SN T 2229-2008 进出口食品中稻瘟灵残留量检测方法 气相色谱-质谱法.pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口食品中稻瘟灵残留量检测方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犻狊狅狆狉狅狋犺犻狅犾犪狀犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局。本标准主要起草人:杨长志、康庆贺、吴岩、李刚、刘永、王传松、吴岚、程阳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖犜
2、版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售进出口食品中稻瘟灵残留量检测方法范围本标准规定了进出口食品中稻瘟灵残留量的气相色谱和气相色谱质谱检测方法。本标准适用于大米、玉米、柑橘、苹果、菠菜、大葱、松籽仁、葵花籽仁、茶叶、鱼、牛肝、鸡肾、蜂蜜及牛奶中稻瘟灵残留量的检测和确证。方法提要试样中残留的稻瘟灵用正己烷或正己烷丙酮、乙腈提取,提取液浓缩后,经石墨炭黑固相萃取柱、中性氧化铝固相萃取柱、氟罗里硅土固相萃取柱、固相萃取柱净化,用气相色谱仪检测、气相色谱质谱仪检测和确证,外标法定量。试剂和材料除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为去离子水。丙酮:色谱纯。正己烷:色谱纯。乙腈:色谱纯。甲醇:色谱纯。磷酸氢二
3、钠。磷酸二氢钠。氯化钠。无水硫酸钠:经灼烧,置于干燥器内备用。正己烷丙酮溶液(,体积比)。正己烷丙酮溶液(,体积比)。正己烷丙酮溶液(,体积比)。甲醇溶液:取甲醇,加入水,混匀。甲醇溶液:取甲醇,加入水,混匀。饱和氯化钠溶液:称取氯化钠,用水溶解并稀释至。硫酸钠溶液():称取无水硫酸钠,用水溶解并稀释至。磷酸盐缓冲液(,):称取磷酸氢二钠和磷酸二氢钠,分别用水溶解并稀释至。量取磷酸氢二钠水溶液和磷酸二氢钠水溶液混合于烧瓶中。稻瘟灵标准品(,):纯度大于等于。稻瘟灵标准溶液:准确称取适量稻瘟灵的标准品,用丙酮配成浓度为的标准储备液,标准储备液可在条件下储存个月;根据需要再用正己烷稀释成适当浓度的
4、标准工作液,标准工作液可在条件下储存个月。石墨炭黑固相萃取柱:,。使用前依次用丙酮、正己烷活化。中性氧化铝固相萃取柱:,。使用前依次用丙酮、正己烷活化。备用。氟罗里硅土固相萃取柱:,。使用前依次用丙酮、正己烷活化。备用。固相萃取柱:,。使用前依次用甲醇、水活化。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售仪器和设备气相色谱仪:配检测器。气相色谱质谱联用仪:配负化学电离源。电子天平:感量,。固相萃取装置。微波炉:。粉碎机。组织捣碎机。离心机:。旋涡混合器。旋转蒸发器。氮吹仪。均质器:。具塞玻璃离心管:、。无水硫酸钠柱:(内径)玻璃柱,内装高无水硫酸钠。试样制备与保存试样制备柑橘、苹果、菠菜取有代表性
5、样品约(不可用水洗涤),将其可食部分切碎后,用组织捣碎机将样品加工成浆状,装入洁净容器作为试样,密封并标明标记。大葱取有代表性样品约(不可用水洗),将其可食部分切成约的段,装入洁净容器作为试样,密封并标明标记。玉米、大米、茶叶、松籽仁、葵花籽仁取有代表性样品约,用粉碎机粉碎,混匀,装入洁净容器作为试样,密封并标明标记。牛肝、鸡肾、鱼取有代表性样品约,将其可食部分切碎后,用组织捣碎机将充分捣碎均匀,装入洁净容器作为试样,密封并标明标记。蜂蜜取有代表性样品约。对于无结晶的样品将其搅拌均匀;对于有结晶析出的样品,在密闭情况下,将样品置于不超过的水浴中温热,待样品全部融化后搅拌均匀,迅速冷却至室温。在
6、融化时应注意防止水分挥发。装入洁净容器作为试样,密封并标明标记。试样保存玉米、大米、茶叶、松籽仁、葵花籽仁、蜂蜜和牛奶等试样于以下保存;柑橘、苹果、菠菜、大葱、牛肝、鸡肾和鱼等试样于以下保存。在制样的操作过程中,应防止样品污染或发生残留物含量的变化。测定步骤提取玉米、大米、松籽仁、葵花籽仁称取试样约(精确到)于离心管中,加入无水硫酸钠()和乙腈(),用均质器以均质,离心。将上清液转移至浓缩瓶犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售中。再用乙腈重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入正己烷()溶解残渣待净化。柑橘、苹果、菠菜、牛肝、鸡肾、鱼称取试样约(精确到)
7、于离心管中,加入无水硫酸钠和正己烷丙酮()溶液,用均质器以均质,离心。将上清液通过无水硫酸钠柱脱水于浓缩瓶中。再用正己烷丙酮()溶液重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入正己烷溶解残渣待净化。茶叶称取试样约(精确到)于离心管中,加入饱和氯化钠溶液(),在旋涡混合器上充分混合,放置,加入乙腈,用均质器以均质,离心。将上清液转移至浓缩瓶中。再用乙腈重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩约。将浓缩提取液转移至分液漏斗中,加入硫酸钠溶液()和正己烷,振摇,静置分层,将上清液通过无水硫酸钠柱脱水于浓缩瓶中。再用正己烷重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,
8、旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入正己烷溶解残渣待净化。蜂蜜称取试样约(精确到)于离心管中,加入水和丙酮(),在旋涡混合器上充分混合。然后加入氯化钠()和正己烷,在旋涡混合器上充分混合,离心。将上清液通过无水硫酸钠柱脱水于浓缩瓶中。再用正己烷重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入甲醇溶液()溶解残渣待净化。牛奶称取试样约(精确到)于离心管中,加入氯化钠和正己烷丙酮()溶液,在旋涡混合器上充分混合,离心。将上清液通过无水硫酸钠柱脱水于浓缩瓶中。再用正己烷重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入正己烷溶解残渣待净化。大葱称
9、取试样约(精确到)于离心管中,置于微波炉(中火)中处理,加入氯化钠和乙腈,用均质器以均质,离心,将上清液转移至预先加入磷酸盐缓冲溶液()的分液漏斗中。再用乙腈重复提取一次,合并提取液于同一分液漏斗中,加入正己烷,振摇,静置分层,将上清液通过无水硫酸钠柱脱水于浓缩瓶中。再用正己烷重复提取一次,合并提取液于同一浓缩瓶中,旋转浓缩至近干,再用氮气流吹干。加入正己烷溶解残渣待净化。净化玉米、大米、松籽仁、葵花籽仁、牛肝、鸡肾、鱼将上述样液全部转移到中性氧化铝固相萃取柱()中,控制流速在,弃去流出液。再自上而下将中性氧化铝固相萃取柱与氟罗里硅土固相萃取柱()串接,加入正己烷丙酮()溶液洗脱,控制流速在,
10、收集洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹干后,用正己烷溶解并定容,供气相色谱和气相色谱质谱仪测定。柑橘、苹果、菠菜、大葱将上述样液全部转移到石墨炭黑固相萃取柱()中,控制流速在,弃去流出液。再自上而下将石墨炭黑固相萃取柱与氟罗里硅土固相萃取柱串接,加入正己烷丙酮犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售()溶液洗脱,控制流速在,收集洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹干后,用正己烷溶解并定容,供气相色谱和气相色谱质谱仪测定。茶叶将上述样液全部转移到石墨炭黑固相萃取柱中,控制流速在,弃去流出液。再自上而下将石墨炭黑固相萃取柱与氟罗里硅土固相萃取柱串接,加入正己烷丙酮()溶液洗脱控制流速在,收集洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹干。
11、用甲醇溶液()溶解残渣转移到固相萃取柱()中,控制流速在,弃去流出液。加入甲醇溶液()溶液洗脱,控制流速在,收集洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹至约后,准确加入正己烷和硫酸钠水溶液,在旋涡混合器上充分混合,在下离心。取上清液供气相色谱和气相色谱质谱仪测定。蜂蜜将上述样液全部转移到固相萃取柱上,控制流速在,弃去流出液。加入甲醇溶液()溶液洗脱,控制流速在,收集洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹至约后,准确加入正己烷和硫酸钠水溶液,在旋涡混合器上充分混合,离心。取上清液供气相色谱和气相色谱质谱仪测定。牛奶将上述样液全部转移到氟罗里硅土固相萃取柱上,控制流速在,弃去流出液。加入正己烷丙酮()溶液洗脱,控制流速在,收集
12、洗脱液。洗脱液经氮吹仪吹干后,用正己烷溶解并定容,供气相色谱和气相色谱质谱仪测定。测定气相色谱条件)色谱柱:石英毛细管柱,(内径)或相当者;)色谱柱温度:初始温度保持,以升至,保持,再以升至,保持;)进样口温度:;)检测器()温度:;)载气:氮气,纯度大于,恒流模式,;)进样量:;)进样方式:无分流进样,后开阀。气相色谱质谱条件)色谱柱:石英毛细管柱,(内径)或相当者;)色谱柱温度:初始温度保持,以升至,保持,再以升至,保持;)进样口温度:;)色谱质谱接口温度:;)载气:氦气,纯度大于,恒流模式,;)进样量:;)进样方式:无分流进样,后开阀;)电离方式:负化学电离;)电离能量:;)离子源温度:
13、;)四极杆温度:;)反应气:甲烷,纯度大于;犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售)测定方式:选择离子监测方式;)选择监测离子():定量,定性、;)溶剂延迟:。气相色谱检测根据样液中被测物的含量情况,选定浓度与样液相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中稻瘟灵响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下,稻瘟灵的保留时间约为。标准品的色谱图参见附录中图。气相色谱质谱检测和确证根据样液中被测物的含量情况,选定浓度与样液相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中稻瘟灵响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述气相色谱质谱条
14、件下,样品中待测物质保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间的偏差在,且样品中被测物质的相对离子丰度与浓度相当标准工作溶液的相对离子丰度进行比较,相对丰度允许相对偏差不超过表规定的范围,则可确定样品中存在对应的被测物。在上述气相色谱质谱条件下,稻瘟灵的保留时间约为。稻瘟灵标准品的气相色谱质谱选择离子流图和全扫描质谱图参见附录中图和图。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差空白试验除不加试样外,均按上述步骤进行。结果计算和表达用,色谱数据处理机或按式()计算试样中稻瘟灵残留含量,计算结果需扣除空白值。犡犃犮犞犃犿()式中:犡试样中稻瘟灵残留量,单位为微克每千克();犃样液
15、中稻瘟灵的峰面积;犮标准工作液中稻瘟灵的浓度,单位为纳克每毫升();犞样液最终定容体积,单位为毫升();犃标准工作液中稻瘟灵的峰面积;犿最终样液所代表的试样质量,单位为克()。测定低限和回收率测定低限本方法气相色谱和气相色谱质谱的测定低限均为。回收率气相色谱法测定回收率样品的添加浓度及回收率的数据见表。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表样品的添加浓度及回收率的数据样品玉米大米松籽仁葵花籽仁柑橘苹果菠菜添加浓度()回收率样品大葱牛肝鸡肾鱼牛奶茶叶蜂蜜添加浓度()回收率气相色谱质谱法测定回收率样品的添加浓度及回收率的数据见表。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表样品的添加浓度及回收率
16、的数据样品玉米大米松籽仁葵花籽仁柑橘苹果菠菜添加浓度()回收率样品大葱牛肝鸡肾鱼牛奶茶叶蜂蜜添加浓度()回收率犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犃(资料性附录)稻瘟灵标准品气相色谱图图犃稻瘟灵标准品气相色谱图犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犅(资料性附录)稻瘟灵标准品选择离子流色谱图图犅稻瘟灵标准品选择离子流色谱图图犅稻瘟灵标准品全扫描质谱图犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃犪狀犱犪狀狀犲狓犅狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狀犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺
17、犪狉犵犲狅犳犖犪狋犻狅狀犪犾犚犲犵狌犾犪狋狅狉狔犆狅犿犿犻狊狊犻狅狀犳狅狉犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犎犲犻犾狅狀犵犼犻犪狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犪狀犱犖犲犻犿犲狀犵犵狌犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊犿犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犢犪狀犵犆犺犪狀犵狕犺犻,犓犪狀犵犙犻狀犵犺犲
18、,犠狌犢犪狀,犔犻犌犪狀犵,犔犻狌犢狅狀犵,犠犪狀犵犆犺狌犪狀狊狅狀犵,犠狌犔犪狀,犆犺犲狀犵犢犪狀犵犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲犖狅狋犲:犜犺犻狊犈狀犵犾犻狊犺犞犲狉狊犻狅狀,犪狋狉犪狀狊犾犪狋犻狅狀犳狉狅犿狋犺犲犆犺犻狀犲狊犲狋犲狓狋,犻狊狊狅犾犲犾狔犳狅狉犵狌犻犱犪狀犮犲犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犻狊狅狆狉狅狋犺犻狅犾犪狀犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪
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