1、研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 4 及答案与解析1 (南开大学 2008 年考研试题)甘氨酸分子的分子量为 75 道尔顿。（A）正确（B）错误2 (四川大学 2007 年考研试题)胶原(蛋白)(collagen) 是动物结缔组织最丰富的一种蛋白质，它是由原胶原蛋白分子组成。原胶原蛋白是一种具有左手超螺旋结构的蛋白。每个原胶原分子都是由 3 条特殊的右手螺旋的多肽链芹手旋转形成的。（A）正确（B）错误3 (四川大学 2007 年考研试题)肌红蛋白(myoglobin)是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，神经质氧饱和曲线为 S 曲线型。而血红蛋白(
2、hemoglobin)是由含有血红素辅基的 4 个亚基组成的结合蛋白，血红蛋白负责将氧由肺运输到外周组织，它的氧饱和曲线为双曲线型。（A）正确（B）错误4 (四川大学 2006 年考研试题)谷胱甘肽中的所有肽键都是一个氨基酸的 氨基和另一个氨基酸的 一羧基经缩合而形成的。（A）正确（B）错误5 (四川大学 2006 年考研试题)脯氨酸不能参与 一螺旋，它使 一螺旋弯曲。在一些蛋白质的多肽链中，每一个弯曲处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个弯曲。（A）正确（B）错误6 (四川大学 2006 年考研试题)用 SDS-PAGE 电泳法测定蛋白质分子量是根据蛋白质分子所带的电荷量而定。（A）正
3、确（B）错误7 (哈尔滨工业大学 2008 年考研试题)蛋白质的二级结构决定了其生物活性。（A）正确（B）错误8 (哈尔滨工业大学 2008 年考研试题)强酸能使蛋白变性失活，它是酶的不可逆抑制剂。（A）正确（B）错误9 (山东大学 2006 年考研试题)氨基酸与 2，4-二硝基氟苯反应，首先被 Edman 用于鉴定多肽或蛋白质的 N 端氨基酸。（A）正确（B）错误10 (山东大学 2006 年考研试题)“ 无规卷曲”是蛋白质一种明确而又稳定的二级结构。（A）正确（B）错误11 酶底物的类似物和过渡态的类似物通常都是酶的竞争性抑制剂。（A）正确（B）错误12 如果有一种试剂只能与脱氧的血红蛋白
4、结合，那么在血红蛋白溶液中加入该试剂以后，将会提高血红蛋白释放氧气的能力。（A）正确（B）错误13 同一种激素有时可以产生完全相反的生理作用。（A）正确（B）错误14 限定一种别构酶具有正协同效应，那么此酶正别构效应物的存在将增强它的正协同效应。（A）正确（B）错误15 甘二醇曾被作为牙膏的添加剂，后来发现它对人体有毒，因为它进入体内能够抑制乙醇脱氢酶的活性。（A）正确（B）错误16 所有的丝氨酸蛋白酶都具有相同的催化三元体，所以它们都属于同源蛋白。（A）正确（B）错误17 辅酶、辅酶和 FAD 和 CoA 一样，其分子结构中都含有腺苷酸。（A）正确（B）错误18 构成呼吸链的四种复合体均含有
5、铁硫蛋白。（A）正确（B）错误19 糖酵解途径的所有中间代谢物都是磷酸化的有机分子。（A）正确（B）错误20 如果一个酶促反应的G 0 是一个大的负值，那么这个反应在细胞内一定是一个不可逆反应。（A）正确（B）错误21 cAMP、ADP 和 ATP 都是高能磷酸化合物。（A）正确（B）错误22 动物糖异生的前体包括丙酮酸、甘油、丙酸和降植烷酸。（A）正确（B）错误23 P700 和 P680 的化学本质都是特殊的叶绿素 a。（A）正确（B）错误24 肝细胞因为缺乏硫解酶而不能利用酮体。（A）正确（B）错误25 脂溶性维生素和胆固醇的生物合成的前体都是活化的异戊二烯。（A）正确（B）错误26 原
6、核生物和真核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶都是氨甲酰磷酸合成酶。（A）正确（B）错误27 DNA 分子上的 5 一甲基胞嘧啶的脱氨基反应比胞嘧啶的脱氨基反应更容易引起突变。（A）正确（B）错误28 内含子在剪接反应中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在内含子内发主突变不会影响到这种蛋白质的功能。（A）正确（B）错误29 内含肽被释放后可以作为一种特殊的核酸内切酶，催化自身的 DNA 转移到其他基因内部，导致该基因不能产生有功能的蛋白质产物。（A）正确（B）错误30 指导蛋白质定位与分拣的信号肽序列在蛋白质到达特定位点后一般都会被特定的酶识别并切除。（A）正确（B）错误二、不定项选择题下列各题的备
7、选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。31 (华东理工大学 2007 年考研试题)关于 -螺旋正确的是( )。（A）螺旋中每 36 个氨基酸残基为一周（B）为右手螺旋结构（C）两螺旋之间借二硫键维持其稳定（D）氨基酸侧链 R 基团分布在螺旋外侧32 (华东理工大学 2006 年考研试题)含有 2 个羧基的氨基酸是( )。（A）丝氨酸（B）赖氨酸（C）酪氨酸（D）苏氨酸（E）谷氨酸33 (华东理工大学 2006 年考研试题)维系蛋白质三级结构稳定的键或作用力中不包括( )。（A）疏水作用（B）盐键（C）氢键（D）范德瓦尔斯力（E）肽键34 (华东理工大学 2006 年
8、考研试题)盐析法沉淀蛋白质的原理是( )。（A）破坏水化膜，中和电荷（B）无机盐与蛋白质结合成不溶性的蛋白盐（C）降低蛋白质溶液的介电常数（D）破坏蛋白质的一级结构（E）调节蛋白质溶液的等电点35 (华东理工大学 2006 年考研试题)20 种氨基酸中，没有旋光性的氨基酸是( )。（A）Tyr（B） GIy（C） Pro（D）Ser（E）Glu36 (华东理工大学 2006 年考研试题)属于人体必需氨基酸的是( )。（A）Phe（B） Ala（C） Glu（D）Asp（E）Gly37 (华东理工大学 2006 年考研试题)蛋白质吸收紫外光能力的大小，主要取决于( )。（A）酸性氨基酸的含量（B
9、）肽链中的肽键（C）碱性氨基酸的含量（D）酪氨酸、色氨酸的含量（E）肽链中的氢键38 (华南农业大学 2009 年考研试题) 折叠结构的稳定主要靠哪种化学键 ?( )（A）二硫键（B）主链内氢键（C）侧链问的氢键（D）主链问的肽键39 (华南农业大学 2009 年考研试题)破坏 螺旋的形成氨基酸残基是( )。（A）Glu（B） Asp（C） His（D）Pro40 (华南农业大学 2009 年考研试题)在蛋白质变性的时候最不可能被断裂的化学键是( )。（A）疏水键（B）氢键（C）二硫键（D）范德华力三、单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。41 能够形成 Schifr 碱参与共
10、价催化的氨基酸残基是( )。（A）P（B） E（C） R（D）K（E）Y42 最容易出现在蛋白质内部的一对氨基酸残基是( )。（A）Arg ：Lys（B） Ser：Gly（C） Arg：Asp（D）Asp：Asp（E）TyT ：Lys43 Hsp70 具有的酶活性是( )。（A）激酶（B）蛋白酶（C） ATP 酶（D）异构酶（E）没有酶活性44 不可能参与一种酶的催化机制的氨基酸残基是( )。（A）Lys（B） Glu（C） Cys（D）Ile（E）Tyr45 在酶活性的各种调节饥制中，调节速度最快的是( )。（A）酶的合成（B）酶的水解（C）别构调节（D）共价修饰（E）水解激活46 构成蛋白
11、顺的氨基酸残基中哪一种具有内在的荧光?( )（A）Phe（B） Tyr（C） Trp（D）Pro（E）His47 按照氨基酸侧链疏水性递增的顺序，下列六种氨基酸残基的正确排序应该是( )。（A）REMFVI（B） REMIVF（C） IVFMER（D）ERFMVI（E）FEMVIR48 cAMP 受体蛋白(CRP)的一种突变使其失去了与 DNA 结合的能力，该突变菌株( )。（A）只有在高葡萄糖浓度下，lacZ 才能高水平表达（B）只有在低葡萄糖浓度下，lac7 才能高水平表达（C）只有在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 才能高水平表达（D）即使在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 也不能高
12、水平表达49 组蛋白的乙酰化修饰对真核细胞的基因表达具有非常大的影响，受乙酰化修饰的氨基酸残基通常是( ) 。（A）Arg（B） Cys（C） Ser（D）Thr（E）Lys50 细菌细胞内的质粒 DNA 的存在形式是( )。（A）共价闭环负超螺旋（B）共价闭环正超螺旋（C）共价闭环松弛型（D）线性负超螺旋（E）线性互迢螺旋51 最可能形成 z-DNA 的序列是( )。（A）5-ATATATATATATATATATAT-3 3一 TATATATATATATATATATA-5 （B） 5-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-33-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-5（C） 5-GC
13、GCG(2GCGCGCCGCGCGCG 一 3 3-CGCGCGCGCGCGCGCGCGCG-5 （D）5-GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 一 33-CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC 一 552 序列特异性 DNA 结合蛋白与 DNA 结合的主要作用力是( )。（A）离子键（B）氢键（C）疏水键（D）范德华力（E）配位键53 以下是五种由不同序列构成的 DNA 双螺旋，在相同的条件下进行热变性，然后再通过缓慢冷却进行复性。你认为复性最快的序列是( )。（A）ATATATAT（B） AATATTAT（C） AAAATTTA（D）AAAATTTT（E）ATAAATTA54 植物
14、细胞有、动物细胞没有的酶是( )。（A）柠檬酸合酶（B）顺乌头酸酶（C）异柠檬酸裂解酶（D）异柠檬酸脱氢酶（E）苹果酸脱氢酶55 从葡萄糖合成糖原需要消耗的 NTP 是( )。（A）UTP（B） ATP（C） CFP（D）GTP（E）ATP 和 UTP56 葡萄糖的完全氧比大概只有 40的能量被用来合成 ATP，其余 60的能量的去处是( ) 。（A）被还原成 NADH（B）变成了脂肪（C）变成了氨基酸（D）转变成其他有机化合物（E）变成了热57 如果大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 5-外切核酸酶的活性丧失，那么大肠杆菌将( )。（A）更容易发生突变（B）一切正常（C）不能生存（D）能够生存
15、，但复制出来的 DNA 分子含有共阶相连的 RNA（E）对紫外线的照射特别敏感58 RNA 聚合酶 II 最大亚基的 CTD 富含( )。（A）碱性氨基酸（B）酸性氨基酸（C）疏水氨基酸（D）羟基氨基酸（E）GIy59 一种抑制剂能够与核塘体的 E 部位结合，如果将这种抑制剂加到无细胞翻译系统中，那么导致( ) 。（A）翻译不能起始（B）氨酰 -tRNA 不能进入 A 部位（C）肽键不能形成（D）只能合成二肽（E）翻译不受影响60 HaraldZurHausen、FrancoiseBarreSinoussi 和 LucMontagnier 获得了 2008 年诺贝尔医学、生理学的奖。他们的主要
16、贡献是( )。（A）发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致乙肝的 HBV（B）发现了导致疯牛病的朊病毒和导致艾滋病的 HIV（C）发现了导致疯牛病的朊病毒和导致宫颈癌的 HPV（D）发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致艾滋病的 HIV（E）发现了导致疯牛病的朊病毒和导致乙肝的 HBV四、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。61 (北京师范大学 2005 年考研试题)_蛋白具有三股螺旋结构。62 (上海交通大学 2006 年考研试题)肌红蛋白与血红蛋白亚基的三级结构_，但它们的氨基酸序列_；从而，非常不同的_可以规定非常相似的_。63 (上海交通大学 2006 年考研试题)胶原是哺乳动物
17、中含量_的蛋白，它的_间形成氢键。在其中的任一条链内，_一_一_(三种氨基酸)经常连续反复出现。64 (四川大学 2007 年考研试题)_的功能基是催化中最有效、最活泼的，它是构成胰蛋酶、胰凝乳蛋白酶等的电荷中继网氨基酸残基之一，在生理 pH 条件下，既可以作为 H+的受体，也可以作为 H+的供体。65 (四川大学 2007 年考研试题)蛋白质 a、b 和 c(M.W 分别为 20,000、50,000 和100,000)组成的混合涂体，欲用 SephadexG200 分子筛柱层析分离，流动相为磷酸缓冲液。这三种蛋白质从层析柱中先后流出的顺序为_。66 (四川大学 2007 年考研试题)疫球蛋
18、白 G 分子呈 Y 形，含有以二硫键连在一起的 4 条多肽链(即 2 条轻链和 2 条重链)，含有_个抗原结合部位。67 (四川大学 2006 年考研试题)测定肽链内部含有二硫键的方法是_电泳法。68 (哈尔滨工业大学 2007 年考研试题)当氨基酸溶液的 pH=pI 时，氨基酸以_离子形式存在：当 pHpI 时，氨基酸以_离子形式存在。69 (哈尔滨工业大学 2007 年考研试题)维持蛋白质构象的作用力(次级键)有氢键、_、_和范德华力。70 (华东理工大学 2007 年考研试题)不同蛋白质的含_量颇为相近，平均含量为_。71 蛋白质一般在_nm 有最大光吸收，核酸在 _nm 有最大光吸收，
19、小肽在_nm 有最大光吸收。72 根据蛋白质相对分子质量大小分离分析蛋白质的方法主要有_和_。73 催化糖酵解途径中三步不可逆反应的酶分别是_、_和_。74 细胞合成 ATP 的三种手段分别是_、_ 和_。75 在蛋白质翻译过程中有多种蛋白质因子参与，其中属于 G 蛋白的蛋白质因子有_、_、_和_。76 蛋白质的正确折叠受哪些因素的影响?哪些性质可以帮助我们判断蛋白质是否正确折叠?77 AMP-PNP(结构式见图附录 6-1)是 ATP 的结构类似物。 AMP-PNP 可以抑制很多以 ATP 为底物的激酶的活性，却是 RNA 聚合酶的正常底物，请解释原因。判断AMP-PNP 属于什么类型的抑制
20、剂并说明理由。用 AMP-PNP 代替 ATP 参与 RNA聚合酶催化的转录，对转录结果会有什么影响?78 用两组实验大鼠进行试验：第一组每天喂食正庚酸(7：0)作为唯一碳源；第二组喂食正辛酸(8：0) 。一个月之后，第一组大鼠表现得很健康，体重还有增加；第二组无力，因肌肉萎缩而体重减轻。试解释导致这两组大鼠出现这些差异的原因。79 大肠杆菌的 Dam 甲基化酶活性过高或丧失活性都可以导致大肠杆菌突变率提高，为什么?哪一种情形引起的突变率更高，为什么?80 人 GM-CSF 是由 127 个氨基酸组成的生长因子，能够调节成熟的粒细胞和巨噬细胞的生物功能，GM-CSF 能够治疗髓性再生障碍、粒白
21、细胞低下、化学治疗或放射治疗引起的骨髓造血抑制等疾病治疗药物。人 GM-CSFcDNA 编码序列中 GC含量为 815。本实验室拟用大肠杆菌为表达体系，构建重组人 GM-CSF 高效表达菌株，以实现 GM-CSF 的基因工程生产。请你设计实验流程，实现人 GM-CSF的高效表达和验证，并请简要注明各关建流程环节的目的或依据。81 在哺乳动物，许多基因是呈时空特异性表达的，如 Lck 基因在 T 细胞发育的特定时期表达。每一个细胞都含有一个生物体完整的一套基因，为什么这些基因不是在所有的时间在所有的组织细胞中都转录表达，而呈时空特异性转录表达?你认为有哪些主要因素发挥作用。82 进行蛋白质分子
22、SDS-PAGE 电泳分析的目的是什么?进行蛋白质分子 SDS-PAGE 电泳分析时，上样缓冲液中有哪些主要成分?如果分别缺少这些成分，电泳行为会怎样? 请予说明。83 凝胶过滤层析可以用以判断蛋白质分子的大小。本实验室用凝胶过滤分析了三种相对分子质量标准蛋白质，其保留体积分别为 5154ml、646ml、787ml，相对分子质量分别为：ZZ：22KD、Cvto-chromeC：12KD、：BSA：666KD。请问这三种蛋白质的保留体积分别为多少?在上述基础上，我们又用凝胶过滤分析了x 蛋白质及其突变体 X-F25Y(简称 X)。请问如图附录 6-2 层析图中 X 蛋白相对分子质量大约为多少?
23、x的相对分子质量大约是多少 ?为什么对于 x蛋白质，一个氨基酸突变会使得 X 蛋白质相对分子质量发生如此大的变化 ?你能给一个合理的解释吗?84 (西北大学 2004 年考研试题)已知下列氨基酸的等电点：甘氨酸(pI=597) ，天冬氨酸(pI=2 98)，赖氨酸(pI=9 74) ，组氨酸(pI=759)，请列表说明pH=10、pH=21、pH=40 以及 pH=100 时上述氨基酸所带的净电何(用-、+或 0 表示)。85 (西北大学 2004 年考研试题)说明 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、方法及应用。86 (西北大学 2004 年考研试题)简述蛋白质功能的多样性。87 (西北大学 2
24、004 年考研试题)试总结对蛋白质进行分离及纯化的相关技术。研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 4 答案与解析1 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质2 【正确答案】 B【试题解析】 胶原(蛋白)(collagen)是动物结缔组织最丰富的一种蛋白质，它是由原胶原蛋白分子组成。原胶原蛋白是一种具有右手超螺旋结构的蛋白。每个原胶原分子都是由 3 条特殊的左手螺旋的多肽链右手旋转形成的。【知识模块】 蛋白质3 【正确答案】 B【试题解析】 肌红蛋白(myoglobin)是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质，神经质氧饱和曲线为双曲线型。而血红蛋白(hemog
25、lobin)是由含有血红素辅基的 4 个亚基组成的结合蛋白，血红蛋白负责将氧由肺运输到外周组织，它的氧饱和曲线为 S 曲线型。【知识模块】 蛋白质4 【正确答案】 B【试题解析】 谷胱甘肽(GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物。半胱氨酸与甘氨酸间的肽键是由甘氨酸的 -氨基和半胱氨酸的 一羧基缩合而成的；而谷氨酸和半胱氨酸间的肽键是由半胱氨酸的 一氨基和谷氨酸的 -羧基缩合而成的。【知识模块】 蛋白质5 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质6 【正确答案】 B【试题解析】 用 SDSPAGE 电泳法测定蛋白质分子量是根据蛋白质分子的电泳迁移率而定。当分子鼍在 15KD
26、200KD 之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：lgM W=KbX，式中：M W 为分子量，X 为迁移率，k、b 均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。【知识模块】 蛋白质7 【正确答案】 B【试题解析】 蛋白质的一级结构决定了其生物活性，不是二级结构。【知识模块】 蛋白质8 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质9 【正确答案】 B【试题解析】 氨基酸与 2，4-二硝基氟苯反应，首先被 Sanger 用于鉴定多肽或蛋白质的 N 端氨基酸。【知识模块】
27、蛋白质10 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质11 【正确答案】 A12 【正确答案】 A13 【正确答案】 B【试题解析】 同一种激素不可以产生完全相反的生理作用，有拮抗作用的激素可以产生完全相反昀生理作用。14 【正确答案】 B【试题解析】 一分子配体与酶结合后促进另一分子配体与酶结合为正协同效应。所以若限定一种别构酶具有正协同效应，那么此酶正别构效应物的存在将减弱它的正协同效应。相反，此酶的正别构抑制物的存在将增强它的正协同效应。15 【正确答案】 B【试题解析】 甘二醇曾被作为牙膏的添加剂，后来发现它对人体有毒，因为它的毒性来自人体摄入后，会代谢为肾毒性极强的草酸，导致急性肾衰竭症状
28、。16 【正确答案】 B【试题解析】 同源蛋白是指在不同生物体内行使相同或相似功能的蛋白质。虽然所有的丝氨酸蛋白酶都具有相同的催化三元体，但是它们各自可以在同一生物体内具有不同的作用。17 【正确答案】 A18 【正确答案】 B【试题解析】 构成呼吸链的四种复合物中只有复合物、含有铁硫蛋白，复合物不含有铁硫蛋白。19 【正确答案】 A20 【正确答案】 B【试题解析】 G 0 是标准自由能变化，即在标准条件：25 (298K)、1 atm(一个大气压)、反应物和产物的浓度都是 10 molL，所得到的自由能变化。但细胞内不满足这个条件，所以如果一个酶促反应的G 0 是一个大的负值，那么这个反应
29、在细胞内也不一定是一个不可逆反应。21 【正确答案】 A22 【正确答案】 A23 【正确答案】 A24 【正确答案】 B【试题解析】 肝细胞是因为缺少将乙酰乙酸转化为乙酰乙酰-CoA 的酰基化酶而不能利用酮体，而不是因为缺乏硫解酶。25 【正确答案】 A26 【正确答案】 B【试题解析】 原核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶是天冬氨酸转氨甲酰酶；而真核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶是氨甲酰磷酸合成酶 II。27 【正确答案】 A28 【正确答案】 B【试题解析】 在 mRNA 剪切过程中，如内含子中分支点或内含子与外显子拼接处发生碱基的改变，往往会造成剪切点改变，从而导致编码的蛋白质功能异常。
30、29 【正确答案】 B【试题解析】 内含肽被释放后可以作为归巢核酸内切酶，可以介导其编码序列归巢到不含该序列的等位基因中，但该基因还是可以产生有功能的蛋白质产物。30 【正确答案】 A二、不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。31 【正确答案】 A,B,D【知识模块】 蛋白质32 【正确答案】 E【知识模块】 蛋白质33 【正确答案】 E【知识模块】 蛋白质34 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质35 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质36 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质37 【正确答案】 D【知识模块】 蛋白质38 【正确答案】
31、B【知识模块】 蛋白质39 【正确答案】 D【知识模块】 蛋白质40 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质三、单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。41 【正确答案】 D42 【正确答案】 C43 【正确答案】 C44 【正确答案】 D45 【正确答案】 C46 【正确答案】 C47 【正确答案】 A48 【正确答案】 D49 【正确答案】 E50 【正确答案】 A51 【正确答案】 C52 【正确答案】 B53 【正确答案】 A54 【正确答案】 C55 【正确答案】 E56 【正确答案】 E57 【正确答案】 C58 【正确答案】 D59 【正确答案】 D60 【正确答案】
32、 D四、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。61 【正确答案】 胶原【知识模块】 蛋白质62 【正确答案】 相似 差异很大 氨基酸序列 蛋白质三级结构【知识模块】 蛋白质63 【正确答案】 最丰富 三股肽链 Gly Pr0 Hyp【知识模块】 蛋白质64 【正确答案】 组氨酸(或 His)【知识模块】 蛋白质65 【正确答案】 c 、b、 a【知识模块】 蛋白质66 【正确答案】 2【知识模块】 蛋白质67 【正确答案】 对角线【知识模块】 蛋白质68 【正确答案】 兼性 负【知识模块】 蛋白质69 【正确答案】 盐键 疏水键【知识模块】 蛋白质70 【正确答案】 氮 16【知识
33、模块】 蛋白质71 【正确答案】 280 260 23072 【正确答案】 SDSPAGE 凝胶过滤层析73 【正确答案】 己糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶74 【正确答案】 底物水平磷酸化 氧化磷酸化 光合磷酸化75 【正确答案】 IF-2 EF-G EF-Tu RF-376 【正确答案】 (1)影响蛋白质的正确折叠因素有蛋白质本身的一级结构、分子伴侣、二硫键异构酶和脯氨酰顺反异构酶。蛋白质的基本单位为氨基酸，而蛋白质的一级结构指的就是其氨基酸序列，蛋白质会由所含氨基酸残基的亲水性、疏水性、带正电、带负电等等特性通过残基问的相互作用而折叠成立体的三级结构。蛋白质在合成时，分子伴侣可逆地与未
34、折叠肽段的疏水部分结合随后松开，如此重复进行可防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠。分子伴侣也可与错误聚集的肽段结合，使之解聚后，再诱导其正确折叠。分子伴侣对蛋白质分子中二硫键的正确形成，起到重要作用。蛋白质分子中的二硫键与新生肽段的折叠密切相关，对维系蛋白质分子的结构稳定性和功能发挥也有重要作用。二硫键异构酶可以催化二硫键的形成。而脯氨酰顺反异构酶催化正确脯氨酸异构体的形成可以加速蛋白质的折叠。(2)没有正确折叠的蛋白质一般溶解度低、容易发生聚集、活性降低或者完全丧失，也可以通过荧光光谱、圆二色性等物理手段检测。77 【正确答案】 (1)在以 ATP 为底物的激酶催化反应中，被转移的磷酸基团是
35、 磷酸根，即 ATP 中受到亲核进攻的是磷酸根，ADP 为离去基团。AMP-PNP 是ATP 的结构相似物。AMP-PNP 中 和 磷酸基团之间换成了难以断裂的 P-N 键，使得 ADP 成为一个极差的离去基团，导致反应受到抑制。故 AMP-PNP 可以抑制很多以 ATP 为底物的激酶的活性。与激酶不同的是，RNA 聚合酶催化的反应中受到亲核进攻的是 磷酸基团，则即使 AMP-PNP 中 和 磷酸基团之间的 PN 键不同于 AMP，也不会影响到反应，所以 AMP-PNP 是 RNA 聚合酶的正常底物。(2)由于在正常的情况下 RNA 聚合酶以 ATP 为底物，释放出的焦磷酸根很容易在焦磷酸酶的
36、催化下发生水解，释放出大量的自由能，使 RNA 合成成为不可逆反应。如果 RNA 聚合酶以 AMP-PNP 为底物，释放出来的是 PNP，则很难水解，从而不利于 RNA 的合成。用 AMPPNP 代替 ATP 参与 RNA 聚合酶催化的转录将影响 RNA 的合成。78 【正确答案】 正庚酸是奇数脂肪酸，而正辛酸是偶数脂肪酸。奇数脂肪酸通过一氧化产生乙酰一 CoA 和丙二酸单酰-CoA，而偶数脂肪酸通过 一氧化只能产生乙酰-CoA。与乙酰-CoA 不同的是，丙二酸单酰一 CoA 可以转变成糖异生和氨基酸合成的前体草酰乙酸，维持了体内血糖的稳定，使 ATP 的产生正常进行，所以喂食正庚酸的大鼠表现
37、得正常。而喂食正辛酸的大鼠，正辛酸只能通过 -氧化产生乙酰-CoA，然后被彻底氧化分解，不能从乙酰一 CoA 净合成碳水化合物和氨基酸从辛酸合成葡萄糖，为了维持血糖浓度的稳定，肌肉蛋白被分解提高生糖氨基酸怍为糖异生的原料，从而导致肌肉萎缩，体重减轻。因此，导致这两组大鼠出现这些筹异。79 【正确答案】 (1)Dam 甲基化酶可以使 DNA 的 GATC 序列中腺嘌呤 N6 位甲基化，形成 N6-甲基嘌呤。新合成的子代 DNA 分子中，亲代是甲基化的，新合成的链则还没来得及甲基化。根据甲基化程度的不同，错配修复系统就能识别出亲代链和子代链，而当子代链发生错配时，能被识别出来并进行修复。若 Dam
38、 甲基化酶活性过高，会使新合成的子链立刻发生甲基化修饰，由于错配修复系统不能识别甲基化的链，子链上错配的碱基难以被错配修复系统修复而导致大肠杆菌突变率提高。而如果 Dam 甲基化酶没有活性， DNA 复制过程中的亲代链和子代链都不会发生甲基化，于是错配修复系统只能随机地选择一条链进行错配修复的对象而另一条作为修复的模板，若错配系统错误识别了亲代链，以错配的子代链为模板修复亲代链，则大肠杆菌就会发生突变。(2)显然如果 Dam 甲基化酶没有活性时，只要错配修复系统正确识别了子代链，就有可能会被正确修复，而如果 Dam 甲基化酶活性过高，则一定不能被正确修复，故 Dam 甲基化酶活性过高引起的突变
39、率更高。80 【正确答案】 (1)天然人 GM-CSF 成熟基因 5端的碱基含量较高，且编码前几个氨基酸的密码子在大肠杆菌中表达很低。可以在编码成熟蛋白的基因序列前引入EcoR I 酶切位点和启始密码子 ATG，并在不改变蛋白氨基酸顺序的前提下，将核苷酸中的一些 G 和 C 改成 A 和 T，降低了基因 5端的 GC 含量，又使改变后的密码子为大肠杆菌偏爱。以人外周血单核细胞获得的总 RNA 为模板，选择合适的特异性引物，进行 PCR 扩增反应得到修饰完整的人 GM-CSF 成熟肽基因序列。 (2)将扩增的 PCR 产物回收纯化，将人 GM-CSF 片段插入 pMD18T 克隆载体的 EcoR
40、 1/Pst I 酶切位点，转化大肠杆菌 XL 10gold 后提取质粒。用 PCR 反应鉴定含有插入片段的克隆，并挑取含有插入片段的克隆。经 EcoRLPstI 双酶切鉴定后，进行序列分析。 (3)将 PCR 扩增并经测序鉴定成熟肽的人 GM-CSF 基因插入温度诱导型表达质粒pDH，得到表达载体 pDHrhGM-CSF，将 pDHrhGM-CSF 转化入大肠杆菌。(4)挑选克隆，接种培养并回收菌体，进行 SDS-PAGE 凝胶电泳分析。(5)Western blot 分析或活性测定。81 【正确答案】 在多细胞生物从受精卵到组织、器官形成的各个不同发育阶段，相应基因严格按一定时间顺序开启或
41、关闭，表现为与分化、发育阶段一致的时间性，而呈时间特异性表达。在多细胞生物个体某一发育、生长阶段，同一基因产物在不同的组织器官表达多少是不一样的；在同一生长阶段，不同的基因表达产物在不同的组织、器官分布也不完全相同。在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现，呈空间特异性表达。发挥作用的主要因素：染色质的结构。染色质结构在特定组织中的开放，则决定了时空间特异性表达；增强子沉默子的活化。增强子是远离转录起始点，决定基因的时空特异性表达，而某些基因含有负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，沉默子可以对基因转录起阻遏作用；多个转录因子的相互协同作用。转录因子能与真核基因启动子区域中的
42、顺式作用元件发生特异性结合，通过它们之间以及与其他相关蛋白之间的相互作用，激活或抑制转录，从而保证目的基因以特定的强度、在特定的时间与空间表达；环境的调控。有一些基因表达极易受环境变化的影响，在特定的环境信号刺激下表现为开放或关闭，从而在特定的时空下表达；翻译。基因表达就是基因转录及翻译的过程，所以翻译对时空特异性表达也发挥着作用。82 【正确答案】 (1)进行蛋白质分子 SDSPAGE 电泳目的是分离蛋白质，也可以测定蛋白质分子相对分子质量的大小。(2)上样缓冲液中的主要成分有 Tris-HCl、甘油、 SDS、-巯基乙醇、溴酚蓝、去离子水。Tris-HCl 为缓冲溶液，溶解蛋白质，调节样品
43、的 pH 值，缺少它不能使样品处在适当的 pH 环境中是蛋白质在电场中浓缩，得不到电泳条带；甘油可以加大样品密度，使样品密度大于 TAE，从而沉降到点样孔中，缺少它会使样品飘出点样孔；SDS 主要是促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚合酶会结合在 DNA 双链上影响它的迁移速率，缺少它提取的蛋白质将会降解；-巯基乙醇催化蛋白质解聚，解离成亚基或单个肽链，缺少它蛋白质分子：不能打开，仍呈聚体状态或者球状结构；溴酚蓝起到指示的作用，显示电泳的进程，以便适时终止电泳，缺少它将不能指示电泳进程，不知何时终止电泳.83 【正确答案】 凝胶过滤层析是利用具有网状结构的凝胶颗粒作为分子筛，根据被分离物质的分子大
44、小不同来进行分离的方法。当蛋白混合物溶液通过层析柱时，大分子物质被排除在凝胶颗粒外部，进入凝胶颗粒间的缝隙，用洗脱缓冲液洗脱时流出的速度快，先被分离出来；小分子物质能进入凝胶颗粒微孔内部，洗脱时流出的速度慢，后被分离出来。将几种已知的不同相对分子质量的蛋白质混合液经凝胶过滤层析分离，其保留体积(V e)对相对分子质量的对数 (lgMr)作图得到一条直线，并成反比，所以洗脱体积越大的，相对分子质量越小。因此，相对分子质量为666KD 的 BSA 洗脱体积为 5154ml；相对分子质量为 22KD 的 ZZ 洗脱体积为646ml；相对分子质量为 12KD 的 Cytochrome C 洗脱体积为 787ml。 由上面三组数据，留体积(V e)对相对分子质量的对数(lgM r)作图，可得到洗脱体积与相对分子质量的线性关系式：V e=11496353461gM r。由图可得出 x 的洗脱体积约为366ml，X的洗脱体积约为 643ml，则由关系式可算出，X 的相对分子质量约为 1648KD，X的相对分子质量约为 271KD。 对于 X蛋白质，一个氨基酸突变会使得 X 蛋白质相对分子质量发生如此大的变化，是因为 x 是聚体形式，相对
