1、DB53/T 9832020 三七根腐病诊断及防控 2020 - 08 - 17 发布 2020 - 11 - 17 实施 ICS 65.020 B 15 云南省地方标准 云南省市场监督管理局 发布 DB53/T 9832020 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。 本标准由三七标准化技术创新战略联盟提出。 本标准由云南省农业标准化技术委员会（YNTC07）归口。 本标准起草单位：云南农业大学、昆明理工大学、文山学院。 本标准主要起草人：陈军文、崔秀明、杨玲、赵久霞、张金燕、寸竹、刘源、朱琳、杨生超、张广 辉、范伟、龙光强、赵艳
2、。 DB53/T 9832020 1 三七根腐病诊断及防治 1 范围 本标准规定了三七根腐病诊断及防控有关的术语和定义、病害诊断和鉴定、农业控病措施和化学防 控技术等要求。 本标准适用于三七根腐病的诊断及防控。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 20478 植物检疫术语 DB53/T 055.8 三七农药使用准则 DB53/T 055.9 三七育苗技术规范 DB53/T 055.10 三七栽培技术规范 DB53/T 055.11 三七病虫
3、草鼠害综合防治技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 三七 五加科人参属植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F.H. Chen。 3.2 三七根腐病 俗称鸡屎烂、臭七等，是三七块根、根茎、休眠芽等地下部分病害的总称，是三七种植过程中由细 菌性病原和真菌性病原单独或复合侵染根部引发的土传性病害。 3.3 科赫氏法则 又称柯赫氏假设，是确定侵染性病害病原物的操作程序和法则。 4 诊断 4.1 田间诊断 4.1.1 发病条件 高温、高湿的相应月份易发，连茬地和轮作年限较短的地块易发。 4.1.2 病状特征 DB53/T 9832020 2 病菌从根部
4、侵入，引起根腐，病菌随病残体、土壤和种苗传播，有如下特征： a) 发病初期地上部分正常或叶脉稍黄，或仅顶端略萎垂，但早晚尚可恢复； b) 发病初期根尖出现黄色水渍状斑点， 后期变黑褐色， 根皮湿腐， 内部逐渐软腐呈灰白色浆液状， 有腥臭或腐臭味； c) 病情继续发展，则三七植株单个叶片甚至相邻的两个叶片也变黄，或茎、叶萎蔫下垂，整株枯 死； d) 症状及流行特点详情参见附录 A。 4.2 室内诊断 4.2.1 诊断原则 应遵循科赫氏法则进行。 4.2.2 病样材料采集 根据根腐病症状及流行特点，采集典型的病样标本。 4.2.3 培养基制备 制成马铃薯葡萄糖琼脂培养基（ PDA），灭菌后备用。
5、4.2.4 病原菌分离培养 前处理消毒后，在无菌操作台将切成 5 mm小块病样接于 PDA培养基上，培养 5 d后按以下方法进行 再纯化和特征形态观察： a) 将分离培养的菌落边缘取菌龄一致的菌饼（6 mm），转接于 PDA 或 NA 或 PSA 培养基上； b) 在无光照条件下， 25 培养 7 d 以上； c) 观察菌落形态、颜色，并测定菌落直径； d) 镜检观察产孢方式、菌丝分生孢子形态，测量孢子大小。 4.2.5 病原菌形态鉴定 参见附录B进行病原菌形态鉴定。 4.2.6 科赫氏法则鉴定病原物 科赫氏法则进一步确定病原物： a) 无菌基质栽培三七苗，生长 60 d 后备用； b) 将镜
6、检后的病原菌菌株接种于健康三七植株根部，常规水肥管理； c) 观察病害发生情况； d) 采集接种根部发病部位，再次进行病原菌分离培养，参照 4.2.4 过程。 5 防控 5.1 防控原则 采用“预防为主、综合防控、持续防控、绿色防控”的防控原则。 5.2 农业措施 DB53/T 9832020 3 5.2.1 种植地选择 应选择土质疏松、通透性较好的沙壤土缓坡地，坡度15度左右为宜，并利于排水。 5.2.2 种子种苗选择 种子、种苗应符合DB53/T 055的要求。 5.2.3 土壤处理 于播种或移栽前，结合倒土和理厢，用杀毒矾混合敌克松或用黄腐酸盐混合敌克松按使用说明书对 厢面喷雾处理。 5
7、.2.4 种子（苗）处理 用70%敌克松与58%瑞毒霉锰锌各500倍混合液浸种10分钟20分钟或其它杀菌剂处理10分钟20分 钟，捞出晾干后进行播种或移栽。 5.2.5 田间管理 田间管理应符合以下要求： a) 清除病残体和田间杂草； b) 排灌，土壤湿度应控制在 20%25%为宜； c) 遇到阴雨或暴风雨应及时排涝，并通风排湿； d) 实行轮作，采取三七与小麦、陆稻、荞麦等作物轮作的方式；土壤如无特殊消毒处理措施，轮 作年限 8 年以上。 5.3 化学防控 5.3.1 用药原则 农药使用应符合DB53/T 055.8的规定，按D B53/T 055.11方法进行防控。 5.3.2 前期预防
8、出苗期、展叶期选用代森锰锌、敌克松、百菌清、波尔多液等其中一种按说明书用法进行茎叶喷施 或浇施根部。 5.3.3 病害控制 病害控制应符合以下要求： a) 发病初始期，病害较轻，以药剂控制为主；发病中后期，拔除病株并烧毁，再对发病植株及周 围进行土壤消毒； b) 选用噁霉灵、氰霜唑等杀真菌和细菌药剂（根腐病化学防控防治常用农药详情参见附录 C）按 说明书用法进行根部浇施，间隔时间 7 d 10 d，连续使用 2 次 3 次，安全使用期 30 d 以上； c) 冬季清除残株，用 75%百菌清可湿性粉剂 500 倍液喷施厢面、沟渠。 A DB53/T 9832020 4 A B 附 录 A （资料
9、性附录） 三七根腐病症状及流行特点 A.1 三七根腐病症状 A.1.1 三七根腐病类型 三七根腐病分为根褐腐病、根锈腐病、疫霉根腐病、细菌性根腐病四种类型。 A.1.2 根褐腐病 根褐腐病有以下症状，具体病症见图A.1： a) 三七须根感病部分呈黄褐色点斑，以后病斑扩展，导致须根腐烂，仅剩残余部分或全部脱落； b) 支根及主根感病是，仍先呈黄褐色小点，继而扩大为斑块，并逐步深入，导致细胞组织崩溃而 腐烂。地上部叶片则逐渐变为淡黄、萎焉，以致脱落； c) 根茎感病部位仍呈黄褐色病斑，但发病速度较快，严重时地上部分形成青枯或倒伏； d) 在植株感病初期地上部分症状不明显，只是中午高温时，叶片稍下垂
10、，早晚仍可恢复，如仔细 观察，可见植物叶片的叶脉附近颜色稍淡。根部腐烂以须根和支根为主； e) 感病中期地上部植株叶片逐渐发黄，主根已部分腐烂； f) 感病后期地上部植株枯萎，或虽有成活，但根部已大部分腐烂。由于植株叶片发黄时主根已经 腐烂，故农民称之为“黄臭七”。 图A.1 三七根褐腐病症状 A.1.3 根锈腐病 根锈腐病有以下症状，具体病症见图A.2： a) 根锈腐病与三七根褐腐病感病植株地上部症状相同，都是叶片逐渐变黄，最终植株枯萎，故七 农也称三七根锈腐病为“黄臭七”； b) 此病发病初期，地上部症状不明显，以后部分植株叶片逐渐发黄，严重时局部或全部枯萎； c) 主根感病初期， 可以看
11、到针状大小向外突起的白色小点或斑点， 继而由浅入深， 逐渐扩大汇合， 最后形成近圆形、椭圆形或不规则形的黄锈色病斑。病斑边缘稍隆起，中央略凹陷，病健部界 线明显； d) 发病轻时，病斑仅限于根的局部皮层，有的病斑会干缩剥落而自愈； DB53/T 9832020 5 e) 感病严重时病斑扩及全根，并产生龟裂，深入内部组织导致干腐。干腐组织疏松，黄锈至褐色， 与健全组织有明显界线。越冬芽受害，芽呈黄褐色。受害轻者可出苗，但地上部分明显矮小， 叶色发黄，或虽为绿色但不正常； f) 重者翌年不会出苗，但根部不死亡，群众称为“勚头”； g) 大部分块根可因中后期多种病原复合侵染而同时表现锈腐和褐腐，并逐
12、渐腐烂，采挖时仅收到 残缺块根或无收获。 图A.2 三七根锈腐病症状 A.1.4 疫霉根腐病 疫霉根腐病有以下症状，具体病症见图A.3： a) 疫病原菌可以从三七根部的任何部位侵入； b) 从根茎或茎秆基部侵入时，首先在根茎或茎秆基部出现暗色水渍状斑，之后病斑逐渐扩大，茎 秆基部的病斑可扩大并下延到根部； c) 病原从主根侵入，发病部位呈水浸状，最后形成根软腐； d) 感病植株地上部叶片耷拉、萎蔫，似开水烫过，俗称“清水症”； e) 地下部分大部分呈褐色软腐，根皮易于搓落，内部组织稀烂，有的表面带有菌丝，从而粘着附 近的土粒成团。如把成团土粒掰开，可见稀烂状残物； f) 植株受害后期，会因细菌
13、的侵入而加速病部的腐烂，若仅通过肉眼观察，容易误诊为细菌引起 的根腐病，但从植株地上部症状表现仍可区分； g) 三七疫霉根腐病地上部表现为叶片似开水烫过，花梗基部和茎秆部通常有水浸状病斑；细菌性 根腐病植株地上部表现出绿色萎蔫披垂，无水浸状病斑。 图A.3 三七疫霉根腐病症状 A.1.5 细菌性根腐病 细菌性根腐病有以下症状，具体病症见图A.4： a) 病菌侵染根茎与芽基结合部位时，初期出现褐色水渍状斑点，继而呈角状向上蔓延，最终茎秆 中间髓部腐烂造成茎基部中空； DB53/T 9832020 6 b) 若须根感病，则须根先腐烂，进而扩展至块根； c) 块根感病后，病部表皮颜色变暗，湿度大时可
14、见白色菌脓； d) 地上部分表现出三七植株急性萎蔫，即三七地上部分叶片呈绿色，叶片突然萎蔫披垂； e) 后期块根组织崩溃腐烂，形成稀腐，此时可在腐烂的块根上看到灰白色菌脓，闻时有臭味。 图A.4 三七细菌性根腐病症状 A.2 三七根腐病流行特点 A.2.1.1 根褐腐病流行特点 A.2.1.1.1 三七根褐腐病全年均可发生，高峰期主要集中在4月8月，高湿条件下发病较为严重。 A.2.1.1.2 三七园发病率一般在5%30%，严重的可导致毁园绝收。 A.2.1.1.3 真菌病原以菌丝或厚垣孢子在土壤、三七病根上或其他寄主植物上越冬；细菌、线虫病原 则广泛存在与土壤中，三者成为三七根褐腐病的初侵染
15、源。 A.2.1.1.4 传播途径主要是病土、带菌流水、种子及种苗带菌传播，其中近距离传播以带菌土壤和带 菌流水为主，远距离传播以种子、种苗带菌扩散为主。 A.2.1.1.5 三七根褐腐病的发生除了与土壤中病原菌数量、环境温湿度、种苗带菌等关系密切相关外， 还与海拔、地势、土壤类型、轮作年限、施肥等因素有关。 A.2.1.2 根锈腐病流行特点 A.2.1.2.1 在三七的整个生长期均可发生，发生高峰期多在三七出苗至展叶期（3月5月）和生长期 （9月10月） ，即三七园内温度较低，且旱季和雨季交替转换时期。 A.2.1.2.2 黏土和土质较差的土壤中发病较多。 A.2.1.2.3 病原可在土壤中
16、越冬并存活相当长的时间，带病土壤中的病原可随农事操作或灌溉水扩展 传播到邻近植株甚至更远。除土壤带菌传播外，使用老地育出的种苗，可将病菌传播到更远的地区。 A.2.1.2.4 此病发展到中后期，常出现与三七根褐腐病合并发生的情况。地上部已表现枯萎症状的三 七锈腐病植株中，有70%以上植株同时感染三七根褐腐病。 A.2.1.3 疫霉根腐病流行特点 A.2.1.3.1 病原卵孢子可在土壤中存活数年之久，是病菌进行初侵染的主体。 A.2.1.3.2 游动孢子可直接侵染三七根、叶片、叶腋，是再侵染的主要病源。 A.2.1.3.3 接触传播是土壤中三七疫霉根腐病扩展蔓延的主要方式。 A.2.1.3.4
17、三七根部的各种创伤都可使疫霉根腐病病情加重，发病率提高。 A.2.1.3.5 三七疫霉根腐病多发生在海拔1300 m1650 m地区。且集中于凹地或排水不良的地块上。 A.2.1.3.6 疫霉根腐病发生高峰期集中在三七出苗展叶期（3月6月） 、生长后期（9月10月） 。 DB53/T 9832020 7 A.2.1.3.7 发病程度与降雨有密切关系，若三七出苗期间降雨过多，或9月10月雨量增多，同期内三 七疫霉根腐病的发生将会趋于严重。 A.2.1.4 细菌性根腐病流行特点 A.2.1.4.1 病原主要存在于土壤及植物病残体中，通过土壤、灌溉水进行传播。带病种苗若移栽它处， 也可成为主要传播途
18、径之一。 A.2.1.4.2 通常情况下，种苗移栽时，根茎、芽、侧根等根系会受到不同程度损伤。 A.2.1.4.3 若根系损伤不严重，且受损部位不与病原接触，或种苗经过药剂处理，则植株本身可在病 部形成愈伤组织，使受损部位伤口愈合，能避免病菌的侵染。 A.2.1.4.4 当损伤的根系处在一个通透性差，排水不良的土壤环境中时，会受到病原的侵害。 A.2.1.4.5 感病植株常出现在地势低凹、土壤湿度大的三七园中。 A.2.1.4.6 过量施肥、施用未腐熟的农家肥也会因烧根而导致病菌的侵染危害。生产上因施肥不当造 成“绿腐”的情况时有发生。 DB53/T 9832020 8 B C 附 录 B （
19、资料性附录） 三七根腐病主要致病菌形态特征 B.1 假单胞杆菌 在 NA培养基上培养菌落圆形低凸，表面光滑，湿润，半透明，边缘整齐，灰白色至乳白色， 48 小 时直径 1.8 mm，菌体杆形，直或稍弯，（ 0. 4 m 1.0 m） （ 1. 2 m 3. 8 m），端生鞭毛 1 根 4 根，革兰氏染色反应阴性，氧化酶和接触酶反应阳性。 B.2 毁坏柱孢 在PSA培养基上子座茶褐色，生长初期气生菌丝无色，菌落生长较稀，以后变为褐色，基质里的菌 丝呈深褐色，并产生可溶性色素。分生孢子梗单生、不分枝或分枝，分生孢子单生或聚集成团，圆柱形、 长椭圆形或卵形，常具乳突状突起，无色，单孢或1 个3 个膈
20、，偶见4 个以上膈，两端钝圆，孢子体 正直或稍弯，大小为（5 m45 m）（2.5 m8 m），孢子内常形成厚垣孢子。厚垣孢子数量 颇多， 产生于菌丝的顶端或中央间生、 单生、 成串生或呈结节状， 球形至长椭圆形， 茶褐色， 直径6 m 16 m。 B.3 腐皮镰孢 在PDA培养基上菌株白色至浅灰色。渐呈兰色至兰绿色，小型分生孢子卵形，稀少。大型分生孢子 生于分生孢子梗座及气生菌结中，弯曲，有的柱形或稍呈纺锤形，顶端细胞钝圆略呈喙状，无明显带梗 状的脚胞或有时有， 2 隔5 隔横隔膜， 大多数3 隔， 3 隔横隔的孢子大小是 （27 m44 m） （4. 5m5. 5 m），厚垣孢子顶生或间生
21、，单生或成对，生于菌丝及大型分生孢子中。 B.4 恶疫霉 病菌菌丝形态简单，菌丝生长初、中期无膈，但老熟后偶尔可看见膈，分枝较少，宽2 m6 m； 孢囊梗合轴分枝； 孢子囊顶生， 呈球形和卵形， 基部圆形， 大小为 （29 m59 m） （24 m40 m） ， 平均33.1 m43.2 m；长宽比值为1.321.50，平均1.41，具明显乳突一个；孢子囊成熟后易脱落， 具短柄，柄长0.5 m4.2 m；藏卵器易大量产生，球形，直径23 m35 m；雄器球形侧生，极 少围生，大小（5.0 m14.5 m）（60 m13.0 m）；游动孢子肾形，大小（9 m12 m） （7 m11 m），鞭毛长
22、11 m21 m；休止孢球形，直径9 m12 m；卵孢子球形，直径11 m 32.5 m；壁厚2.7 m4.5 m，近满器。 B.5 细链格孢 DB53/T 9832020 9 C 在 PDA 培养基上菌落褐色至黑色，分生孢子梗单生或丛生，褐色，基部细胞膨大，不分枝或偶有分枝，屈膝状， 1 隔膜 6 隔膜， （ 19 m 59 m）（ 3. 5 m 5. 5 m） ；分生孢子单生或串 生，梭形，椭圆形或卵圆形，褐色至暗褐色，无喙或喙短，孢身 1 横隔膜 7 横隔膜， 0 纵隔膜 3 纵隔膜（ 14 m 55 m）（ 6 m 7 m） ；喙无隔膜， （ 0 m 10 m）（ 3. 5 m 5 m D 附 录 C （资料性附录） 根腐病化学防控防治常用农药 三七根腐病化学防控防治常用农药如下所示，具体使用参照使用说明书： 敌克松、甲霜灵、多抗霉素、代森锰锌、多菌灵、百菌清、波尔多液、瑞毒酶锰森、克霉灵、叶枯 净、杀毒矾、菌核净、福美双、黄腐盐酸、噁霉灵、氰霜唑、甲基托布津。 E _ DB53/T 9832020
