1、NORME INTERNATIONALE 5554 INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION.MEWYHAPOfiHAR OPrAHM3ALlMR fl0 CTAHAlTH3AllH.ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION Produits base de viande - Dtermination de la teneur eti amidon (Mthode de rfrence) Meat products - Determination of star 5 PRINCIPE Chauf
2、fage dune prise dessai avec une solution thanolique dhydroxyde de potassium jusqu dissolution complte des composants de la viande. Dcantation, lavage du rsidu Ithanol chaud, filtration, dissolution dans lacide chlorhydrique et hydrolyse. Dtermination titrimtrique du glucose form. 6 RACTIFS Tous les
3、ractifs doivent tre de qualit analytique reconnue. Leau utilise doit tre de leau distille ou de leau de puret au moins quivalente. 6.1 Hydroxyde de potassium, solution thanol ique. Dissoudre 50 g dhydroxyde de potassium dans 800 ml dthanol 95 % (V/II) et complter 1 000 ml avec le mme thanol. 6.2 tha
4、nol, 80 % (WV). 6.3 Acide chlorhydrique, solution 1,0 M (exempte de chlore). b) 144 g de carbonate de sodium (NazC03) dans 300 400 ml deau 50 OC; c) 50 g dacide citrique monohydrate (CeHe07.H20) dans 50 ml deau. Ajouter, lentement et avec prcaution, la solution c) la solution b), en agitant constamm
5、ent. Poursuivre lagitation jusqu ce quil ny ait plus de dgagement de dioxyde de carbone. Ajouter la solution a) en agitant constamment. Laisser refroidir la temprature ambiante, transvaser quantitativement dans une fiole jauge de 1 000 ml, complter au trait repre et filtrer au bout de 24 h. Le pH de
6、 la solution, aprs dilution 1 + 49 avec de leau rcemment bouillie puis refroidie, doit tre de 10,O * 0,l. 6.8 Empois damidon (indicateur) 1 litre deau bouillante, ajouter un mlange form de 10 g damidon soluble, 10 mg diodure de mercure (comme conservateur) et 30 ml deau. Poursuivre lbullition durant
7、 3 min et refroidir. 1 ISO 5554-1978 (F) 6.9 Thiosulfate de sodium, solution titre environ 0,l N. 6.9 .l Prparation Dissoudre, dans 1 000 ml deau rcemment bouillie puis refroidie, 25 g de thiosulfate de sodium pentahydrat (Na V est le volume, en millilitres, de la solution de thio- sulfate de sodium
8、 ajout la solution diodate de potassium; 214,0 est la masse molculaire relative de Iiodate de 6 potassium. 6.10 Iodure de potassium, solution 100 g/l. Dissoudre 10 g diodure de potassium dans de leau et complter 100 ml. Conserver la solution dans un flacon en verre brun fonc. 6.11 Acide chlorhydriqu
9、e, (exempte de chlore). solution 25 % (m/m 1 Diluer 100 ml dacide chlorhydrique concentr exempt de chlore (2 1,19 g/ml) avec 60 ml deau. 7 APPAREILLAGE Matrial courant de laboratoire, et notamment : 7.1 Hachoir mcanique viande, type de laboratoire, muni dune plaque perfore dont les trous ont un diam
10、tre ne dpassant pas 4 mm. 7.2 Bain deau bouillante. 7.3 Papiers filtres plisss, de 15 cm de diamtre, exempts damidon. 2 7.4 Plaque damiante avec trou circulaire, adaptable au fond de la fiole conique (7.5). 7.5 Fiole conique, de 250 300 ml de capacit, col rod, munie dun bouchon en verre rod. 7.6 Rfr
11、igrant air, muni dun joint conique adaptable au col de la fiole conique (7.5). 7.7 Rgularisateurs dbullition (par exemple grains de pierre ponce ou billes en verre). 7.8 Burette,de 50 ml de capacit, conforme IlSOlR 385, classe A. 7.9 pH-mtre. 8 CHANTILLON 8.1 Oprer sur un chantillon reprsentatif dau
12、 moins 200 g. Voir ISO 3100. 8.2 Conserver lchantillon, si ncessaire, de facon viter tou te dtrioration et tout changement dans sa composition. 9 MODE OPRATOIRE 9.1 Prparation de lchantillon pour essai Rendre lchantillon homogne par au moins deux passages dans le hachoir viande (7.1) et mlange. Gard
13、er Ichan- tillon dans un flacon ferm, tanche et rempli compltement, et le conserver, si ncessaire, de facon viter toute dtrio- ration et tout changement dans sa composition. Analyser lchantillon ds que possible aprs lhomognisation, mais toujours dans les 24 h. 9.2 Prise dessai Peser, 0,l g prs, dans
14、 un bcher de 500 ou 600 ml, environ 25 g de lchantillon pour essai (9.1). Si la masse damidon correspondant cette prise dessai est prsume suprieure 1 g, rduire la prise dessai en consquence. 9.3 Isolement de lamidon Ajouter, la prise dessai, en agitant laide dune baguette en verre, 300 ml de la solu
15、tion thanolique dhydroxyde de potassium (6.1) chaude et couvrir le bcher dun verre de montre. Chauffer au bain deau bouillante (7.2) durant 1 h en agitant de temps autre. Dcanter la solution, entraner quantitativement le rsidu contenant lamidon sur un papier filtre (7.3), le laver en utilisant de It
16、ha- nol (6.2) chaud et en saidant dune baguette en verre munie dun embout en caoutchouc. Maintenir humide le papier filtre. NOTE - Dans la filtration. certains cas, la centrifugation peut tre prfrable 9.4 Hydrolyse ISO 55544978 (F) 9.6 Essai blanc Sparer immdiatement le rsidu du papier filtre laide
17、dune baguette en verre. Faire un trou dans le papier filtre et entraner le rsidu contenant lamidon dans un bcher de 250 ml en utilisant 100 ml de la solution dacide chlor- hydrique (6.3) chaude. Recouvrir le bcher dun verre de montre, limmerger dans le bain deau bouillante et ly laisser sjourner 2,5
18、 h en agitant de temps autre laide dune baguette en verre. Refroidir la solution et neutraliser en ajoutant la solution dhydroxyde de sodium (6.5), goutte goutte, en prenant soin que le pH ne dpasse pas 6.5; le vrifier au pH-mtre (7.9). Transvaser quantitativement le mlange dans une fiole jauge de 2
19、00 ml en lavant avec de leau, ajouter 3 ml de la solution I (6.6) et, aprs avoir mlang, 3 ml de la solution II (6.6), et complter au trait repre. Mlanger et filtrer sur un paper filtre pliss (7.3). Imm- diatement avant de pipetter une partie aliquote pour Iop- ration suivante, rendre le filtrat alca
20、lin au bleu de bromo- thymol (6.4) en ajoutant 1 ou 2 gouttes de la solution dhydroxyde de sodium (6.5). 9.5 Dtermination du glucose Si lon ne connat pas la teneur approximative en amidon de lchantillon, effectuer un essai pralable en vue de la dterminer. Diluer une partie aliquote (V,) du filtrat (
21、9.4) avec de leau jusqu un volume connu (Vs), de faon que 25 ml de la solution dilue contiennent de prfrence entre 40 et 50 mg de glucose et, de toute faon, pas plus de 60 mg. Mlanger, prlever, laide dune pipette, 25,0 ml de la solution dilue et les introduire dans la fiole conique (7.5). Introduire
22、, au moyen dune autre pipette, 25,0 ml du ractif cuprique (6.7) dans la fiole et ajouter. quelques regularisateurs dbullition (7.7). NOTE - II est essentiel de 50,O ml ce stade. que le volume total du liquide soit toujours Relier le rfrigrant (7.6) la fiole. Placer la fiole munie du rfrigerant sur u
23、ne toile mtallique recouverte de la plaque damiante (7.4). Porter le liquide lbullition sur la flamme dun bec de gaz en 2 min environ et poursuivre doucement lbullition durant exactement 10 min. Ensuite, refroidir rapidement jusqu la temprature ambiante. Dbrancher le rfrigrant et ajouter 30 ml de la
24、 solution diodure de potassium (6.10), puis, avec prcaution mais aussi rapidement que possible, 25 ml de la solution dacide chlorhydrique (6.11). Boucher la fiole et la laisser ainsi jusquau moment du titrage. Titrer liode libr avec la solution titre de thiosulfate de sodium (6.9). Lorsque la soluti
25、on est devenue jaune ple, ajouter environ 1 ml de lempois damidon (6.8) et pour- suivre le titrage jusqu disparition de la coloration bleue. Effectuer un essai blanc, en suivant le mme mode op- ratoire quen 9.5, mais en prenant 25,0 ml deau au lieu des 25,0 ml du filtrat dilu. 10 EXPRESSION DES RSUL
26、TATS 10.1 Mode de calcul et formules Calculer la diffrence entre les volumes obtenus lors des deux titrages, exprime en millilitres de solution de thio- sulfate de sodium exactement 0,l N, laide de la formule lOTx(Q-V,) T est la normalit de la solution titre de thiosulfate de sodium (voir 6.9.2); Vo
27、 est le volume, en millilitres, de la solution titre de thiosulfate de sodium (6.9), utilis pour lessai blanc (9.6); V, est le volume, en millilitres, de la solution titre de thiosulfate de sodium (6.9), utilis pour le filtrat dilu (9.5). Calcule r la teneur en amidon, en pourcentage en laide de la
28、formu le 1731 200 100 -x 1 000 0,9 v3 v3 4 x- x-x-= x- x- 25 V, 0,72 mQ V2 mo V, est le volume, en millilitres, de la partie aliquote non dilue (voir 9.5); V3 est le volume, en millilitres, de la partie aliquote dilue (voir 9.5); m0 est la masse, en grammes, de la prise dessai (9.2); ml est la masse
29、, en milligrammes, de glucose, dter- mine laide de lexpression 10 T x (Vo -VI ) par rf- rence la table (page 4) ou au graphique (page 5). 0,9 est le facteur de conversion de la masse de glucose, ml, en masse correspondante damidon. Exprimer le rsultat 0,l % prs. 10.2 Fidlit 10.2.1 Rptabifit La diffr
30、ence entre les rsultats de deux dterminations, effectues simultanment ou rapidement lune aprs lautre par le mme analyste, ne doit pas dpasser 0,2 g damidon pour 100 g dchantillon. 3 ISO 5554-1978 (F) 10.2.2 Reproduc tibilit La diffrence entre les rsultats de deux dterminations, effectues sur le mme
31、chantillon dans deux laboratoires diffrents, ne doit pas dpaser 0,3 g damidon pour 100 g dchantillon. et le rsultat obtenu. II doit, en outre, mentionner tous les dtails opratoires non prvus dans la prsente Norme internationale, ou facultatifs, ainsi que les incidents ven- tuels susceptibles davoir
32、agi sur le rsultat. 11 PROCS-VERBAL DESSAI Le procs-verbal dessai doit donner tous les renseignements ncessaires lidentification complte de lchantillon. Le procs-verbal dessai doit indiquer la mthode utilise TABLE - Conversion des millilitres de solution de thiosulfate de sodium 0,l N en milligramme
33、s de glucose 10Tx(Vo-V,) Masse correspondante de glucose ml de solution de thiosulfate de sodium 0,l N 1 2,4 2,4 2 4,8 2,4 3 7,2 2,5 4 97 2,5 5 12,2 2,5 6 14,7 23 7 l7,2 Z6 8 19,8 Z6 9 22,4 2,6 10 25,0 2,6 11 27,6 2,7 12 30,3 2,7 13 33,0 2,7 14 35,7 2,s 15 38,5 23 16 41,3 29 17 44,2 2,9 18 47,1 2,9
34、19 50,o 3,O 20 53,0 3,O 21 56,0 3J 22 59,l 3J 23 62,2 4 ISO 55544978 (F) 57 L 54 L 51 - 48 1 45 . 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 IOTXWo- VI ) millilitres de solution de thiosulfate de sodium 0,l N - FIGURE - Gra Iphique pour la conversion des millilitres de solution de thiosulfate de sodium 0,l N en milligramm de glucose Page blanche
