SN T 2223-2008 进出口动物源性食品中流粘菌素残留量检测方法 液相色谱-质谱 质谱法.pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱质谱质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犔犆犕犛犕犛犿犲狋犺狅犱发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、大连工业大学。本标准主要起草人:孙兴权、林维宣、温志海、张
2、玉苍。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱质谱质谱法范围本标准规定了进出口动物组织中硫粘菌素残留量的液相色谱质谱质谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾中硫粘菌素残留量的检测和确证。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法。(,:,)方法提要试样
3、经乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,固相萃取小柱净化后,液相色谱质谱质谱法测定和确证,外标法定量。试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为规定的一级水。乙酸乙酯:色谱纯。正己烷:色谱纯。甲醇:色谱纯。乙腈:色谱纯。乙酸铵。乙酸铵:称取乙酸铵,加水溶解并定容至。硫粘菌素标准物质():,纯度大于等于。硫粘菌素标准储备溶液():称取适量的硫粘菌素标准物质(),用甲醇配成的标准储备液。储备液置于避光贮存。硫粘菌素标准工作溶液():吸取适量的硫粘菌素标准储备溶液(),用甲醇配成的标准工作溶液。标准工作溶液置于避光贮存。固相萃取小柱:柱,或相当者。微孔滤膜:,有机相。仪器和设备液相色谱串联四极杆质谱仪:配
4、有电喷雾离子源。分析天平:感量分别为和。绞肉机。涡旋混合器:。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售离心机:。旋转蒸发器。固相萃取装置。具塞离心管:聚四氟乙烯,和。试样制备与保存从所取动物肌肉、肝脏、肾脏全部样品组织中取出有代表性样品约,用绞肉机充分绞碎混匀均分成两份。制备好的试样置于样品瓶中,密封,并标明标记,于以下冷冻存放。试样制备与保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤提取称取试样(精确到)于离心管()中,加入乙酸乙酯(),涡旋混匀,离心,收集提取液至浓缩瓶中。残渣再加入乙酸乙酯,重复上述抽提操作。合并提取液,以下旋转浓缩至近干。用正己烷()和水依次将残渣转移至离
5、心管()中,涡旋混匀,离心,弃去上层正己烷溶液,再加入正己烷,重复上述脱脂操作,所得水层提取液待净化。净化分别用甲醇()和水各对固相萃取小柱()进行活化预处理,然后将测定步骤所得水层提取液转移至小柱上,控制流出速度小于。用水分次洗涤离心管,洗涤液淋洗小柱后弃去。用甲醇洗脱,收集全部洗脱液,加水定容至,混匀后过滤膜(),供液相色谱串联质谱测定。硫粘菌素基质校准标准溶液的配制称取七个基质空白样品(称样量为)于离心管()中,其中六个空白样品中分别加入适量硫粘菌素标准工作溶液(),按照样品操作步骤、同步操作,使最终样品溶液中硫粘菌素的浓度分别为、。所得系列硫粘菌素基质标准校准溶液即配即用,用以制作标准
6、曲线。测定液相色谱条件)色谱柱:,(内径),或相当者;)进样量:;)流速:;)流动相组成及梯度洗脱程序见表。表液相色谱梯度洗脱程序时间甲醇乙酸铵乙腈质谱条件)离子源:电喷雾离子源;犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售)扫描方式:正离子扫描;)检测方式:多反应监测;)雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气;使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求,质谱条件参见附录。液相色谱质谱质谱测定定性测定在相同试验条件下,样品中待测物质与同时检测的浓度相近的基质校准标准溶液具有相同的保留时间,并且所选择的离子相对丰度比相一致或在表规定的允许偏差范围内,则可判断样品中存在对应的被测物。在上述实验条件
7、下,硫粘菌素的保留时间约为,定性离子对()为;,定量离子对为,参考离子相对丰度比()分别为;,相应的谱图参见附录。表定性确证时离子相对丰度比的最大允许偏差相对离子丰度比允许的相对偏差定量测定在仪器最佳工作条件下,对硫粘菌素的基质校准标准溶液分别进样,以峰面积为纵坐标,系列基质校准标准溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。空白试验除不加试样外,均按上述步骤操作。结果计算按式()计算试样中硫粘菌素残留量:犡(犮犮)犞犿()式中:犡试样中硫粘菌素残留量,单位为微克每千克();犮从标准曲线中得到的被测组分溶液浓度,单位为纳克
8、每毫升();犮从标准曲线中得到的空白试验中被测组分的溶液浓度,单位为纳克每毫升();犞样品溶液最终定容体积,单位为毫升();犿最终样液所代表试样质量,单位为克()。测定低限和回收率测定低限本方法的测定低限为。回收率不同样品基质,不同添加浓度下的硫粘菌素回收率范围数据见表。表不同基质中不同硫粘菌素添加水平的回收率范围基质添加水平()回收率猪肉犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表(续)基质添加水平()回收率猪肝猪肾犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犃(资料性附录)质谱条件)质谱条件:)电喷雾电压():;)雾化气压力():();)气帘气压力():();)碰撞气压力():();)辅助气
9、流速():;)离子源温度():;)、均为单位分辨率();)硫粘菌素的定性离子对、定量离子对、采集时间、去簇电压()、入口电压()、碰撞能量()及碰撞室出口电压()等参数见表。表犃硫粘菌素的主要质谱参考条件参数化合物定性离子对()定量离子对()采集时间去簇电压()入口电压()碰撞能量()碰撞室出口电压()硫粘菌素)附录所列参数是在质谱仪上完成的,此处列出实验用仪器型号仅供参考,不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犅(资料性附录)犡犐犆和离子相对丰度比图谱)图犅硫粘菌素的提取离子流图(犡犐犆)以及离子相对丰度比图谱犛犖犜版权所有 禁止
10、翻制、电子传阅、发售犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃犪狀犱犃狀狀犲狓犅狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犲狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲犱狅犳犮犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犪犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犪犱犿犻狀犻狊狋犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犔犻犪狅狀犻狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪,犑犻犪狀犵狓犻犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀
11、狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犪狀犱犇犪犾犻犪狀犘狅犾狔狋犲犮犺狀犻犮犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱狉犪犳狋犲犱犫狔犛狌狀犡犻狀犵狇狌犪狀,犔犻狀犠犲犻狓狌犪狀,犠犲狀犣犺犻犺犪犻,犣犺犪狀犵犢狌犮犪狀犵犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狉犲狊犻
12、犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊狅犳犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犔犆犕犛犕犛犿犲狋犺狅犱犛犮狅狆犲犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狊犳狅狉犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犪狀犻犿犪犾犳狅狅犱犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犪狀犱狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犿狌狊犮犾犲,犾犻狏犲狉犪狀犱犽犻犱狀犲狔狅犳狆犻犵狊犪犿狆犾犲狊犚犲犳犲
13、狉犲狀犮犲犉狅狉狋犺犲犳犻犾犲狊狑犻狋犺犪狀犻狀犱犻犮犪狋犻狅狀狅犳犱犪狋犲,狋犺犲狊犲狇狌犲狀犮犲犾狔犿狅犱犻犳犻犲犱狏犲狉狊犻狅狀狊(犱犻狊犻狀犮犾狌犱犻狀犵狋犺犲犮狅狀狋犲狀狋狊狅犳犲狉狉犪狋犪)狅狉狉犲狏犻狊犲犱狏犲狉狊犻狅狀狊狅犳狋犺犲犿狑狅狌犾犱狀狅狋犫犲犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犎狅狑犲狏犲狉,犻狋犻狊犲狀犮狅狌狉犪犵犲犱犳狅狉狋犺狅狊犲犺犪狏犲狉犲犪犮犺犲犱犪狀犪犵狉犲犲犿犲狀狋犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狋狅狉犲狊犲犪狉犮犺狑犺犲狋犺犲狉狋狅狌狊犲狋犺犲犾犪狋犲狊狋狏犲狉狊犻狅狀狅犳狋犺犲狊犲犱狅犮狌犿犲狀狋狊犉狅狉狋犺犲犳犻犾犲狊狑犻
14、狋犺狅狌狋犪狀犻狀犱犻犮犪狋犻狅狀狅犳犱犪狋犲,狋犺犲犻狉犾犪狊狋犲狊狋狏犲狉狊犻狅狀狊狑狅狌犾犱犫犲犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犌犅犜犛狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱狋犲狊狋犿犲狋犺狅犱犳狅狉狑犪狋犲狉狌狊犲犱犻狀犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾犪犫(犌犅犜,犐犛犗:,犕犗犇)犘狉犻狀犮犻狆犾犲犜犻犪犿狌犾犻狀狉犲狊犻犱狌犲犻狊犲狓狋狉犪犮狋犲犱犳狉狅犿狋犺犲狊犪犿狆犾犲狑犻狋犺犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲犃狀犱狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狊犱犲犳犪狋狋犲犱狑犻狋犺狀犺犲狓犪狀犲犪狀犱犮犾犲犪狀犲犱狌狆狑犻狋犺犺狔犱狉狅狆犺犻犾犻犮犾犻狆狅狆犺犻犾犻犮犫犪犾犪狀犮犲(犎犔犅)狊狅犾犻犱狆犺犪
15、狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犮狅犾狌犿狀狊犲狇狌犲狀狋犾狔犉犻狀犪犾犾狔狋犺犲犪狀犪犾狔狋犲犻狊犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犲犱犫狔犺犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犪狀犱狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔,狌狊犻狀犵犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱,犪犾犾狋犺犲狉犲犪犵犲狀狋犻狊犪狀犪犾狔狊狋犻犮犵狉犪犱犲犪狀犱“狑犪狋犲狉”犻狊犱犲犻狅狀犻狕犲犱狑犪狋犲狉犈狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲犱:犎犘犔犆犵狉犪犱犲狀犎犲狓犪狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犕犲狋犺犪狀狅犾:犎犘犔
16、犆犵狉犪犱犲犛犖犜版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犃犿犿狅狀犻狌犿犪犮犲狋犪狋犲(犖犎犃犮)犖犎犃犮:犠犲犻犵犺犵犖犎犃犮犪狀犱犱犲狊狅犾狏犲犻狀犿犔狑犪狋犲狉犜犻犪犿狌犾犻狀(犆犎犖犗犛):犆犃犛犖狅:,狆狌狉犻狋狔犛狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀:犿犵犿犔犠犲犻犵犺犮犲狉狋犪犻狀犪犿狅狌狀狋狅犳狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱犪犮犮狌狉犪狋犲犾狔,犪狀犱犱犻狊狊狅犾狏犲犻狋狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅狆狉犲狆犪狉犲犪狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狑犺犻犮犺犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犻狊犿犵犿犔犜犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀犮狅狌犾犱犫犲犪狏犪犻犾犪犫犾犲
17、犻犳犻狋犻狊狊狋狅狉犲犱犪狋犻狀狉犲犳狉犻犵犲狉犪狋狅狉犪狏狅犻犱犻狀犵犾犻犵犺狋犠狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀:犵犿犔犆犲狉狋犪犻狀犪犿狅狌狀狋狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狑犪狊犱犻犾狌狋犲犱狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾犻狀狋狅犪犽犻狀犱狅犳狋犻犪犿狌犾犻狀狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀狑犺犻犮犺犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犻狊犵犿犔犜犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀犮狅狌犾犱犫犲犪狏犪犻犾犪犫犾犲犻犳犻狋犻狊狊狋狅狉犲犱犪狋犻狀狉犲犳狉犻犵犲狉犪狋狅狉犪狏狅犻犱犻狀犵犾犻犵犺狋犎犔犅犛犘犈犮狅犾狌犿狀:犿犵,犿犔狅狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋犉犻犾犿:犿,
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