1、ICS 65.020.20B 05 DB32江 苏 省 地 方 标 准DB32/T 3519 2019芋 头 脱 毒 快 繁 技 术 规 程 Technical regulation of rapid propagation for virus-free taro 2019-01-12发 布 2019-01-30实 施江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB32/T 3519 2019 I 前 言本标准按GB/T 1.1-2009标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则要求编写。本标准由江苏省农业科学院提出并归口。本标准由江苏省农业科学院负责起草。本标准主要起草人：殷剑美、张培
2、通、王立、韩晓勇。 DB32/T 3519 2019 1 芋 头 脱 毒 快 繁 技 术 规 程1 范 围本标准对芋头脱毒组培苗培育、脱毒种芋繁殖体系的大田管理和种芋采收、预处理、贮存等采后环节的质量控制技术进行了规定。本标准适用于江苏省地方特色芋头品种的脱毒种芋繁殖工作。2 规 范 性 引 用 文 件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本部分。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本部分。 GB/T 18407.1无公害蔬菜产地环境要求GB/T 8321农药合理使用准则NY/T 496肥料合理使用准则通则3 术 语 和 定 义
3、下列术语和定义适用于本文件。3.1 脱 毒 原 原 种 芋 virus-free breeder seed taro用组织培养方法对芋头进行脱毒，获得无病毒组培苗后，在防虫条件下种植获得的种芋。3.2 脱 毒 原 种 芋 virus-free foundation seed taro由脱毒原原种芋在防虫条件下种植获得的种芋。3.3 脱 毒 种 芋 virus-free seed taro由脱毒原种芋在符合条件产地种植获得的种芋。4 生 产 基 础 条 件 要 求4.1 环 境 要 求符合GB/T 18407.1中所规定。 4.2 生 产 主 体 要 求符合中华人民共和国种子法和农作物种子生产经
4、营许可管理办法规定的经营主体。 DB32/T 3519 2019 2 4.3 脱 毒 组 培 苗 扩 繁 基 地 要 求组培室组成包括准备室、接种室、培养室。培养室规模应与脱毒核心种芋繁殖圃面积相匹配，按照每万株脱毒组培苗20 m2建设。脱毒种芋按照“三级扩繁”体系建设，脱毒原原种芋繁殖圃、脱毒原种芋繁殖田、脱毒种芋繁殖田面积比为112200。4.4 脱 毒 原 原 种 芋 繁 殖 基 地 要 求4.4.1 繁 殖 基 地 经 营 主 体 要 求需在专业化种芋生产单位进行，应具有防虫网棚内种植条件，由专业技术人员负责田间管理和去杂除劣操作等。4.4.2 防 虫 网 棚 建 设防虫网选用40目6
5、0目优质尼龙纱网，棚内空间大（棚高2 m以上，宽6 m8 m），结构稳定， 利于田间作业，具有较强的抗风性。4.4.3 繁 殖 田 块 要 求靠近水源，排灌方便；选择土层深厚、土壤肥沃的偏沙性壤土；未种植芋头及甘薯、马铃薯、山药等地下根茎类作物1年以上；田间灌排沟系配套，水利设施齐全，达到“旱能灌，涝能排”。4.5 脱 毒 原 种 芋 繁 殖 基 地 要 求4.5.1 繁 殖 基 地 经 营 主 体 要 求同本标准4.4.1。4.5.2 防 虫 网 棚 建 设同本标准4.4.2。 4.5.3 繁 殖 田 块 要 求同本标准4.4.3。4.6 脱 毒 种 芋 繁 殖 基 地 要 求4.6.1 繁
6、 殖 基 地 经 营 主 体 要 求同本标准4.2。4.6.2 繁 殖 田 块 要 求同本标准4.4.3。5 芋 头 脱 毒 组 培 苗 培 育 5.1 外 植 体 培 养 和 处 理以芋头茎尖为外植体。选取保存完好、无病斑的芋头，经质量比0.2%的高锰酸钾（KMnO4）灭菌处理5 min，用灭菌后的细沙覆盖整个芋头的2/3处，放置于光照培养箱中促其萌发。当芽生长到1 cm DB32/T 3519 2019 3 3 cm时切取茎尖，剥除茎尖外层2层3层叶片，流水冲洗10 min，在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s，用3%次氯酸钠（NaClO）溶液消毒10 min15 min，无菌水漂洗5次
7、7次。剥离茎尖外层叶鞘，在解剖镜下剥取0.4 mm0.8 mm大小茎尖作为外植体。5.2 愈 伤 组 织 诱 导 和 组 培 苗 芽 形 成将剥取的外植体接种在MS + 2,4-二氯苯氧乙酸（2, 4-D）2.0 mg/L的培养基中，在温度25 2 、光照强度2200 Lux左右的培养室内无菌培养50 d60 d，诱导形成愈伤组织。芋愈伤组织在上述培养基和培养条件下再经60 d左右培养，分化出芽。5.3 病 毒 鉴 定将组培苗芽切下，接种在MS +噻苯隆（TDZ）1.0 mg/L的培养基中，长到两叶以上时（20 d左右），取部分叶片利用酶联免疫分析（ELISA）法进行芋头花叶病毒（DMV）的检
8、测。保留无病毒组培苗进行继代培养。 5.4 继 代 培 养将无病毒组培苗继续培养。当植株萌发出的不定芽达2.0 cm时，切下不定芽接种在MS + TDZ 1.0mg/L的培养基中进行继代培养。一般连续继代培养不超过4次。5.5 诱 导 生 根将高2.0 cm、带有2片叶的健壮小苗分开，转入含0.2活性炭的MS +萘乙酸（NAA）0.5 mg/L+ 6-苄氨基嘌呤（6-BA）0.1 mg/L培养基中进行培养，诱导生根，形成脱毒试管苗。试管苗培养30 d40 d（根长3 cm5 cm）后，移栽田间扩繁脱毒原原种芋。6 脱 毒 原 原 种 芋 繁 殖6.1 炼 苗 处 理 最佳栽植时间为4月下旬5月
9、上旬。移栽前一周将脱毒试管苗置于常温环境中炼苗，避免阳光直射。移栽前1 d2d打开瓶盖炼苗。6.2 移 栽 种 植纵向筑畦作为苗床，畦高6 cm7 cm，畦面宽1.0 m，畦沟宽0.4 m，每畦种2行。按行距50 cm在苗床上开宽15 cm、深10 cm的移栽行沟，沟内填实酸碱度中性（pH 6.87.3，EC 1 mS/cm2 mS/cm）的常规蔬菜育苗基质，并浇透水。将炼苗后的试管苗洗净基部培养基，按株距30 cm栽入移栽行沟。栽后喷水保湿，搭小拱棚并加盖遮阳网。移栽后的前两周每天早晚各浇水1次，第二周开始早上10时前和下午4时后打开遮阳网，第三周开始揭掉遮阳网。苗期保持棚内温度15 25
10、，若温度过高时上午10时下午4时盖遮阳网降温。注意勤浇水，保持基质含水量80%90%。6.3 病 虫 害 控 制6.3.1 控 制 病 害 每隔15 d左右选择晴天使用符合GB/T 8321规定的广谱保护性杀菌剂喷雾。6.3.2 防 治 害 虫 DB32/T 3519 2019 4 主要害虫为蚜虫、斜纹夜蛾和蛴螬，使用符合GB/T 8321规定的适宜杀虫剂进行化学喷雾防治。具体防治农药为：表 1 芋 头 主 要 害 虫 适 宜 使 用 方 法 对 照 表害虫适宜使用农药防治方法蛴螬不使用农药选择晴天下午3点左右开始灌水，保持浅水层至次日早晨，然后晾田2 d3 d。蚜虫吡虫啉及复配剂采用25%吡
11、虫啉及复配剂1000倍液均匀喷雾。斜纹夜蛾氯虫苯甲酰胺+菊酯类杀虫剂采用10%氯虫苯甲酰胺+菊酯类杀虫剂2000液均匀喷雾，喷药时间应在傍晚或清晨。6.4 苗 床 管 理 6.4.1 控 制 温 度生长前期温度控制在25 以下，后期温度控制在25 30 。当温度30 时，应覆盖遮阳网或喷水降温。6.4.2 水 分 管 理睛天早晚可浇水各1次，阴天根据土壤温度、水分情况3 d4 d浇水1次，保证基质不过干或过湿，以植株不出现缺水症状为宜。6.4.3 肥 料 管 理全生育期只施肥1次。于7月下旬按照净苗床施硫酸钾复合肥（N15-P15-K15）30 kg/667 m 2，或施用符合NY/T 496
12、规定的氮磷钾等量的其他肥料（忌用含氯肥料）。6.4.4 保 留 分 株全生育期不除边荷、不去分株。6.5 收 获 保 存6.5.1 适 时 收 获11月上中旬收获为宜。收获前20 d不浇水，保持土壤干爽。6.5.2 种 芋 处 理收获芋盘，不掰下子孙芋，保持芋盘完整；清理芋盘上泥土，晾晒1 d2 d；用25%阿米西达悬浮 液800倍液均匀喷雾，再晾晒1 d2 d；用干生石灰粉均匀包裹，入库保存。6.5.3 越 冬 储 存将处理后的种芋盘摆放在仓库内，先铺一层稻草，然后摆一层种芋盘，再均匀撒一层生石灰干粉。如此摆放多层，堆高不宜超过1 m。库内温度控制在5 8 ，相对湿度80%90%，定期通风，
13、保持仓库内清洁卫生。贮藏期间及时剔除烂芋。7 脱 毒 原 种 芋 繁 殖 DB32/T 3519 2019 5 7.1 整 地 作 畦冬前深耕晒垡，施入腐熟的农家肥2000 kg/667 m2左右，春季再次施腐熟的农家肥1000 kg/667 m2左右。播种前做好畦，畦高6 cm7 cm，畦面宽0.8 m左右，畦沟宽0.4 m左右。7.2 播 种 要 求7.2.1 4月上旬播种。7.2.2每畦2行，行距40 cm，株距30 cm，种植密度约3400株/667 m2左右。7.2.3开沟播种，播种沟深度10 cm，种芋均匀摆放于沟内，及时覆土。覆土后全田均匀喷洒96%金都尔乳油800倍液，并及时加
14、盖黑地膜。黑地膜必须贴紧地面，四周用土封好。7.3 播 后 管 理7.3.1播种出苗期间土壤含水量在70%80%为宜。若遇长期干旱，要及时浇水。发芽后及时破膜引苗。 7.3.2苗期保持田间土壤含水量不低于60%。7.3.3 病 虫 害 控 制病害防治方法同6.3.1款。虫害防治方法同6.3.2款。7.3.4 生 长 期 管 理a)水分管理保持土壤含水量70%左右，干旱时及时浇水。7月份在无有效降雨情况下，每隔5 d7 d灌水1次，要“沟灌窨水，夜灌晨排”，不大水漫灌，不能长期淹水。8月上旬以后，灌水次数可减少，土壤偏干应及时灌水，灌水方法同7月份。b)施肥要求当叶龄达到8叶9叶时（一般在7月中旬），及时追肥。撒施菜籽饼60 kg/667 m 2左右+硫酸钾复合肥（N15-P15-K15）30 kg/667 m2左右，或施用符合NY/T 496肥料合理使用准则通则规定的相等氮磷钾施用量的其他肥料。c)壅根培土7月中下旬进行壅根培土。挖取畦间沟内泥土，培于芋头行上，壅土高度10 cm。d)全生育期不要去除分株。7.4 收 获 保 存同本标准6.5款。8 脱 毒 种 芋 扩 繁利用脱毒原种芋在大田进行扩繁，生产管理、保存方法同本标准第7款。
