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    GB T 17999.9-2008 SPF鸡.微生物学监测.第9部分 SPF鸡.试管凝集试验.pdf

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    GB T 17999.9-2008 SPF鸡.微生物学监测.第9部分 SPF鸡.试管凝集试验.pdf

    1、ICS 11220B 41 鳕目中华人民共和国国家标准GBT 1 799992008代替GBT 1799981999SPF鸡 微生物学监测第9部分:SPF鸡 试管凝集试验20081231发布SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 9:Tube agglutination test for SPF chicken2009050 1实施丰瞀粥紫瓣警矬瞥霎发布中国国家标准化管理委员会“刖 罱GBT 1799992008GBT 17999SPF鸡微生物学监测分为10个部分:第1部分:SPF鸡微生物学监测总则;第2部分:SPF鸡红细胞凝集抑制试验;第3

    2、部分:SPF鸡血清中和试验;第4部分:SPF鸡血清平板凝集试验;第5部分:SPF鸡琼脂扩散试验;第6部分:SPF鸡酶联免疫吸附试验;第7部分:SPF鸡胚敏感试验;第8部分:SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验;第9部分:SPF鸡试管凝集试验;第10部分:SPF鸡间接免疫荧光试验。本部分为GBT 17999的第9部分。本部分代替GBT 179998 1999(SPF鸡试管凝集试验。本部分与GBT 179998 1999相比主要变化如下:增加了附录A“试剂的配制”;修改了凝集试验结果的判定;删除了鸡伤寒沙门氏菌检测内容;在范围中进一步明确了本部分使用的情况。本部分的附录A为规范性附录。本部分由中华人民共和国

    3、农业部提出。本部分由全国动物防疫标准化技术委员会(SACTC 181)归口。本部分起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司。本部分主要起草人:曲连东、姜骞、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、盂庆文。本部分所代替标准的历次版本发布情况为:GBT 179998 1999。SPF鸡微生物学监测第9部分:SPF鸡试管凝集试验GBT 17999920081范围GBT 17999的本部分规定了试管凝集试验的技术要求。本部分适用于对SPF鸡进行鸡白痢沙门氏菌血清抗体检测。用血清平板凝集试验进行鸡白痢沙门氏菌的抗体检测,结果难以

    4、判断时,可采用本部分进行复检。2原理细菌性抗原与相应的抗体结合后,在适量电解质参与下,经过一段时间出现肉眼可见的凝集现象结果判定以凝集价表示。3试剂和器材31试剂鸡自痢抗原(含菌109CFU),标准阳性、阴性血清,被检血清,05石炭酸生理盐水(配制方法见附录A)。32器材试管(口径8 mm10 mm)。4操作程序41取5支试管,第1管加石炭酸生理盐水18 mL,其余各管加1 mL,第1管加被检血清02 mL,与石炭酸生理盐水混匀(1:10稀释),取1 mL移至第2管,连续倍比稀释至第4管,从第4管吸出1 mL弃去,各管血清最后稀释度依次为1:20,1:40,1:80,1:160,1:320。4

    5、2每管加入抗原液1 mL。43抗原对照:在试管中加抗原液1 mL,加05石炭酸生理盐水1 mL。44阳性血清对照:将阳性血清稀释至工作浓度(按说明使用)。在试管中加抗原液1 mL,加稀释的阳性血清1 mL。45阴性血清对照:同阳性血清稀释度使用。46试管振荡后,置37温箱中孵育,24 h后移人48冰箱过夜。47结果观察:抗原对照结果与阴性血清对照,均呈“一”,阳性血清对照呈不同程度凝集,表明试验成立。凝集结果判定见表1。凝集效价以呈现“+”凝集试管的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价。表1凝集试验结果判定类别 试管所见 结果 判定1 出现大的凝集块,上层液体完全透明 +2 出现明显凝集块,上层液透明度达75 + 阳性3 出现可见的凝集颗粒,上层液透明度达50 +4 出现轻微可见的凝集颗粒,上层液透明度达25 士 可疑5 无凝集块,液体均匀混浊 阴性GBT 17999920085结果判定51阳性:凝集效价1:80。52阴性:凝集效价1:20。53可疑:凝集效价一1:40;判为可疑的需要复检,复检仍为可疑的样品判为阳性。A1 05石炭酸生理盐水石炭酸:5 g;氯化钠:85 g;蒸馏水:1 000 mL;混合溶化,6897 Pa、20 min消毒备用。附录A(规范性附录)试剂的配制GBT 1799992008


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