DB52 T 269-2019 牛冷冻精液人工授精技术规程.pdf

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1、 ICS 65.020.30 B 43 DB52 贵州省地方标准 DB52/T 2692019 代替 DB52/T 269-1991 牛冷冻精液人工授精技术规程 Regulation of Artificial Insemination of Frozen Semen for Bovine 2019 - 12 - 31 发布 2020 - 06 - 01 实施 贵州省市场监督管理局 发布 DB52/T 2692019 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . . 1 3 术语和定义 . . 1 4 母牛及精液 . . 1 5 冷冻精液 运输与贮存 . . 2 6 母

2、牛发情鉴定 . . 2 7 输精准备 . . 3 8 输精操作 . . 3 9 母牛妊娠检查 . . 3 10 记录 . 4 附录 A（规范 性附录） 母牛配种记录表 . 5 DB52/T 2692019 II 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。 请注意：本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由贵州省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：贵州省畜禽遗传资源管理站、贵州省种畜禽种质测定中心、铜仁市畜牧技术推广 站、遵义职业技术学院、贵州农业职业学院。 本标准主要起草人：龚俞、张芸、李波

3、、李雪松、邓位喜、杨红文、张正群、刘青、梁正文、 毛同辉、李志惠、张立、樊莹、沈德林、杨齐心、刘嘉、李维、张游宇、廖中华、唐明艳、侯萍、 任丽群、王燕、龙向华、冉隆权、李华磊、徐伟。 本标准为1991年首次制定，2019年7月修订。 与原标准比较，本标准增加、修订了以下内容： 增加了牛冷冻精液人工授精技术规程的英文名称； 增加了术语定义； 增加了冷冻精液运输与贮存部分内容； 增加了母牛发情鉴定部分内容； 增加了冷冻精液解冻和精液质量要求； 修订了直肠把握输精部分内容； 增加了附录A母牛配种记录表。 DB52/T 2692019 1 牛冷冻精液人工授精技术规程 1 范围 本标准规定了种牛冻精选择

4、、冷冻精液运输与贮存、母牛发情鉴定、输精准备、输精操作、母牛妊 娠检查、记录等技术要求。 本标准适用于贵州省养牛场及养殖户母牛冷冻精液人工授精。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 NY/T 1335 牛人工授精技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 冷冻精液 将原精液用稀释液稀释、平衡后快速冷冻，在液氮中保存。冷冻精液包括颗粒和细管冻精两种剂型。 3.2 解冻 冷冻精液使用前使冷冻精子复苏重新并恢

5、复活力的处理方法。 3.3 人工授精 用人工方法采集公牛精液，经检查处理后，输入发情母牛子宫颈内，使其受孕的技术。 3.4 发情鉴定 通过外部观察或其它方式确定母牛发情程度的方法。 4 母牛及精液 DB52/T 2692019 2 4.1 母牛 选择健康、繁殖机能正常的未妊娠母牛。 4.2 精液 应符合 GB 4143 的规定。 5 冷冻精液运输与贮存 5.1 运输 在运输冷冻精液和液氮时，应使用生物贮存容器，并在原有保护套外，另加木箱或其它保护装置加 以固定。 5.2 贮存 冷冻精液应贮存在装有足够液氮的生物贮存容器中，定期检查和添加液氮，保证容器内的冷冻精液 置于液氮面下方。 5.3 转移

6、 贮存的冷冻精液向另一容器转移时，冷冻精液应浸泡在液氮中进行。冷冻精液在空气中暴露的时间 不得超过5秒。 5.4 提取 从容器内取冷冻精液时，只能将提筒置于容器内，用长柄镊夹取冷冻精液，如5秒内尚未取放完毕， 应将提筒放回液氮中浸泡一下再继续提取。 6 母牛发情鉴定 6.1 外部观察法 6.1.1 发情初期：母牛兴奋不安，哞叫，游走，采食量减少，追逐、爬跨其它母牛，但不接受爬跨； 阴户肿胀、松弛、充血、发亮，有稀薄透明黏液流出，黏液不呈牵丝状。 6.1.2 发情盛期：母牛温顺，其它牛爬跨时站立不动、后肢张开，接受爬跨，频频举尾。阴户肿胀、 红润，有大量透明而黏稠的黏液流出，呈牵丝状。 6.1.

7、3 发情末期：母牛兴奋度降低，平静，拒绝爬跨；阴户肿胀消退并起皱，尾根紧贴阴门，黏液量 减少、黏稠，牵丝较短。 6.2 直肠检查法 6.2.1 发情初期：卵巢变软，光滑，有时略有增大，卵泡直径 0.5 cm 左右。 6.2.2 发情盛期：一侧卵巢增大，卵泡直径 0.5 cm1.0 cm，呈圆形，明显突出于卵巢表面。 6.2.3 发情末期：卵泡增大，波动感明显，泡壁变薄，紧张度增加，有一触即破之感。 DB52/T 2692019 3 7 输精准备 7.1 输精器具清洗和消毒 7.1.1 输精枪、输精针及玻璃器皿等，先用清洗液清洗，再用清水洗净，用纱布分类包扎，置消毒锅 内煮沸 1 h 后，干燥备

8、用。 7.1.2 输精枪用后清洗、消毒后方可再次使用，采用一次性塑料外套管。 7.2 冷冻精液解冻和精液质量 冷冻精液解冻方法和精液质量应符合GB 4143的规定。 7.3 输精枪使用 输精枪主要用于细管冷冻精液的输精。将解冻的细管剪去顶部封口，剪切面整齐，迅速装入输精枪 管内。具体步骤为：剪去顶部封口为前端，输精枪推杆后退，细管装至输精枪内，将塑料外套套在输精 枪管外，输精枪管口顶紧外塑料套管固定圈，输精枪管前推到头，塑料外套管后部在输精枪后部螺纹处 拧紧，紧密结合。 7.4 牛体卫生 输精前，输精员带上一次性塑料手套，用手掏净母牛直肠粪便后，再用温水清洗母牛外阴部并擦拭 干净，不应用消毒液

9、清洗。 8 输精操作 8.1 输精时间确定 8.1.1 母牛出现发情盛期表现 6 h10 h 或卵泡壁薄、满而软、有弹性和波动感明显接近成熟排卵时 为适宜输精时间。 8.1.2 发情母牛一个情期输精 2 次，间隔时间 8 h12 h。 8.2 直肠把握输精 输精人员将手指并握，呈圆锥形从母牛肛门伸进直肠内，动作要轻柔，寻找并握住子宫颈的外口端， 手臂往下按压使阴门裂开，另一只手把准备好的输精枪自阴门向斜上方约45角轻轻插入5 cm10 cm， 避开尿道口，再改为平插，把输精枪送到子宫颈外口，双手配合，轻轻旋转插进，使输精枪缓缓越过子 宫颈管中的皱壁轮1 cm2 cm，到达子宫体部位，注入精液前

10、略后退0.5 cm，把输精枪推杆缓缓向前推， 将精液注入子宫颈内。 9 母牛妊娠检查 9.1 外部观察法 9.1.1 母牛配种后 23 个情期内未出现发情者，可初步判定为妊娠。 9.1.2 母牛妊娠外部表现，性情变得温和，食欲增加，毛色润泽。妊娠 56 个月后，腹围增大，右侧 腹壁突出，可在腹壁触到或看到胎动。 DB52/T 2692019 4 9.2 直肠检查法 9.2.1 输精后 2 个情期未发情，通过直肠触摸可查出两侧子宫角不对称，角间沟清晰。孕侧子宫角较 粗大、柔软，有液体波动感，弯曲度变小。 9.2.2 输精 2 个月后，通过直肠触摸可查出妊娠子宫增大并能感觉到胎儿和胎膜，同侧卵巢较另侧略 大，并有妊娠黄体，顶端可触感突起物。 10 记录 10.1 记录内容 记录内容详见附录A。 10.2 情期受胎率、受胎率和繁殖率 应符合 NY/T 1335 的要求。 DB52/T 2692019 5 A A 附 录 A （规范性附录） 母牛配种记录表 母牛 冻精 编号 品种 年龄 胎次 畜主 住址 品种 编号 来源 发情 时间 输精 时间 复配 时间 预产期 产犊 日期 输精 人员 备注 _ DB52/T 269-2019