 每 管 含 10mL 溶 液 。 量 取 10 份 10mL水 样 接 种 于 上 述 10 个 含 10mL溶 液 的 试 管 中 ， 加 塞 密 封 。

18、8.2.2 受 污 染 水 样8.2.2.1 接 种 量 为 100mL 时 ， 用 无 菌 取 样 瓶 （ 6.8） 量 取 100mL 水 样 ， 加 入 2.7g 0.5g酶 底 物 法 试 剂 （ 5.1） ， 充 分 混 匀 溶 解 ， 将 溶 解 液 倒 入 51孔 或 97 孔 定 量 孔 板 （ 6.7） 中 （ 根 据 水 样 污 染 程 度 选 择 合适 的 孔 板 ） ， 排 除 气 泡 后 用 程 控 定 量 封 口 机 （ 6.6） 进 行 封 口 。8.2.2.2 接 种 量 100mL时 ， 以 10-4为 例 ， 取 1mL水 样 加 入 100mL无 菌 取

19、样 瓶 中 ， 用 灭 菌 生 理 盐 水 （ 5.7）稀 释 定 容 至 刻 度 线 ， 混 匀 ， 再 取 稀 释 后 的 水 样 1mL， 重 复 上 述 操 作 ， 以 下 操 作 按 照 8.2.2.1进 行 。 DB61/T 1138 2018 4 8.3 培 养将 8.2.1和 8.2.2中 接 种 后 的 取 样 瓶 、 试 管 或 孔 板 放 入 恒 温 培 养 箱 中 44.5 0.5 培 养 24h 2h。8.4 对 照 试 验8.4.1 空 白 试 验用 灭 菌 生 理 盐 水 （ 5.7） 代 替 样 品 按 照 8.2和 8.3进 行 测 定 。8.4.2 阳 性

20、及 阴 性 对 照8.4.2.1 粪 大 肠 菌 群 测 定 的 阳 性 菌 株 为 大 肠 埃 希 氏 菌 （ Escherichia.coli） ,阴 性 菌 株 为 产 气 肠 杆 菌（ Enterobacter aerogenes） 。8.4.2.2 标 准 菌 株 的 菌 悬 液 浓 度 建 议 使 用 0.3麦 氏 浓 度 值 0.4麦 氏 浓 度 值 ， 取 适 量 后 按 照 8.2.2.2进 行 接 种 ， 按 8.3培 养 后 ， 大 肠 埃 希 氏 菌 呈 现 阳 性 反 应 ， 产 气 肠 杆 菌 呈 现 阴 性 反 应 。 8.5 结 果 判 读取 样 瓶 、 试 管

21、 或 孔 板 经 培 养 后 ， 对 照 阳 性 比 色 盘 （ 6.10） ， 水 样 变 黄 判 断 为 粪 大 肠 菌 群 阳 性 ， 不变 色 判 断 为 粪 大 肠 菌 群 阴 性 。 记 录 取 样 瓶 、 试 管 阳 性 个 数 ， 51孔 定 量 孔 板 （ 6.7） 记 录 大 孔 阳 性 数 ， 97孔 定 量 孔 板 （ 6.7） 分 别 记 录 大 孔 和 小 孔 阳 性 数 。9 结 果 计 算 与 表 示9.1 结 果 计 算9.1.1 接 种 量 为 300mL根 据 8.5中 取 样 瓶 和 试 管 阳 性 个 数 ， 查 MPN表 （ 附 录 B） 可 得 每

22、 升 水 样 中 粪 大 肠 菌 群 MPN数 。9.1.2 接 种 量 100mL 根 据 8.5中 51孔 定 量 孔 板 阳 性 数 ， 查 51孔 MPN表 （ 附 录 C） ； 根 据 8.5中 97孔 定 量 孔 板 大 孔 和 小 孔 的阳 性 数 ， 查 97孔 MPN表 （ 附 录 D） 。 再 根 据 样 品 的 稀 释 度 ， 按 公 式 （ 1） 换 算 为 每 1L水 样 中 粪 大 肠 菌 群 的浓 度 。 fMPNC 10 值 .(1)式 中 ：C 每 升 水 样 中 粪 大 肠 菌 群 数 ， MPN/L；值MPN 查 51孔 或 97孔 MPN表 所 得 数

23、， MPN/100 mL；f 接 种 样 品 的 稀 释 度 。 9.2 结 果 表 示测 定 结 果 应 保 留 二 位 有 效 数 字 ， 大 于 等 于 100时 以 科 学 计 数 法 表 示 ， 单 位 为 MPN/L。 DB61/T 11382018 5 10 质 量 保 证 和 质 量 控 制10.1 实 验 室 应 设 置 阳 性 对 照 、 阴 性 对 照 和 空 白 对 照 。10.2 每 批 培 养 基 应 按 本 标 准 8.4的 要 求 采 用 有 证 标 准 菌 株 进 行 阳 性 、 阴 性 对 照 试 验 （ 见 表 2） 。10.3 宜 选 用 市 售 商 品

24、 化 培 养 基 ， 以 减 少 配 制 中 产 生 的 误 差 。10.4 应 定 期 使 用 有 证 标 准 物 质 /样 品 进 行 质 量 控 制 。10.5 每 批 样 品 至 少 测 定 10%的 平 行 双 样 ， 检 测 结 果 以 算 数 平 均 值 计 。表 2 阳 性 、 阴 性 对 照 菌 株 参 考 表菌 株 名 称 英 文 名 菌 株 编 号大 肠 埃 希 氏 菌 Escherichia coli CICC 24176 产 气 肠 杆 菌 Enterobacter aerogenes CICC 10293或 ATCC 1304811 废 物 处 理使 用 后 的 器

25、 皿 及 废 弃 物 应 经 121 高 压 蒸 汽 灭 菌 30min处 理 。 DB61/T 1138 2018 6 AA附 录 A（ 资 料 性 附 录 ）酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分A.1 酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分酶 底 物 法 培 养 基 参 照 GB/T 5750.12中 规 定 的 基 本 成 分 进 行 配 制 ， 见 表 A.1。表 A.1 酶 底 物 法 培 养 基 的 基 本 成 分 成 分 分 子 式 或 缩 写 含 量硫 酸 铵 （ NH4） 2SO4 5.0g硫 酸 锰 MnSO4 0.5mg硫 酸 锌 ZnSO4 0.5mg

26、硫 酸 镁 MgSO4 100mg氯 化 钠 NaCl 10g氯 化 钙 CaCl 2 50mg亚 硫 酸 钠 Na2SO3 40mg两 性 霉 素 B Amphotericin B 1mg邻 硝 基 苯 - -D-吡 喃 半 乳 糖 苷 ONPG 500mg4-甲 基 伞 形 酮 - -D-葡 萄 糖 醛 酸 苷 MUG 75mg茄 属 植 物 提 取 物 Solanium萃 取 物 500mgN-2-羟 乙 基 哌 嗪 -N-2-乙 磺 酸 钠 盐 HEPES 钠 盐 5.3gN-2-羟 乙 基 哌 嗪 -N-2-乙 磺 酸 HEPES 6.9g水 H 2O 1000mL DB61/T 1

27、1382018 7 BB附 录 B（ 规 范 性 附 录 ）粪 大 肠 菌 群 检 数 表B.1 粪 大 肠 菌 群 检 数 表粪 大 肠 菌 群 检 数 表 见 表 B.1。 表 B.1 粪 大 肠 菌 群 检 数 表 10mL水 样 的 阳 性 管 数 100mL水 样 的 阳 性 瓶 数0 1 21L水 样 中 粪 大 肠 菌 群 数 1L水 样 中 粪 大 肠 菌 群 数 1L水 样 中 粪 大 肠 菌 群 数0 3 4 111 3 8 182 7 13 273 11 18 384 14 24 525 18 30 706 22 36 927 27 43 1208 31 51 161 9

28、 36 60 23010 40 69 230 DB61/T 1138 2018 8 CC附 录 C（ 规 范 性 附 录 ）51孔 定 量 孔 板 MPN表C.1 51孔 定 量 孔 板 MPN表51孔 定 量 孔 板 MPN表 见 表 C.1。 表 C.1 51孔 定 量 孔 板 MPN表 阳 性 孔 数 MPN值 95%可 信 范 围 下 限 95%可 信 范 围 上 限0 1 0.0 3.71 1.0 0.3 5.62 2.0 0.6 7.33 3.1 1.1 9.04 4.2 1.7 10.75 5.3 2.3 12.36 6.4 3.0 13.97 7.5 3.7 15.58 8.7

29、 4.5 17.19 9.9 5.3 18.8 10 11.1 6.1 20.511 12.4 7.0 22.112 13.7 7.9 23.913 15.0 8.8 25.714 16.4 9.8 27.515 17.8 10.8 29.416 19.2 11.9 31.317 20.7 13.0 33.318 22.2 14.1 35.219 23.8 15.3 37.320 25.4 16.5 39.4 21 27.1 17.7 41.622 28.8 19.0 43.923 30.6 20.4 46.324 32.4 21.8 48.725 34.4 23.3 51.226 36.4

30、24.7 53.927 38.4 26.4 56.628 40.6 28.0 59.5 DB61/T 11382018 9 表 C.1（ 续 ）29 42.9 29.7 62.530 45.3 31.5 65.631 47.8 33.4 69.032 50.4 35.4 72.533 53.1 37.5 76.234 56.0 39.7 80.135 59.1 42.0 84.436 62.4 44.6 88.837 65.9 47.2 93.7 38 69.7 50.0 99.039 73.8 53.1 104.840 78.2 56.4 111.241 83.1 59.9 118.342

31、88.5 63.9 126.243 94.5 68.2 135.444 101.3 73.1 146.045 109.1 78.6 158.746 118.4 85.0 174.547 129.8 92.7 195.048 144.5 102.3 224.1 49 165.2 115.2 272.250 200.5 135.8 387.651 200.5 146.1 DB61/T 11382018 1 DD附 录 D（ 规 范 性 附 录 ）97 孔 定 量 孔 板 MPN表D.1 97孔 定 量 孔 板 MPN表97孔 定 量 孔 板 MPN表 见 表 D.1、 表 D2和 表 D3。 表

32、D.1 97孔 定 量 孔 板 MPN表 （ 小 孔 阳 性 孔 数 0 16） 大 孔 阳性 孔 数 小 孔 阳 性 孔 数0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 160 1 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0 11.0 12.0 13.0 14.1 15.1 16.11 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.1 8.1 9.1 10.1 11.1 12.1 13.2 14.2 15.2 16.2 17.32 2.0 3.0 4.1 5.1 6.1 7.1 8.1 9.2 10.2 11.2 12

33、.2 13.3 14.3 15.4 16.4 17.4 18.53 3.1 4.1 5.1 6.1 7.2 8.2 9.2 10.3 11.3 12.4 13.4 14.5 15.5 16.5 17.6 18.6 19.74 4.1 5.2 6.2 7.2 8.3 9.3 10.4 11.4 12.5 13.5 14.6 15.6 16.7 17.8 18.8 19.9 21.05 5.2 6.3 7.3 8.4 9.4 10.5 11.5 12.6 13.7 14.7 15.8 16.9 17.9 19.0 20.1 21.2 22.26 6.3 7.4 8.4 9.5 10.6 11.6

34、12.7 13.8 14.9 16.0 17.0 18.1 19.2 20.3 21.4 22.5 23.67 7.5 8.5 9.6 10.7 11.8 12.8 13.9 15.0 16.1 17.2 18.3 19.4 20.5 21.6 22.7 23.8 24.98 8.6 9.7 10.8 11.9 13.0 14.1 15.2 16.3 17.4 18.5 19.6 20.7 21.8 22.9 24.1 25.2 26.3 9 9.8 10.9 12.0 13.1 14.2 15.3 16.4 17.6 18.7 19.8 20.9 22.0 23.2 24.3 25.4 26

35、.6 27.710 11.0 12.1 13.2 14.4 15.5 16.6 17.7 18.9 20.0 21.1 22.3 23.4 24.6 25.7 26.9 28.0 29.211 12.2 13.4 14.5 15.6 16.8 17.9 19.1 20.2 21.4 22.5 23.7 24.8 26.0 27.2 28.3 29.5 30.712 13.5 14.6 15.8 16.9 18.1 19.3 20.4 21.6 22.8 23.9 25.1 26.3 27.5 28.6 29.8 31.0 32.2 DB61/T 1138 2018 2 表 D.1（ 续 ）13

36、 14.8 16.0 17.1 18.3 19.5 20.6 21.8 23.0 24.2 25.4 26.6 27.8 29.0 30.2 31.4 32.6 33.814 16.1 17.3 18.5 19.7 20.9 22.1 23.3 24.5 25.7 26.9 28.1 29.3 30.5 31.7 33.0 34.2 35.415 17.5 18.7 19.9 21.1 22.3 23.5 24.7 25.9 27.2 28.4 29.6 30.9 32.1 33.3 34.6 35.8 37.116 18.9 20.1 21.3 22.6 23.8 25.0 26.2 27.

37、5 28.7 30.0 31.2 32.5 33.7 35.0 36.3 37.5 38.817 20.3 21.6 22.8 24.1 25.3 26.6 27.8 29.1 30.3 31.6 32.9 34.1 35.4 36.7 38.0 39.3 40.618 21.8 23.1 24.3 25.6 26.9 28.1 29.4 30.7 32.0 33.3 34.6 35.9 37.2 38.5 39.8 41.1 42.419 23.3 24.6 25.9 27.2 28.5 29.8 31.1 32.4 33.7 35.0 36.3 37.6 39.0 40.3 41.6 43

38、.0 44.320 24.9 26.2 27.5 28.8 30.1 31.5 32.8 34.1 35.4 36.8 38.1 39.5 40.8 42.2 43.6 44.9 46.321 26.5 27.9 29.2 30.5 31.8 33.2 34.5 35.9 37.3 38.6 40.0 41.4 42.8 44.1 45.5 46.9 48.4 22 28.2 29.5 30.9 32.3 33.6 35.0 36.4 37.7 39.1 40.5 41.9 43.3 44.8 46.2 47.6 49.0 50.523 29.9 31.3 32.7 34.1 35.5 36.

39、8 38.3 39.7 41.1 42.5 43.9 45.4 46.8 48.3 49.7 51.2 52.724 31.7 33.1 34.5 35.9 37.3 38.8 40.2 41.7 43.1 44.6 46.0 47.5 49.0 50.5 52.0 53.5 55.025 33.6 35.0 36.4 37.9 39.3 40.8 42.2 43.7 45.2 46.7 48.2 49.7 51.2 52.7 54.3 55.8 57.326 35.5 36.9 38.4 39.9 41.4 42.8 44.3 45.9 47.4 48.9 50.4 52.0 53.5 55

40、.1 56.7 58.2 59.827 37.4 38.9 40.4 42.0 43.5 45.0 46.5 48.1 49.6 51.2 52.8 54.4 56.0 57.6 59.2 60.8 62.428 39.5 41.0 42.6 44.1 45.7 47.3 48.8 50.4 52.0 53.6 55.2 56.9 58.5 60.2 61.8 63.5 65.229 41.7 43.2 44.8 46.4 48.0 49.6 51.2 52.8 54.5 56.1 57.8 59.5 61.2 62.9 64.6 66.3 68.030 43.9 45.5 47.1 48.7

41、 50.4 52.0 53.7 55.4 57.1 58.8 60.5 62.2 64.0 65.7 67.5 69.3 71.031 46.2 47.9 49.5 51.2 52.9 54.6 56.3 58.1 59.8 61.6 63.3 65.1 66.9 68.7 70.5 72.4 74.232 48.7 50.4 52.1 53.8 55.6 57.3 59.1 60.9 62.7 64.5 66.3 68.2 70.0 71.9 73.8 75.7 77.6 33 51.2 53.0 54.8 56.5 58.3 60.2 62.0 63.8 65.7 67.6 69.5 71

42、.4 73.3 75.2 77.2 79.2 81.234 53.9 55.7 57.6 59.4 61.3 63.1 65.0 67.0 68.9 70.8 72.8 74.8 76.8 78.8 80.8 82.9 85.035 56.8 58.6 60.5 62.4 64.4 66.3 68.3 70.3 72.3 74.3 76.3 78.4 80.5 82.6 84.7 86.9 89.136 59.8 61.7 63.7 65.7 67.7 69.7 71.7 73.8 75.9 78.0 80.1 82.3 84.5 86.7 88.9 91.2 93.5 DB61/T 11382018 3 表 D.1（ 续 ）37 62.9 65.0 67.0 69.1 71.2 73.3 75.4 77.6 79.8 82.0 84.2 86.5 88.8 91.1 93.4 95.8 98.238 66.3 68.4