1、1选修 37 题 4 练(B)1.(2018 河北衡水中学十五模,37)请回答下列有关生物技术实践方面的问题:(1)培养基配制的步骤为:计算-称量- - -倒平板;为统计样品中活菌的数目,在 37 培养箱中培养适当时间后形成菌落,一般选择菌落数在 个的平板进行计数。 (2)泡菜虽然好吃,但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成 ,这是一种致癌物,测定亚硝酸盐含量的原理是在 条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后,与 N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 (3)腐乳制作的流程是:让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。配制卤汤时,要使卤汤中酒的含量控制在 左右。
2、(4)某同学釆用血细胞计数板计数(规格为 1625,0.1 mm3),统计 4 个中方格中的细菌数,计算出每个小格所含细菌的平均数为 2 个,则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为 103) 个。 (5)对于频繁使用的菌种可将试管放入 保藏。 2.(2018 江西八所重点中学联考,37)牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于 30 000 个,以下是牛奶消毒及细菌检测实验。(1)图中步骤称为 消毒法,步骤是 。 (2)进行步骤操作时,应选用下列中的哪种工具? 。为了避免杂菌污染,此步骤应在 附近进行。 (3)将接种后的培养基和
3、作为对照的 同时放入 37 恒温培养箱中,培养 36 小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为 的平板进行计数,经过消毒后的牛奶,细菌数 (是/否)符合国家标准。该法测得的细菌数一般比实际结果偏 ,原因是 。 牛奶稀释倍数 102 103 104平板 1 菌落数 87 10 12平板 2 菌落数 83 12 1平板 3 菌落数 85 10 03.(2018 山东、湖北重点中学冲刺五,37)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌,具有下列类似的操作过程:(1)在过程的选择培养基是 培养基,过程的选择培养基是 培养基(填“固体”或“液体”)。的具体措施是 ;的选择措施是
4、 。 (2)在过程样品梯度稀释后,一般只将稀释度为 104106倍的菌液分别接种到 3 个平板培养基上。接种的常用方法为 。 (3)过程采用 的鉴别方法较简单。周围出现透明圈但不能 100%确定为纤维素分解菌的菌落,原因是: 。 4.(2018 河北衡水中学十七模,37)青蒿素是一种无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,60 以上易分解,主要从黄花蒿中提取。近年来又发现青蒿素具有较强的抗肿瘤作用,某科研小组按如下步骤进行了相关实验:从黄花蒿中提取青蒿素;将等量癌细胞分别接种到 4 组培养瓶中,适宜条件下培养 24 h 后除去上清液;向 4 组培养瓶中分别加入等量含 2、4、8、16
5、 mol/L 青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养;72 h 后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。回答下列问题:(1)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法,原因是 ;根据青蒿素 的特点,可采用有机溶剂萃取的方法,现有四氯化碳(沸点 76.5 )和乙醚(沸点 34.5 )两种溶剂,应选用 作为萃取剂,不选用另外一种的理由是 。 (2)萃取青蒿素的过程应采用 加热;加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是 。 3(3)科研小组进行上述步骤实验的目的是 。步骤中需要设罝对照组,对照组的处理方法为 。 4答案全解全析1. 答案 (1)溶化 灭菌 30300 (2)亚硝胺 盐酸酸化 (3)12% (4)810
6、 9 4 冰箱解析 (1)制作培养基时,首先按配方计算培养基中各种成分的用量,然后称量溶化灭菌倒平板;选择菌落数在 30300 的平板进行计数。(2)亚硝酸盐转变为亚硝胺,对人体有害。在盐酸酸化条件下亚硝酸与对氨基苯磺酸反应后,再与 N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料;(3)在卤汤中加酒,一般要控制在 12%左右。(4)血细胞计数板计数(规格为 1625,0.1 mm3),每个小格所含细菌的平均数为 2个,稀释倍数为 103,则每毫升样品中的细菌数为 216250.11000103=8109(个)。(5)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,将装有已长成的菌落的试管放入 4 冰
7、箱中保藏。2. 答案 (1)巴氏 系列稀释(或梯度稀释) (2)B 酒精灯火焰(3)一个未接种的培养基 10 2 是 少 当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落解析 (1)图中步骤利用 80 、15 min 对牛奶进行消毒,此种方法称为巴氏消毒法;步骤是系列稀释(或梯度稀释)。(2)步骤表示采用稀释涂布平板法对微生物进行接种,因此操作时应选用 B 选项所示的涂布器。为了避免杂菌污染,此步骤应在酒精灯火焰附近进行。(3)将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基同时放入 37 恒温培养箱中培养 36 小时。用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时,在每一个梯度浓度内,至少要涂布
8、 3 个平板,确定对照组无菌后,选择菌落数在 30300 的平板进行记数,求其平均值。表格信息显示:当牛奶稀释倍数为 102时,三个平板的菌落数在 8090 之间,其余的牛奶稀释倍数,三个平板的菌落数均小于或等于 12。可见,取出后统计各平板的菌落数,应选择其中稀释倍数为 102的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是=(87+83+85)310 2=8 500(个/mL),而国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于 30 000 个,因此经过消毒后的牛奶符合国家标准。因当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落,所以该法测得的细菌数一般比实际结果偏少。3. 答案 (1)固体 液体
9、以尿素为唯一氮源 以纤维素为唯一碳源 (2)稀释涂布平板(或平板划线)法 (3)倒平板时加入刚果红染液 不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈解析 (1)将微生物接种在固体培养基上培养,才能形成菌落,可见,过程的选择培养基是固体培养基。进行梯度稀释并接种前要进行过程所示的选择培养,因此过程的选择培养基是液体培养基。选择培养的目的是筛选尿素分解菌,所以具体的措施是应以尿素为唯一氮源;选择培养的目的是筛选纤维素分解菌,所以的选择措施是以纤维素为唯一碳源。(2)常采用稀释涂布平板(或平板划线)法,将稀释度为 104106倍的菌液分别接种到 3 个平板培养基上。(3)刚果红可与
10、纤维素形成红色复合物,但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后,刚果红纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。可见,过程采用倒平板时加入刚果红5染液的鉴别方法较简单。由于不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈,所以周围出现透明圈的菌落不能 100%确定为纤维素分解菌。4. 答案 (1)青蒿素不易挥发,不能随水蒸气蒸馏出来(或水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质,而青蒿素不易挥发) 易溶于有机溶剂 乙醚 青蒿素在 60 以上易分解,应选择低沸点的萃取剂(2)水浴 防止有机溶剂挥发 (3)探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系 在另一培养瓶中加入等量的不含青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养解析 (1)青蒿素不易挥发,不能随水蒸气蒸馏出来,所以提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法;青蒿素易溶于有机溶剂,所以可采用有机溶剂萃取的方法;由于青蒿素在 60 以上易分解,因此应选择低沸点的乙醚作为萃取剂。(2)由于有机溶剂易燃,所以萃取青蒿素的过程应采用水浴加热;为防止有机溶剂挥发,加热时可在加热瓶口安装回流冷凝装置。(3)步骤实验的目的是探究青蒿素的浓度与细胞增殖抑制率的关系;步骤中缺少空白对照组,需要设置一组加入等量的不含青蒿素的培养液,在适宜条件下培养作为对照组,以排除细胞自身原因的死亡。
