1、SC 1037-2000前言为了鉴定舫，鉴别妨和其他物种，保护和保存妨原种的优良性状及种质，避免苗种生产中种质混杂和性状退化，开展妨种质的有效监测，特制定本标准。本标准的附录A是提示的附录。本标准由农业部渔业局提出。本标准由中国水产科学研究院长江水产研究所归口。本标准起草单位:华中农业大学水产学院口本标准主要起草人:熊传喜、谢从新、周洁。中华人民共和国水产行业标准舫SC 1037-2000Black bream范围本标准给出了舫(Megalobrama skolkovii Dybowsky)的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性，以及检测方法。本标准适用于纺的种质鉴定。2引用标准下列标准所
2、包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 16874-1997方正银脚学名与分类3.2学名纺(Megalobrama skolkovii Dybowsky),注:原名三角纺。分类位置鲤形目(Cypriniformes),鲤科(Cyprinidae), M亚科(Cultrinae),妨属(Megalobrama),主要形态构造特征4.1外部形态特征4.1-1外形体高而侧扁，呈菱形。腹棱自腹鳍基部至肛门。头短小，口裂斜。上下领等长，上领具有黄褐色坚硬的角质缘。背鳍位于身体最高
3、处，其末根不分枝，鳍条为一粗壮的硬刺。背鳍起点位于腹鳍起点稍后方之上，至吻端较至尾柄基部近。胸鳍末端接近或达到腹鳍基部。誉鳍基部长，无硬刺。臀鳍起点在背鳍基部末端正下方。纺的外形见图1,4.1.2可数性状4.1.2.1背鳍鳍式:D. iii, 7 ,4. 1.2.2臀鳍鳍式:A. iii, 24-30，分枝鳍条多数为26-28,4.1-2.3侧线鳞数:50-58，多数为53-57,4.1.2.4第一鳃弓外侧鳃耙数为17-22，内侧为2630,4.1.3可量性状体长11.058.0 cm的个体，实测性状比例值如下:体长为体高的2.2-2.5倍，为头长的5. 2三竺 ,)1熨生些丝二. 3壑71巡
4、鱼 7.竺9.0造 ,A长为吻长的“一“倍，为眼径的4.一中华人民共和国农业部2000一02-22批准2000-04一01实施SC 1037一20004. 6倍，为眼间距的2. 1-2.3倍。图1舫的外形图4.2内部构造特征4.2.1缥缥3室，前室最大，约为中室的2倍(体长150 mm以下的个体前室比中室小)，中室为圆锥形，后室细小。4.2.2下咽齿锥齿状。齿式2. 4. 5/4. 4. 2，少数为2. 4. 4/5. 4. 2,4.2.3脊椎骨脊椎骨总数:4+34-36.4.2.4肋骨肋骨1。对。4.2.5腹膜腹膜为白色。5生长与派殖5，生长生长速度依生活环境而异，长江中游湖泊中纺的生长速度
5、实测平均值见表1,表1舫各年龄鱼的休长和休雷穷洲平均值年龄，龄1一234”一体长，cm12.3 一44. 3一55. 057.1体重,g一35.64161 026 一2 082一2 416纺的生长方程和体长与体重关系式见附录A(提示的附录)。5.2繁殖5.2.1性成熟年龄:雌、雄鱼性成熟年龄均为3龄。5.2.2性成熟个体性腺每年成熟一次，一次产卵。卵粘性。5.2.3怀卵量，长江中游湖泊中不同年龄的妨个体平均怀卵量见表2,表2纺各年龄组鱼的个体平均怀卵量年龄.龄34一5体重，91 4402 0902 560绝对怀卵量，粒178 981322 418一相对怀卵量，粒/9123153148SC 10
6、37一20006遗传学特性6.1细胞遗传学特性体细胞染色体数2n=48。组型公式:14 m+26 sm+8 st;染色体臂数(NF):88,染色体组型见图2,xx叼材书睁书耳洲洲林郑翻袱翻甘介朴助朋筋娜从拟如仙朴“图2纺染色体组型图62生化遗传学特性舫肝组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳酶谱见图3.同工酶酶带扫描图见图4，同工酶酶带的活性强度见表3。二HO曰图3纺肝组织LDH同工酶电泳酶谱图图4纺肝组织LDH同工酶酶带扫描图SC 1037一2000表3妨肝组织LDH同工酶酶带活性强度酶带LDH,LDH,LDH,LDH,LDH,LDH,LDH,LDH,LDH,相对迁移率。78一。.7、一一0.
7、71一0.680.65一。.62一。.59一。56一0.53活性强度，%3.26一4.52一3.622.17一3.17一3.17一3. 62一3.62一2.71酶带LDH,oLDHLDHLDH,LDHLDHLDHLDH相对迁移率0.490. 470. 44一0.36一0. 32。.28一0.140.11活性强度，%6. 337.2439. 37一2.2。一1.812. 265. 434.527检测方法7.1年龄的鉴定了.1.1取鳞部位体侧背鳍基部下方与侧线上方之间。7.1.2操作步骤a)取下背侧鳞片，保存在鳞片袋中;b)将保存在鳞片袋中的鳞片取出，放在培养皿中清洗干净，剔除再生鳞;c)将清洗好
8、的鳞片按在鱼体上的自然次序夹在两块玻片之间，贴上标签，两端用透明胶带封好;d)在解剖镜或投影仪下观察鳞片的年轮，根据年轮数确定年龄。7.2繁殖力的测定在繁殖季节前，取出性成熟雌鱼卵巢(N期)，称重后，在前、中、后部各称取1.0g卵巢组织，用10%福尔马林溶液固定一周后，在解剖镜下分别计数卵粒，求得平均卵粒数。卵巢中所含的全部卵粒数即为绝对怀卵量;单位体重(9)所含的卵粒数为相对怀卵量。7.3染色体的检测7.3.1标本制备采用体内注射植物血凝聚素(PHA)肾细胞培养及空气干操的方法制片，吉姆萨(Giemsa )染色。吉姆萨染色液的配制按GB/T 16874-1997中附录C的规定执行。了3.2测
9、定染色体数目在显微镜油镜下观察，计数100个以上清晰、分散良好的中期分裂相的染色体数目，测定染色体数。7.13组型分析选择部分最佳中期分裂相，进行显微摄影，按放大照片剪贴配组，进行染色体组型分析。染色体的形态类别，按下列规定划分:即臂比1.0-1.7为中部着丝粒染色体(m组);1.71-3. 0为亚中部着丝粒染色体(sm组);3.1-7. 0为亚端部着丝粒染色体(st组);7.1以上为端部着丝粒染色体(t组)。m组、sm组染色体臂数为2;st组、t组染色体臂数为1.7.4生化遗传分析7.4-.1样品的采集与保存活体解剖，放血后取肝脏组织，放人编号的小塑料袋中，液氮中保存。运回实验室后，低温(-
10、250c)冰箱保存。7.4.2样品制备样品按1 ; lo(m/v)的比例加人20%的蔗搪溶液，置于冰浴的玻璃匀浆器中制成匀浆，在4左右、15 OOOr/min条件下离心30 min。取上清液置冰箱中保存备用。7.4.3电泳分离用垂直管聚丙烯酞胺凝胶电泳。分离胶浓度为7. 5 %，浓缩胶浓度为2.5%，电极缓冲液为三经甲基氨基甲烷Tris )-甘氨酸缓冲系统(pH8. 3 )，其配制方法按GB/T 16874的规定执行。电泳在5C左右进行2.5-3 h，起始电流为1 mA/管，样品进人分离胶后，电流加大为2 mA/管。加样量为50 pL/管。sc 1037一2000电泳结束后，放人预先配制好并在
11、37C恒温箱中保温的染色液(染色液配方见表5)中染色。表5染色液配方1. 5 molTris-HC1染色缓冲液(pH-8.3),.LNo lmg1%抓化硝基四盆哇蓝，mL吩嘴甲两硫酸盐mg1 mol乳酸钠(pH= 7. 0),mLVim*mL15303010.510957.4.4扫描测定用激光扫描仪对电泳图谱进行扫描。7.45酶带相对迁移率和活性强度的计算方法a)酶带相对迁移率是原点至酶带中心距离与原点至指示带距离的比值;b)各酶带的活性强度按式(1)计算:X100(1)。布式中:a某一酶带的活性强度，%;S-酶带扫描图该酶带峰的面积，mmA-酶带扫描图全部峰的面积I mm2e383SC 1037一2000附录A(提示的附录)生长方程和体长与休，关系式A1体长和体皿生长方程体长和体重生长方程见式(A1)、式(A2):LW,=62.61一e-o“，“一。，。，3 062. 91一e-o“，“一。112 .) 12. sea s(A1)(A2)乌私t式中:t龄时鱼体体长t龄时鱼体体重,cm;9;自然对数的底鱼的年龄，龄。体长与休11关系式A2体长与体重关系式见式(A3):W=0. 042 39 L-o(A3)式中:鱼的体重，9;鱼的体长，cm,WL384
