1、以正式出版文本为准 I C S 6 7 . 0 4 0 C C S X 0 4 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1 出 口 茶 叶 中 氯 噻 啉 残 留 量 的 测 定 液 相 色 谱 - 质 谱 / 质 谱 法 D e t e r m i n a t i o n o f i m i d a c l o t h i z r e s i d u e i n t e a f o r e x p o r t H P L C - M S / M S m e t h o d 2 0 2 1 - 1 1 - 2 2 发
2、布 2 0 2 2 - 0 6 - 0 1 实 施 中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准 前 言 本 文 件 按 照 GB / T 1. 1 2020 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分: 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 给 出 的 规 则 起 草。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责 任。 本 文 件 由 中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 提 出 并 归 口。 本 文 件 起 草 单 位: 中 华
3、 人 民 共 和 国 杭 州 海 关 技 术 中 心、 浙 江 省 检 验 检 疫 科 学 技 术 研 究 院、 中 华 人 民 共 和 国 合 肥 海 关 技 术 中 心。 本 文 件 主 要 起 草 人: 楼 成 杰、 黄 超 群、 崔 晓 美、 蒋 沁 婷、 吴 娟、 欧 阳 械 华、 严 颖 鹏、 李 翼、 宋 伟。 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准以正式出版文本为准 出 口 茶 叶 中 氯 噻 啉 残 留 量 的 测 定 液 相 色 谱 - 质 谱 / 质 谱 法 1 范 围 本 文 件 规 定 了 出 口 茶 叶 中 氯 噻 啉 残 留 量 的 液
4、相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱 测 定 方 法。 本 文 件 适 用 于 绿 茶、 红 茶、 普 洱 茶、 乌 龙 茶 中 氯 噻 啉 残 留 量 的 定 量 测 定 和 确 证。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。 其 中, 注 日 期 的 引 用 文 件, 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件; 不 注 日 期 的 引 用 文 件, 其 最 新 版 本( 包 括 所 有 的 修 改 单) 适 用 于 本 文 件。 GB / T 6682 分 析
5、实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法 3 术 语 和 定 义 本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义。 4 方 法 提 要 试 样 复 水 后 用 乙 腈 提 取, 经 固 相 萃 取 柱 净 化, 用 液 相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱 仪 测 定, 外 标 法 定 量。 5 试 剂 和 材 料 除 特 殊 注 明 外, 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯, 水 为 GB / T 6682 规 定 的 一 级 水。 5. 1 乙 腈: 色 谱 纯。 5. 2 甲 苯: 色 谱 纯。 5. 3 甲 醇: 色 谱 纯。 5. 4 乙 酸 铵: 色 谱 纯。 5.
6、5 甲 酸: 色 谱 纯。 5. 6 氯 化 钠。 5. 7 乙 酸 铵 - 甲 酸 混 合 溶 液: 称 取 0. 385 g 乙 酸 铵, 用 适 量 水 溶 解 后 加 入 1 mL 甲 酸, 用 水 定 容 至 1 L , 混 匀。 5. 8 乙 腈 - 甲 苯 混 合 溶 液( 3+1 , v / v ): 移 取 75 mL 乙 腈 和 25 mL 甲 苯, 混 合 均 匀。 5. 9 标 准 物 质: 氯 噻 啉, C 7H8ClN5O2S , CAS 号 105843 - 36 - 5 。 5. 1 0 标 准 储 备 溶 液: 准 确 称 取 10 mg ( 精 确 至 0.
7、 1 mg ) 标 准 物 质 用 乙 腈 溶 解 并 定 容 于 50 mL 容 量 瓶 中, 配 制 成 溶 液 浓 度 为 200 g / mL 的 标 准 储 备 液, 于 0 4 保 存, 有 效 期 6 个 月。 5. 1 1 标 准 中 间 液: 准 确 移 取 标 准 储 备 溶 液 0. 50 mL , 用 甲 醇 稀 释 并 定 容 至 10 mL , 配 制 成 溶 液 浓 度 为 10 g / mL 的 标 准 中 间 液。 准 确 移 取 10 g / mL 的 标 准 中 间 液 1. 0 mL , 用 甲 醇 稀 释 并 定 容 至 10 mL , 配 1 S N
8、 / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准 制 成 溶 液 浓 度 为 1. 0 g / mL 的 标 准 中 间 液, 于 0 4 储 存, 有 效 期 3 个 月。 5. 1 2 标 准 工 作 溶 液: 用 标 准 中 间 液 配 制 成 溶 液 浓 度 为 1. 0 ng / mL 、 2. 0 ng / mL 、 5. 0 ng / mL 、 10 ng / mL 和 50 ng / mL 的 标 准 工 作 液, 于 0 4 储 存, 有 效 期 3 个 月。 5. 1 3 基 质 混 合 标 准 工 作 溶 液: 取 适 量 经 7. 1 和 7. 2 步 骤 处
9、 理 的 空 白 样 品 基 质 溶 液 于 进 样 瓶 中, 用 氮 气 缓 缓 吹 至 近 干, 加 入 等 体 积 的 标 准 工 作 溶 液 溶 解 混 匀, 用 于 做 标 准 工 作 曲 线。 现 用 现 配。 5. 1 4 石 墨 化 炭 黑/ 氨 基 固 相 萃 取 柱( Ca rb / NH2 柱): 500 mg / 500 mg , 6 mL ( 或 相 当 者), 使 用 前 用 5 mL 乙 腈 - 甲 苯 混 合 溶 液( 4. 8 ) 活 化。 5. 1 5 微 孔 滤 膜: 0. 22 m , 有 机 相。 6 仪 器 和 设 备 6. 1 液 相 色 谱 -
10、质 谱/ 质 谱 仪, 配 有 电 喷 雾 离 子 源。 6. 2 分 析 天 平: 感 量 0. 000 1 g 和 0. 01 g 。 6. 3 涡 旋 混 合 器。 6. 4 均 质 机。 6. 5 台 式 离 心 机: 转 速 不 低 于 4 000 r / mi n 。 6. 6 旋 转 蒸 发 仪。 6. 7 固 相 萃 取 仪。 6. 8 移 液 枪: 1 mL 。 7 试 样 制 备 与 保 存 7. 1 试 样 的 制 备 取 代 表 性 样 品 约 500 g , 用 粉 碎 机 粉 碎 并 通 过 40 目 标 准 筛, 混 匀, 装 入 洁 净 的 盛 样 容 器 中,
11、 密 封 并 标 明 标 记。 在 制 样 的 操 作 过 程 中, 应 防 止 样 品 受 到 污 染 或 发 生 残 留 物 含 量 的 变 化。 7. 2 试 样 的 保 存 试 样 于 室 温 下 保 存。 8 测 定 步 骤 8. 1 提 取 称 取 试 样 2 g ( 精 确 至 0. 01 g ), 置 于 50 mL 塑 料 离 心 管 中, 加 入 10 mL 水, 浸 泡 至 少 30 mi n , 再 加 入 20 mL 乙 腈, 高 速 均 质 提 取 1 mi n , 加 入 3. 5 g 氯 化 钠, 涡 旋 混 匀 30 秒, 以 4 000 r / mi n 离
12、 心 4 mi n , 上 清 液 待 净 化。 8. 2 净 化 将 2. 0 mL 上 清 液 转 移 至 已 活 化 的 固 相 萃 取 柱( 5. 14 ) 内, 接 收 流 出 液, 再 用 8. 0 mL 乙 腈 - 甲 苯 混 合 溶 液( 5. 8 ) 洗 脱, 收 集 全 部 洗 脱 液, 45 水 浴 减 压 浓 缩 至 近 干, 加 入 2. 0 mL 甲 醇 溶 解, 经 微 孔 滤 膜 过 滤, 供 液 相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱 仪 测 定。 2 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准 8. 3 测 定 8. 3. 1 液 相 色 谱
13、 - 质 谱 / 质 谱 条 件 液 相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱 参 考 条 件 列 出 如 下: a ) 色 谱 柱: C 18 , 150 mm4. 6 mm ( 内 径), 5 m , 或 相 当 者; b ) 流 动 相: 乙 酸 铵 - 甲 酸 混 合 溶 液( 5. 7 ) 和 乙 腈, 梯 度 洗 脱 程 序 参 见 表 1 ; c ) 柱 温: 30 ; d ) 流 速: 0. 80 mL / mi n ; e ) 进 样 量: 10 L ; f ) 离 子 源: 电 喷 雾 离 子 源; g ) 扫 描 方 式: 正 离 子 扫 描; h ) 监 测 方 式: 多 反
14、应 监 测; i ) 监 测 离 子 对 参 见 附 录 A 中 表 A. 1 。 表 1 梯 度 洗 脱 程 序 时 间/ mi n 乙 酸 铵 - 甲 酸 混 合 溶 液/ % 乙 腈/ % 0. 00 80 20 1. 00 80 20 4. 00 20 80 6. 00 20 80 7. 00 5 95 10. 00 5 95 12. 00 80 20 14. 00 80 20 8. 3. 2 定 性 测 定 按 照 上 述 仪 器 条 件 测 定 样 液 和 标 准 工 作 溶 液, 如 果 定 性 离 子 均 出 现, 且 信 噪 比 大 于 等 于 3 , 且 样 液 与 标 准
15、 工 作 液 中 待 测 物 质 色 谱 峰 相 对 保 留 时 间 偏 差 在 2. 5% 范 围 内, 定 性 离 子 对 的 相 对 丰 度 与 浓 度 相 当 的 标 准 工 作 溶 液 的 相 对 丰 度 一 致, 相 对 丰 度 允 许 误 差 不 超 过 表 2 规 定 的 范 围, 则 可 判 断 样 品 中 存 在 相 应 的 被 测 物。 表 2 相 对 离 子 丰 度 最 大 容 许 误 差 相 对 离 子 丰 度( 基 峰) % 50 2050 1020 10 最 大 容 许 误 差 % 20 25 30 50 8. 3. 3 定 量 测 定 按 7. 3. 1 仪 器
16、 条 件 测 定 基 质 混 合 标 准 工 作 溶 液 和 样 液, 以 外 标 曲 线 法 计 算 样 液 中 的 氯 噻 啉 含 量。 3 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准 如 果 样 液 中 氯 噻 啉 的 含 量 超 出 标 准 曲 线 范 围, 用 甲 醇 稀 释 后 再 进 行 分 析, 同 时 应 考 虑 样 品 的 基 质 效 应, 做 好 基 质 混 合 标 准 工 作 溶 液 再 定 量, 对 使 用 本 方 法 前 处 理 净 化 后 稀 释 100 倍 及 以 上 的 样 品, 已 不 存 在 显 著 的 基 质 效 应, 可 直 接
17、用 标 准 工 作 溶 液 定 量。 在 上 述 条 件 下, 氯 噻 啉 的 参 考 保 留 时 间 约 为 4. 52 mi n 。 标 准 溶 液 多 反 应 监 测 色 谱 图 参 见 附 录 B 中 图 B. 1 。 8. 4 空 白 试 验 除 不 加 试 样 外, 均 按 上 述 操 作 步 骤 进 行。 9 结 果 计 算 和 表 述 用 色 谱 数 据 处 理 机 或 按 公 式( 1 ) 计 算 试 样 中 氯 噻 啉 的 含 量: X = c V 1 000 m R 1 000 ( 1 ) 式 中: X 试 样 中 氯 噻 啉 的 含 量, 单 位 为 毫 克 每 千 克
18、( mg / kg ); c 从 标 准 曲 线 上 得 到 的 样 液 中 氯 噻 啉 的 浓 度, 单 位 为 微 克 每 毫 升( g / mL ); V 样 液 最 终 定 容 体 积, 单 位 为 毫 升( mL ); m 样 品 称 样 量, 单 位 为 克( g ); R 样 品 分 取 比 例; 计 算 结 果 应 扣 除 空 白 值, 保 留 两 位 有 效 数 字。 1 0 定 量 限 本 方 法 对 于 绿 茶、 红 茶、 普 洱 茶、 乌 龙 茶 中 氯 噻 啉 的 定 量 限 均 为 0. 01 mg / kg 。 1 1 回 收 率 和 精 密 度 本 方 法 回
19、收 率 和 精 密 度 试 验 数 据 见 表 3 。 表 3 回 收 率 和 精 密 度 试 验 数 据( n = 6 ) 添 加 水 平 mg / kg 绿 茶 红 茶 普 洱 茶 乌 龙 茶 回 收 率 范 围 ( % ) 精 密 度 ( % ) 回 收 率 范 围 ( % ) 精 密 度 ( % ) 回 收 率 范 围 ( % ) 精 密 度 ( % ) 回 收 率 范 围 ( % ) 精 密 度 ( % ) 0. 01 98. 8108 3. 0 91. 5108 6. 2 84. 793. 7 4. 5 76. 286. 1 4. 2 0. 02 95. 5104 3. 7 92.
20、 596. 5 1. 6 86. 095. 0 3. 7 81. 586. 5 2. 1 0. 10 99. 7106 2. 5 90. 296. 6 2. 6 93. 699. 7 2. 4 87. 994. 4 2. 3 3. 0 93. 396. 0 1. 2 90. 092. 7 1. 1 90. 797. 3 2. 3 97. 099. 3 1. 0 4 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准 附 录 A ( 资 料 性) 仪 器 参 数 与 监 测 离 子 1) A. 1 仪 器 参 数 与 监 测 离 子 参 考 条 件 列 出 如 下: a ) 电 喷
21、 雾 电 压: 4 500 V ; b ) 离 子 源 温 度: 650 ; c ) 雾 化 气 压 力: 0. 34 MPa ; d ) 辅 助 气 压 力: 0. 38 MPa ; e ) 气 帘 气 压 力: 0. 24 MPa ; f ) 碰 撞 气 压 力: 中 等; g ) 雾 化 气 和 辅 助 气 均 为 零 级 空 气; 气 帘 气 和 碰 撞 气 为 高 纯 氮 气; 使 用 前 应 调 节 各 参 数 使 质 谱 灵 敏 度 达 到 检 测 要 求; h ) 监 测 离 子 对 信 息、 碰 撞 能 量 等 参 数 参 见 表 A. 1 。 表 A. 1 多 反 应 监
22、测 条 件 化 合 物 母 离 子 m / z 子 离 子 m / z 碰 撞 能 量( CE ) V 去 簇 电 压( DP ) V 碰 撞 室 出 口 电 压( CXP ) V 氯 噻 啉 262 181 * 20 122 40 120 14 15 注: 带“ * ” 离 子 为 定 量 离 子。 1 ) 非 商 业 性 声 明: 附 录 A 所 列 参 考 质 谱 条 件 是 在 AB 5500QTAP 液 质 联 用 仪 上 完 成, 此 处 列 出 试 验 用 仪 器 型 号 仅 是 为 了 提 供 参 考, 并 不 涉 及 商 业 目 的, 鼓 励 标 准 使 用 者 尝 试 不
23、同 厂 家 或 型 号 的 仪 器。 5 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准 附 录 B ( 资 料 性) 标 准 溶 液 多 反 应 监 测( M R M ) 色 谱 图 图 B. 1 氯 噻 啉 的 多 反 应 监 测( M R M ) 色 谱 图( 1 n g / m L 标 准 溶 液) 6 S N / T 5 3 5 8 2 0 2 1以正式出版文本为准以正式出版文本为准 1 2 0 2 8 5 3 5 T / N S 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 出 口 茶 叶 中 氯 噻 啉 残 留 量 的 测 定 液 相
24、色 谱 - 质 谱 / 质 谱 法 SN / T 5358 2021 * 中 国 海 关 出 版 社 有 限 公 司 出 版 发 行 北 京 市 朝 阳 区 东 四 环 南 路 甲 1 号( 100023 ) 编 辑 部:( 010 ) 65194242 - 7509 网 址 www. cus t omskb. c om / book 中 国 标 准 出 版 社 秦 皇 岛 印 刷 厂 印 刷 * 开 本 88012301 / 16 印 张 0. 75 字 数 18 千 字 2021 年 月 第 一 版 2021 年 月 第 一 次 印 刷 印 数 1 * 书 号: 155175 753 定 价 1 8. 0 0 元
