1、 ICS 13.100 CCS C 60 DB 11 北京市地方标准 DB11/T 1930 2021 放射工作人员健康检查染色体畸变 和微核检测质量控制规范 质量控制规范 Quality control specification for tests of chromosome aberration and micronucleus in radiation workers health examinations 2021 - 12 - 28发布 2022 - 04 - 01实施 北京市市场监督管理局 发布 DB11/T 1930 2021 I 目次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规
2、范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 基本要求 . 1 5 实验室及仪器设备要求 . 3 6 染色体畸变检测质量控制 . 3 7 微核检测质量控制 . 7 附录 A （资料性） 人外周血淋巴细胞微核检测规程 . 8 附录 B （资料性） 人外周血淋巴细胞微核检测原始记录 . 10 附录 C （资料性） 人外周血淋巴细胞微核检测报告 . 12 DB11/T 1930 2021 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 本文件由北京市卫生健康委员会提出。 本文件由北京市卫生健康委员会 归口 。 本文件由北京市
3、卫生健康委员会 组织 实 施 。 本文件起草 单位 ：北京市 疾病预防 控制 中心 本文件 主 要起草人： 李煜、罗环、梁婧、杨梦迪、王如刚、赵芳红、房云、蔡 卫 红、李隆飞、赵金 萍、杨红艳、况海涛、于建平、高建华 。 DB11/T 1930 2021 1 放射工作人员健康检查染色体畸变和微核检测质量控制规范 1 范围 本文件规定 了放射 工作人员健康检 査中，开展 人外周血淋巴细胞染色体畸变检测和微核检测的基本 要求 、 实验室及仪器设备要求 以 及检测的质量控制。 本文件 适 用 于放射 工作人员健康检 査中 外周血淋巴细胞染色体畸变和微核检测的质量控制。 2 规范性引用文件 下列 文件
4、 中 的 内容通过 文 中 的规范性引用 而 构 成 本文件 必不可少 的 条款 。 其中，注日期 的引用文件 ， 仅该日期对应 的 版 本 适 用 于 本文件 ；不注日期 的引用文件 ，其最新版 本（ 包括所有 的 修改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 28236 染色体畸变 估算 生 物剂 量 方法 WS/T 187 淋巴细胞微核 估算受 照 剂 量 方法 GBZ 98 放射 工作人员健康要求及 监 护 规范 GBZ 112 职业 性 放射 性 疾病 诊断总 则 GBZ/T 248 放射 工作人员 职业 健康检 查 外周血淋巴细胞染色体畸变检测 与评价 3 术语和定义 WS/T 1
5、87界 定的 以 及 下列 术语和定义 适 用 于 本文件。 3.1 染色体畸变 chromosomal aberration 人员 或 细胞 受 到一 定 剂 量 电离辐 射 作用 后 ， 细胞 中 染色体 发 生的 数 量 或 结构 上 的 改 变。 3.2 微核细胞 micronucleus cell 胞质 中 含 有 微核的 双 核淋巴细胞。 4 基本要求 4.1 应建 立 实验室 院感 防 控制 度 、 医疗废弃 物 处理 制 度 、 手 卫生制 度等 。 4.2 应 每年参加职业 健康检 查 质量控制 机 构 组织开展 的实验室 间比 对 （ 包括 复 核） ， 独立完 成， 相关
6、 材 料 需 归 档保存 。 4.3 技术人员要求 4.3.1 遗传 实验室 应有 2名 以 上专业技 术人员 ， 专业技 术人员 应 能 及 时 准 确完 成 检测工作。 DB11/T 1930 2021 2 4.3.2 技术人员知识技能要求 4.3.2.1 技 术人员 应了 解 、 熟悉或掌握 的 理论知识 包括 但 不 限 于以下内容 ： a) 掌握 实验室基本 管理 条 例 和生 物 安全知识 ； b) 了 解或熟悉相关 法 律 、法 规 、 国家 及 行业 标准 ，包括 中华 人 民共 和 国职业 病防 治 法 、 职 业 健康检 查管理办 法 、 中华 人 民共 和 国 生 物 安
7、全 法 、 GB/T 28236、 职业 性 放射 性 疾 病 诊断总 则（ GBZ 112） 等 ， 掌握 放射 工作人员健康要求及 监 护 规范（ GBZ 98） 、 放 射 工作人员 职业 健康检 查 外周血淋巴细胞染色体畸变检测 与评价 （ GBZ/T 248） 、 WS/T 187 等 ； c) 熟悉电离辐 射 生 物 效 应 的基 础知识 、放射 工作人员健康检 查 内容； 掌握 外周血淋巴细胞染色体 畸变及微核检测的基本原 理 ， 明确 其 在辐 射 损伤评 估中 的作用 ；了 解电离辐 射 诱发 人淋巴细 胞染色体畸变的 剂 量 -效 应 曲线 建 立 和用 其估算 生 物剂
8、量的 方法 。 4.3.2.2 技 术人员 应 掌握 的 专业技能 包括 但 不 限 于以下内容 ： a) 样 本 接收 、 登 记 、 保存 程 序 ； b) 常 用 试 剂 的 配 制 方法； c) 生 物 安全 柜 、 超净 工作 台 、 显 微 镜 及 摄像装置 等 仪器设备的 正 确 使 用 与 维 护保 养 ； 配 备 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 的实验室 ，应 熟 练 掌握相关 软 件的 使 用 ； d) 细胞 培养 方法； e) 染色体和微核制 片 技 术 ； f) 染色体 阅片 应 掌握 性 别 识 别 、 核 型 分 析 、 染色体畸变和染色 单 体畸变的 识 别
9、， 使 用规范 符号 记 录染色体畸变 类型 ； 微核 阅片 应 掌握识 别 双 核淋巴细胞和微核 ； 显 微 摄影 技 术 ； 准 确 记录染 色体畸变细胞及微核细胞 坐 标 ； g) 准 确完 成 报告和 评价 。 4.3.3 技术人员的培训与考核 4.3.3.1 检 查机 构 需 对 接 受 培训 人员 进 行理论知识 及 专业技能 考 核 ， 染色体 、 微核制 片合格率 需 达 到 80%以 上 ， 染色体畸变和微核 识 别 准 确 率 需 达 到 90%以 上 ， 全 部 考 核 合格 后 方可 上 岗 。 4.3.3.2 每年 组织 一 次 实验室 内对 相关技 术 能 力 的
10、考 核 ， 进 行能 力 确 认 。 4.3.3.3 技 术人员 至 少 每 两 年参加一 次 职业 健康检 查 质量控制 机 构 组织 的实验室 间比 对 。 4.4 仪器设备的管理 4.4.1 实验室 主 要仪器 应建 立档 案 ， 并 有 标准 操 作程 序 。 4.4.2 实验室 主 要仪器 有 使 用及 维 护保 养 记录。 4.4.3 实验室仪器 或 设备按要求 每年 检定 或 校 准 ， 使 其 运 行 正常 。 4.5 标本片、电子图片、原始记录、报告和档案的管理 4.5.1 有 染色体和微核标本 片 、 原始记录 、 报告和 档 案 的 存 放 地点 ，有 专 门 的 电 子
11、 存 储 设备用 于 存 储 图片 。 4.5.2 标本 片 存 放期 限 为 2年 ， 原始记录和报告 存 放期 限 为 6年 ， 图片 等电 子 文件 存 放 15年 。 4.5.3 职业 健康检 查档 案 保存时间 应 当自 放射 工作人员 最 后一 次 职业 健康检 查 结 束之 日 起 不少于 15 年 。 DB11/T 1930 2021 3 5 实验室及仪器设备要求 5.1 实验室 5.1.1 制 片 室 面积宜大 于 20 m 2 ，应 配 备 排风装置 、 水 平 离 心 机 、 负压移液装置 或 真空吸液泵 、 水浴锅 等 设备 ， 宜选配 细胞 自动 收 获 仪 、 自动
12、 制 片 机 、 自动 染 片 机 、 自动 接 种 仪 等 。 5.1.2 细胞 培养 间 应 配置 生 物 安全 柜 或 超净 工作 台 、 恒温培养箱 、 冰箱 等 。 5.1.3 显 微 阅片 室 应 配置光学显 微 镜 及 摄像系统 ， 宜选配 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 。 5.2 仪器设备及技术指标要求 仪器设备及 技 术 指 标 符合表 1要求。 表 1 仪器设备及技术指标要求 仪器设备 技 术 指 标要求 必 备 /选配 生 物 安全 柜 或 超净 工作 台 超净 工作 台首选 双 人 双 面 、 垂 直送 风 必 备 恒温培养箱 应 选 择隔 水 式 恒温培养箱 ，
13、 二氧 化 碳 培养箱 更佳 必 备 离 心 机 应 选 择 可放 置 15 mL离 心 管 的 水 平 式 离 心 机 必 备 光学显 微 镜 自 带 电 源 和 坐 标 尺 ， 油 镜 清晰 （ 63倍 或 100倍 ） ， 配 备 高 分 辨 率 数 码 摄像装置 必 备 冰箱 4普 通 冰箱 和 -20低 温冰箱 必 备 电 子 天 平 可 读 性 1 mg 必 备 负压移液装置 或 真空吸液泵 / 必 备 排风装置 通 风 橱 、 排风 罩 等 ， 使 工作 场 所有 毒 物 质 浓 度 符合 工作 场 所有 害 因素 职业接 触 限 值 第 1部分：化 学 有 害因素 （ GBZ
14、2.1）要求 必 备 便携式 培养箱 温 度 可 控制 在 18-24 选配 灭菌 设备 电 热 箱 （ 有 空 气强 制 对 流 装置 ） 、 热 压 蒸汽灭菌 器 或 环 氧乙烷灭菌 器 等 选配 涡旋混 合 器 / 选配 水浴锅 （ 箱 ） / 选配 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 、 细胞 自动 收 获 仪 、 自动 制 片 机 、 自动 染 片 机 、 自动 接 种 仪 / 选配 6 染色体畸变检测质量控制 6.1 染色体畸变检测 染色体畸变检测 操 作 宜 参 照 放射 工作人员 职业 健康检 查 外周血淋巴细胞染色体畸变检测 与评 价 （ GBZ/T 248）的规定。 应 采
15、 用 培养 开 始 加 秋 水 仙素 的 方法 。 6.2 样 本的 采集 、 运输 和 保存 6.2.1 血 液 采集 应 在 所有放射 性检 查 之 前。 DB11/T 1930 2021 4 6.2.2 血 液运 输 和 保存 的 最 佳 温 度 为 18 24 。 样 本 采集 后 应 尽早 接 种 ， 当 日 无 法 接 种 的 样 本 保存 时间 不 宜超 过 72 h。 6.2.3 可 接 种 到含 植 物 凝集素 培养 基 后 于 4 20 保存 。 6.2.4 每 份 样 本 应有 唯 一 编 号 ， 编码 规则由 各 实验室制定。 6.3 培 养 基的质量控制 更换厂 家或
16、 批 次 的 培养 基 均 应对 至 少 两 个 血 液 样 本 进 行比 对 实验 ， 并 有 实验记录。 6.4 培 养过程 的质量控制 血 液 标本 应 在 37 培养箱 中 培养 48 h 52 h， 培养箱 内应放 置温 度 计 进 行 温 度 监 测。 中 老 年 人血 液 样 本 宜 接 种 多份 平 行样或 适 当 延长 培养 时间 。 6.5 染色体制片质量控制 6.5.1 合格中期 细胞的 选择 染色体 数 目 为 46 1； 染色体分 散良好 ， 长短粗 细 适中， 背景干 净 ， 各 条 染色体 可 清楚辨 认 。 见示 例 图 1、 图 2和 图 3（ 1000 ）。
17、 图 1 正常 染色体 图 2 双着丝粒 体和 无着丝粒断 片 图 3 着丝粒环 和 无着丝粒断 片 6.5.2 出 现 以下 情 况 的 中期 细胞 不 宜 作 计 数 分 析 ： a) 染色体 数 目 少于 45或 多 于 47条； b) 在 同 一 细胞 内 染色体 过于 分 散 ，不 能在一 个油 镜 视野 内 观察 到 ； c) 染色体 形态 过 度 细 长 或 过 度 短粗 ； d) 染色体 呈扭 曲 状 或 紧缩 成 团 ； e) 染色体分 散 不 良 ， 重叠太 多 ； f) 染色 太深 不 能 鉴 别 染色 单 体 交叉重叠 ； g) 同 一 条 染色体的 两 条 染色 单
18、体 间 距 离 过 大 。 6.5.3 染色体制 片 每样 本 能 检出 不少于 200个 合格 中期 分 裂 细胞。 6.6 阅 片的质量控制 6.6.1 染色体畸变的 表 示 符号 应 符合 以下 要求： a) 畸变 类型 及 表 示 符号 应 符合表 2要求 ； DB11/T 1930 2021 5 b) 若 细胞 中 出 现 不 同 数 目 的 双 着丝粒 体 、 着丝粒 环、 三着丝粒 体 以 及 无 着丝粒 体 ， 表 示 符号 应 符 合表 3要求。 表 2 染色体畸变 类型 及表 示符号 符号 染色体畸变 符号 染色 单 体畸变 含 义 含义 dic 双 着丝粒 体 ctb 单
19、 体 断 裂 tri 三着丝粒 体 ctg 单 体 裂隙 r 着丝粒 环 ctd 单 体 缺失 ace 无 着丝粒 体 cte 单 体 互 换 ar 无 着丝粒 环 tr 三 射 体 f 无 着丝粒 断 片 qr 四 射 体 min 微 小 体 t 相 互易 位 inv 倒 位 del 缺失 csb 染色体 断 裂 csg 染色体 裂隙 rogue cell 恶棍 细胞 rob 罗 伯逊易 位 表 3 细胞染色体畸变及表 示 方 法 细胞染色体畸变 表 示 方法 1个 dic/r 和 1个 ace dic(1)/r(1) 1个 dic/r ， 无 ace dic(0)/r(0) 2个 dic/
20、r 和 1个 ace dic(1)+dic(0)/r(1)+r(0) 2个 dic/r 和 3个 ace 2dic(1)+ace/2r(1)+ace 1个 dic， 1个 r， 1个 ace dic(1)+r(0)/dic(0)+r(1) 1个 tri， 2个 ace tri(2) 6.6.2 拍 摄 及原始记录 应 符合 以下 要求： a) 人工 阅片 的实验室 需 对 畸变细胞 拍 照 ， 并 在 原始记录和 图片 文件 名 中 标 明 显 微 镜 编 号 、 样 本 编 号 、 畸变细胞 坐 标 、 畸变 类型 和 数 目 ； b) 有 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 的实验室 需
21、要 在 原始记录 上 记录 显 微 镜 编 号 、 样 本 编 号 、 畸变细 胞 号 、 畸变 类型 和 数 目 ，对 畸变细胞标 注 后保存 ， 并 需保存 所有 样 本 高 倍 中期 细胞 图片 ； c) 一 个 细胞的 所有 染色体 应 在一 张 图片 内， 完 整 展 现 一 个 细胞的染色体 全 貌 。 6.6.3 阅片 的 数 量 应 符合 以下 要求： a) 对于 人工 阅片 的实验室 ， 每 人 每 天 分 析 1 4个 样 本 为宜 ； b) 具 备 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 的实验室 每 天 阅片 数 量 不 设 限 制 ； c) 在 仪器 使 用记录 上 应
22、记录 每 天 阅片 数 量 并 签字 。 6.6.4 如 全 自动 染色体 扫描 分 析系统 拍 摄 到双 着丝粒 体 或 者着丝粒 环 等 畸变 ，应该 将此 分 裂 相 再 次 放 到 显 微 镜 下 并 调整 微 调 旋 钮 进 行 人工 镜 检 ， 仔 细 辨 认 予 以 鉴 定 ， 并 通过 核 型 分 析软 件 确 认 。 如 果 使 用 双DB11/T 1930 2021 6 着丝粒 自动扫描 分 析系统 识 别 双 着丝粒 体 ， 仍 需 经 人工分 析 判 定 ，不应仅通过 软 件 识 别 。 6.6.5 如 果 在 分 析 100个 中期 分 裂 细胞 中 发 现 有 双
23、着丝粒 体 、 着丝粒 环、 稳 定性染色体畸变 或 3个 及 以 上 无 着丝粒 体 ， 宜 另 外 追 加 分 析 100个 细胞 ， 并 计 算 此 200个 细胞的染色体畸变 率进 行 结 果 评价 ， 或 通 知 受 检 者 复查 。 6.6.6 染色体畸变 应 由 两 名 以 上技 术人员 复 核 确 认 。 6.6.7 原始记录的 格 式 宜 参 照 放射 工作人员 职业 健康检 查 外周血淋巴细胞染色体畸变检测 与评价 （ GBZ/T 248）。 6.6.8 对 本 年度 拍 摄 的体检染色体 图片 抽 检 ， 识 别 准 确 率 应 达 到 90%以 上 。 6.7 报告的质
24、量控制 6.7.1 报告的 格 式 宜 参 照 放射 工作人员 职业 健康检 查 外周血淋巴细胞染色体畸变检测 与评价 （ GBZ/T 248）。 6.7.2 检测结 果异 常 者 应 附标 注 的畸变 图像 。 6.7.3 报告 采 取 分 析 人 、 复 核人 双 人 签字 。 6.7.4 应 在 体检结 束之 日 起 25个 工作 日内 出 具 报告。 7 微核检测质量控制 7.1 微核检测 应 采 用胞质分 裂阻滞 法 （ CB微核 法 ） 进 行 微核检测 ， 操 作规程 宜 参 照 WS/T 187和附录 A 。 7.2 样 本的 采集 、 运输 和 保存 、培 养 基的质量控制
25、7.2.1 样 本的 采集 、 运 输 和 保存 应 符合 6.2.1和 6.2.2的要求。 7.2.2 培养 基的质量控制 应 符合 6.3的要求。 7.3 试剂松 胞 素 -B的质量控制 松 胞 素 -B 配 制 、 保存 和 加 入 培养 体 系 时 均 需 避 光 。 如 更换 试 剂 厂 家 应对 至 少 两 个 血 液 样 本 进 行比 对 实验 ， 并 有 实验记录。 7.4 微核制片质量控制 7.4.1 双 核淋巴细胞的 判 断 应 符合 以下 要求： a) 双 核淋巴细胞胞 浆 完 整 ； b) 胞 浆 和胞核 能明确 区 分 ； c) 一 个 双 核淋巴细胞胞 浆 与 邻近
26、 细胞的胞 浆 界限 清楚 ； d) 位于 一 个 细胞质 内、 互 相 不 连 接 的 两 个 独立 的核 ，如 果 有 一 个 或 多个 核质 桥连 接 ， 桥 不 宽 于 主 核的 1/4； e) 两 个 核的 大 小 接 近 ， 色 度 深浅 相 同 ； f) 两 个 核 不 重叠 ，如 果重叠 必 须 能识 别 各 自 的 边缘 。 7.4.2 微核制 片 每样 本 能 检出 不少于 1000个 合格 双 核淋巴细胞。 7.5 阅 片的质量控制 DB11/T 1930 2021 7 7.5.1 微核的 判 断 标准： 见示 例 图 4、 图 5和 图 6（ 400 ）。 a) 微核
27、直 径 为 主 核 直 径 的 1/16到 1/3； b) 微核 呈圆形 或 椭圆形 ， 结构 与 主 核 相 同 ； c) 微核 与 主 核 不 连 接 ，如有 重叠 或相 切 ，必 须 能 看 到 各 自 的 边缘 ； d) 微核染色 与 主 核 一 致 或 略浅 ； e) 微核 不 折 光 ， 与 染料 颗粒 等 人工 产 物 相 区 别 。 图 4 正常双 核 淋巴 细胞 图 5 1个 细胞 含 1个 微核 图 6 1个 细胞 含 3个 微核 7.5.2 拍 摄 及原始记录 应 符合 以下 要求： a) 人工 阅片 的实验室 需 对 微核细胞 拍 照 ， 并 在 原始记录 上 记录 显
28、 微 镜 编 号 、 样 本 编 号 、 微核细胞 坐 标 ； b) 使 用微核 自动扫描 分 析系统 的实验室 需 要 在 原始记录 上 记录 显 微 镜 编 号 、 样 本 编 号 、 微核细胞 号 ， 并 需保存 所有 样 本 双 核淋巴细胞 图片 。 7.5.3 阅片 的 数 量 应 符合 以下 要求： a) 对于 人工 阅片 的实验室 ， 每 人 每 天 分 析 不 宜超 过 20个 样 本 ； b) 具 备微核 自动扫描 分 析系统 的实验室 每 天 阅片 数 量 不 设 限 制 ； c) 在 仪器 使 用记录 上 应 记录 每 天 阅片 数 量 并 签字 。 7.5.4 使 用微
29、核 自动扫描 分 析系统 的实验室 需 对 双 核淋巴细胞和微核 图像 人工分 析 判 定 ，不应仅通过 软 件 识 别 。 7.5.5 原始记录的 格 式 宜 参 照附录 B。 7.5.6 对 本 年度 拍 摄 的体检微核细胞 图片 抽 检 ， 识 别 准 确 率 应 达 到 90%以 上 。 7.6 报告的质量控制 7.6.1 报告的 格 式 宜 参 照附录 C。 7.6.2 报告 采 取 分 析 人 、 审 核人 双 人 签字 。 7.6.3 应 在 体检结 束之 日 起 25个 工作 日内 出 具 报告。 DB11/T 1930 2021 8 附 录 A （资料 性 ） 人 外周血淋巴
30、 细胞微核检测规 程 A.1 微核检测 试剂 准备 A.1.1 松 胞 素 -B的 配 制 A.1.1.1 将 5 mg松 胞 素 -B溶 于 2.5 mL二 甲 基 亚砜 （ DMSO） 中， 配 成 终 浓 度 2 g/L的 储 存 液 ， -20 避 光 冻 存 。 A.1.1.2 用 时 将 储 存 液 融 化 ， 吸 取 0.3 mL， 加 入 1.7 mL生 理 盐 水 中， 即 为 终 浓 度 300 mg/L的工作 液 。 A.1.1.3 配 制 过 程 需 避 光 。 A.1.2 低渗液氯化钾（ KCl） 的 配 制 称 取 氯 化 钾 5.59 g， 加 入 去 离 子水使
31、 其 充 分 溶 解 ， 定 容 到 1000 mL， 配 成 0.075 mol/L 氯 化 钾 溶 液 ， 常温 保存 备用。 A.1.3 固 定 液 的 配 制 取甲 醇 、 冰 乙 酸 ， 配 成 体 积 比 3:1的 固 定 液 。 固 定 液 需在 用前 新 鲜 配 制。 A.2 全血 培 养 A.2.1 外周静脉血采集 体检 时 静脉 血的 采集 应 在 所有放射 性检 查 前 进 行 。用 肝 素 抗 凝采 血 管 采集 受 检 者 静脉 血 约 2 mL。 A.2.2 全血 培 养步骤 A.2.2.1 在 培养 瓶 或离 心 管上 编 号并 注 明 培养 开 始 时间 和 日
32、期 。 将 采集 的 静脉 血 0.3 mL 0.5 mL加 入 到含 5 mL RPMI-1640培养液 中， 轻轻摇匀 ， 37 0.5 恒温培养箱 内 培养 。 A.2.2.2 培养 40 h 44 h后 ， 加 入松 胞 素 -B 至 终 浓 度 6 mg/L， 继续 培养 到 66 h 72 h。 A.3 微核标本制备 A.3.1 低渗 将 培养 后 细胞 于 离 心 管 以 1000 r/min 1500 r/min (约 200 g 250 g)离 心 8 min 10 min后 ， 取 出 离 心 管 ， 用 吸 管 轻轻 吸 去 上 清 液 ， 每管加 入 8 mL经 37
33、预 温 的 0.075 mol/L KCl， 将 细胞 团 块轻轻吹打 混 匀 。 A.3.2 预固 定 DB11/T 1930 2021 9 低 渗 完 毕 ， 立 即 每管加 入 1 mL新 配 制的 固 定 液 ， 用 吸 管 吹打 混 匀 ，以 1000 r/min 1500 r/min(约 200 g 250 g)离 心 8 min 10 min。 A.3.3 第一 次 固 定 取 出 离 心 管 ， 用 吸 管 吸 去 上 清 液 ， 每管 中 加 入 8 mL固 定 液 ， 用 吸 管 快速吹打 细胞 团 块 并 充 分 吹打 混 匀 ， 常温 下 固 定 20 min 30 m
34、in，以 1000 r/min 1500 r/min(约 200 250 g)离 心 8 min 10 min。 A.3.4 第二 次 固 定 取 出 离 心 管 ， 重 复 第 一 次 固 定的 操 作。 A.3.5 制片 取 出 离 心 管 ， 吸 去 上 清 液 ， 根据 细胞 团 块 的 大 小 每离 心 管 中 留 3滴 5滴固 定 液 以 调 节 细胞 浓 度 ， 混 匀 。 然 后 将 细胞 悬 液 滴 到 4 冰箱 预 冷 的 洁 净 载玻 片 上 ， 室 温空 气 自 然 干 燥 。 A.3.6 编号 对 每一 张 微核标本 片进 行 编 号 ， 并 按照 编 号 做 好 记
35、录。 A.3.7 染色 在 pH6.8的 磷酸缓冲 液配 制的 10%吉姆萨 （ Giemsa)染 液 中 染色 8 min 10 min，以 一 定 倾角 （ 约 45 )用 自 来 水 轻轻冲洗 ， 洗掉 染 液 后 置 于 玻 片 架 上 室 温 下 自 然晾 干 。 A.4 阅 片 在 显 微 镜 （ 400 ） 下 阅片 ， 根据 7.4.1和 7.5.1选 择 双 核淋巴细胞和微核 进 行 分 析 。 对 微核细胞 拍 照 ， 并 将 坐 标记 到 原始记录 上 。 共 分 析 1000个 双 核淋巴细胞。 A.5 检测 结果评价 计 算 微核 率 ， 按本实验室 正常 值 范围
36、进 行评价 。 DB11/T 1930 2021 10 附 录 B （资料 性 ） 人 外周血淋巴 细胞微核检测原始记录 XXXXX（体检机构名称） XXXXX 人淋巴细胞微核检测原始记录 第 页 共 页 样 品 名 称 肝 素 抗 凝 血 收样 日期 检验 项 目 外周血淋巴细胞微核检测 (CB微核 法 ) 检验 编 号 检验 日期 环 境 条 件 % RH 科 室 名 称 仪器 状态 仪器 型号 及 编 号 : 显 微 镜 : 离 心 机 : 培养箱 : 检验 依据 实验 过 程： 分 析 人： 复 核人： 年 月 日 年 月 日 第 页 共 页 DB11/T 1930 2021 11 表
37、 B.1 外周血淋巴 细胞微核检测记录表 分 析 双 核淋巴细胞 数 ： 个 /人 检验 编 号 微核细胞 坐 标 位 置 （ X /Y） 微核细胞 率 ( ) 微核 率 （ ） 阅片 日期 分 析 人： 复 核人： 年 月 日 年 月 日 DB11/T 1930 2021 12 附 录 C （资料 性 ） 人 外周血淋巴 细胞微核检测报告 XXXXX（体检机构名称） XXXXX 人淋巴细胞微核检测报告 姓 名 性 别 年 龄 岁 职业 照 射 种类 工 龄 年 检测 方法 ： CB微核 法 分 析 双 核淋巴细胞 数 : 项 目 结果 参考值 计量 单位 淋巴细胞微核 率 结果评价 ： 检测 日期 ： 年 月 日 报告 日期 ： 年 月 日 分 析 人： 年 月 日 复 核人： 年 月 日
