1、September 2017DEUTSCHE NORM Preisgruppe 13DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet.ICS 07.100.30!%apE“2627734www.din.deDIN EN ISO 21528-1Alleinverkauf der Normen durch B
2、euth Verlag GmbH, 10772 BerlinErsatz frDIN ISO 21528-1:2009-12www.beuth.deGesamtumfang 28 SeitenDDIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL)Mikrobiologie der Lebensmittelkette Horizontales Verfahren fr den Nachweis und die Zhlung von Enterobacteriaceae Teil 1: Nachweis vo
3、n Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017); Deutsche Fassung EN ISO 21528-1:2017 Microbiology of the food chain Horizontal method for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae Part 1: Detection of Enterobacteriaceae (ISO 215281:2017); German version EN ISO 215281:2017 Microbiologie de la chan
4、e alimentaire Mthode horizontale par la recherche et le dnombrement des Enterobacteriaceae Partie 1: Recherche des Enterobacteriaceae (ISO 215281:2017); Version allemande EN ISO 215281:2017 DIN EN ISO 21528-1:2017-09 2 Nationales Vorwort Dieses Dokument (EN ISO 21528-1:2017) wurde vom Technischen Ko
5、mitee ISO/TC 34 Food products“ in Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren“ erarbeitet, dessen Sekretariat von DIN (Deutschland) gehalten wird. Das zustndige deutsche Gremium ist der Arbeitsausschuss NA 057-01-06 AA Mikrobiologie der Lebensmitt
6、elkette“ im DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL). Fr die in diesem Dokument zitierten internationalen Dokumente wird im Folgenden auf die entsprechenden deutschen Dokumente hingewiesen: ISO 6887 (alle Teile) siehe DIN EN ISO 6887 (alle Teile) ISO 7218 siehe DIN EN
7、ISO 7218 ISO 11133 siehe DIN EN ISO 11133 ISO 13307 siehe DIN EN ISO 13307 ISO 17468 siehe DIN EN ISO 17468 ISO 17604 siehe DIN EN ISO 17604 ISO/TS 17728 siehe DIN CEN ISO/TS 17728 (DIN SPEC 10053) ISO 18593 siehe DIN ISO 18593 nderungen Gegenber DIN ISO 21528-1:2009-12 wurden folgende nderungen vor
8、genommen: a) das MPN-Verfahren wurde zu einem informativen Anhang A; b) der Voranreicherungsschritt in BPW, gefolgt von Anreicherung in EE-Bouillon, wurde zu Anreicherung in BPW abgendert, und die Besttigung erfolgt jetzt in OF-Glukose-Medium und nicht mehr mit Glukose-Agar; c) Leistungsprfung zur Q
9、ualittssicherung der Nhrmedien wurde hinzugefgt; d) Leistungsmerkmale fr dieses Verfahren wurden zu Anhang C hinzugefgt. Frhere Ausgaben DIN ISO 21528-1: 2009-12 DIN EN ISO 21528-1:2017-09 3 Nationaler Anhang NA (informativ) Literaturhinweise DIN CEN ISO/TS 17728 (DIN SPEC 10053), Mikrobiologie der
10、Lebensmittelkette Probenahmetechniken fr die mikrobiologische Untersuchung von Lebensmittel- und Futtermittelproben DIN EN ISO 6887 (alle Teile), Mikrobiologie der Lebensmittelkette Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologisch
11、e Untersuchungen DIN EN ISO 7218, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Allgemeine Anforderungen und Leitlinien fr mikrobiologische Untersuchungen DIN EN ISO 11133, Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprfung von Nhrme
12、dien DIN EN ISO 13307, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Primrproduktion Probenahmetechniken DIN EN ISO 17468, Mikrobiologie der Lebensmittelkette Technische Anforderungen und Leitfaden zur Einfhrung oder berarbeitung eines genormten Referenzverfahrens DIN EN ISO 17604, Mikrobiologie
13、 der Lebensmittelkette Probenahme von Schlachttierkrpern zur mikrobiologischen Untersuchung DIN ISO 18593, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren fr Probenahmetechniken von Oberflchen mittels Abklatschplatten und Tupfer DIN EN ISO 21528-1:2017-09 4 Leerseite EUROPIS
14、CHE NORM EUROPEAN STANDARD NORME EUROPENNE EN ISO 21528-1 Juli 2017 ICS 07.100.30 Deutsche Fassung Mikrobiologie der Lebensmittelkette Horizontales Verfahren fr den Nachweis und die Zhlung von Enterobacteriaceae Teil 1: Nachweis von Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017) Microbiology of the food chai
15、n Horizontal method for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae Part 1: Detection of Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017) Microbiologie de la chane alimentaire Mthode horizontale par la recherche et le dnombrement des Enterobacteriaceae Partie 1: Recherche des Enterobacteriaceae (ISO 21
16、528-1:2017) Diese Europische Norm wurde vom CEN am 27. April 2017 angenommen. Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschftsordnung zu erfllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denen dieser Europischen Norm ohne jede nderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist. Auf
17、 dem letzten Stand befindliche Listen dieser nationalen Normen mit ihren bibliographischen Angaben sind beim CEN-CENELEC-Management-Zentrum oder bei jedem CEN-Mitglied auf Anfrage erhltlich. Diese Europische Norm besteht in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Franzsisch). Eine Fassung in
18、einer anderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch bersetzung in seine Landessprache gemacht und dem Management-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgar
19、ien, Dnemark, Deutschland, der ehemaligen jugoslawischen Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, der Schweiz, Serbien, der Slow
20、akei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, der Trkei, Ungarn, dem Vereinigten Knigreich und Zypern. EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMIT EUROPEN DE NORMALISATION CEN-CENELEC Management-Zentrum: Avenue Marnix 17, B-1000 Brssel 2017 CEN Alle Rechte der
21、 Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten. Ref. Nr. EN ISO 21528-1:2017 D EN ISO 21528-1:2017 (D) 2 Inhalt Seite Europisches Vorwort 3 Vorwort 4 Einleitung 5 1 Anwendungsbereich . 6 2 Normative Verweisungen . 6 3 Begrif
22、fe 7 4 Kurzbeschreibung . 7 4.1 Anreicherung in nicht selektivem Medium 7 4.2 Isolierung und Auswahl fr die Besttigung . 7 4.3 Besttigung 7 5 Verdnnungsmittel, Nhrmedien und Reagenzien . 7 6 Ausrstung und Verbrauchsmaterialien 8 7 Probenahme 8 8 Vorbereitung der Untersuchungsprobe 9 9 Durchfhrung 9
23、9.1 Allgemeines . 9 9.2 Prfmenge und Erstverdnnung . 9 9.3 Anreicherung 9 9.4 Isolierung und Auswahl zur Besttigung 9 9.4.1 Isolierung 9 9.4.2 Auswahl der Kolonien fr die Besttigung . 9 9.5 Subkultivierung ausgewhlter Kolonien 10 9.6 Biochemische Besttigungsuntersuchungen 10 9.6.1 Oxidase-Reaktion 1
24、0 9.6.2 Fermentationsprfung 10 10 Angabe der Ergebnisse 10 11 Przision . 11 11.1 Ringversuch . 11 11.2 Empfindlichkeit 11 11.3 Spezifitt . 11 12 Untersuchungsbericht . 11 13 Qualittssicherung 11 (informativ) Zhlung mittels MPN-Verfahren 12 Anhang A(normativ) Nhrmedien und Reagenzien . 15 Anhang B(in
25、formativ) Untersuchungen zur Verfahrensvalidierung und Leistungsmerkmale . 21 Anhang CLiteraturhinweise . 24 DIN EN ISO 21528-1:2017-09 EN ISO 21528-1:2017 (D) 3 Europisches Vorwort Dieses Dokument (EN ISO 21528-1:2017) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 Food products“ in Zusammenarbeit mit dem
26、 Technischen Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren“ erarbeitet, dessen Sekretariat von DIN gehalten wird. Diese Europische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Verffentlichung eines identischen Textes oder durch Anerkennung bis Januar 2018, und
27、etwaige entgegenstehende nationale Normen mssen bis Januar 2018 zurckgezogen werden. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berhren knnen. CEN ist nicht dafr verantwortlich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. Dieses Dok
28、ument wurde im Rahmen eines Normungsauftrages erarbeitet, den die Europische Kommission und die Europische Freihandelszone dem CEN erteilt haben. Entsprechend der CEN-CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden Lnder gehalten, diese Europische Norm zu bernehmen: Belgi
29、en, Bulgarien, Dnemark, Deutschland, die ehemalige jugoslawische Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, Schweiz, Serbien, Slowakei,
30、 Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Trkei, Ungarn, Vereinigtes Knigreich und Zypern. Anerkennungsnotiz Der Text von ISO 21528-1:2017 wurde von CEN als EN ISO 21528-1:2017 ohne irgendeine Abnderung genehmigt. DIN EN ISO 21528-1:2017-09 EN ISO 21528-1:2017 (D) 4 Vorwort ISO (die Internationale
31、 Organisation fr Normung) ist eine weltweite Vereinigung von Nationalen Normungsorganisationen (ISO-Mitgliedsorganisationen). Die Erstellung von Internationalen Normen wird normalerweise von ISO Technischen Komitees durchgefhrt. Jede Mitgliedsorganisation, die Interesse an einem Thema hat, fr welche
32、s ein Technisches Komitee gegrndet wurde, hat das Recht, in diesem Komitee vertreten zu sein. Internationale Organisationen, staatlich und nicht-staatlich, in Liaison mit ISO, nehmen ebenfalls an der Arbeit teil. ISO arbeitet eng mit der Internationalen Elektrotechnischen Kommission (IEC) bei allen
33、elektrotechnischen Themen zusammen. Die Verfahren, die bei der Entwicklung dieses Dokuments angewendet wurden und die fr die weitere Pflege vorgesehen sind, werden in den ISO/IEC-Direktiven, Teil 1 beschrieben. Im Besonderen sollten die fr die verschiedenen ISO-Dokumentenarten notwendigen Annahmekri
34、terien beachtet werden. Dieses Dokument wurde in bereinstimmung mit den Gestaltungsregeln der ISO/IEC-Direktiven, Teil 2 erarbeitet (siehe www.iso.org/directives). Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berhren knnen. ISO ist nicht dafr verantwortl
35、ich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. Details zu allen whrend der Entwicklung des Dokuments identifizierten Patentrechten finden sich in der Einleitung und/oder in der ISO-Liste der empfangenen Patenterklrungen (siehe www.iso.org/patents). Jeder in diesem Dokument verw
36、endete Handelsname wird als Information zum Nutzen der Anwender angegeben und stellt keine Anerkennung dar. Eine Erluterung der Bedeutung ISO-spezifischer Benennungen und Ausdrcke, die sich auf Konformittsbewertung beziehen, sowie Informationen ber die Beachtung der Grundstze der Welthandelsorganisa
37、tion (WTO) zu technischen Handelshemmnissen (TBT, en: Technical Barriers to Trade) durch ISO enthlt der folgende Link: www.iso.org/iso/foreword.html. Dieses Dokument wurde vom Europischen Komitee fr Normung (CEN), Technischen Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren, in Zusammen
38、arbeit mit dem Technischen Komitee ISO/TC 34 Food products, Unterkomitee SC 9 Microbiology in bereinstimmung mit der Vereinbarung ber technische Zusammenarbeit zwischen ISO und CEN (Wiener Vereinbarung) erarbeitet. Diese zweite Ausgabe ersetzt die erste Ausgabe (ISO 21528-1:2004), die technisch bera
39、rbeitet wurde. Die wesentlichen nderungen sind: das MPN-Verfahren wurde zu einem informativen Anhang A; der Voranreicherungsschritt in BPW, gefolgt von Anreicherung in EE-Bouillon, wurde zu Anreicherung in BPW 7 abgendert, und die Besttigung erfolgt jetzt in OF-Glukose-Medium und nicht mehr mit Gluk
40、ose-Agar; die Leistungsprfung zur Qualittssicherung der Nhrmedien wurde hinzugefgt; die Leistungsmerkmale fr dieses Verfahren wurden zu Anhang C hinzugefgt. Eine Liste aller Teile der Normenreihe ISO 21528 ist auf der ISO-Internetseite zu finden. DIN EN ISO 21528-1:2017-09 EN ISO 21528-1:2017 (D) 5
41、Einleitung Dieses Dokument soll eine allgemeine Anleitung fr die Untersuchung von Produkten bereitstellen, die nicht in bereits vorhandenen Internationalen Normen behandelt werden. Es ist fr Organisationen bestimmt, die mikrobiologische Untersuchungsverfahren fr die Anwendung bei Lebens- oder Futter
42、mitteln erarbeiten. Aufgrund der groen Vielfalt an Produkten in diesem Anwendungsbereich sind diese Leitlinien nicht unbedingt bis ins Detail fr bestimmte Produkte geeignet, fr manche kann die Anwendung anderer Verfahren notwendig sein. Dennoch ist zu hoffen, dass stets versucht wird, die vorliegend
43、en Leitlinien so weit wie mglich anzuwenden und dass Abweichungen nur dann vorgenommen werden, wenn es aus technischen Grnden absolut notwendig ist. Die wesentlichen im Vorwort aufgefhrten nderungen, die im Vergleich zu ISO 21528-1:2004 in dieses Dokument eingebracht wurden, werden als erheblich bet
44、rachtet (siehe ISO 17468). Die Harmonisierung von Untersuchungsverfahren kann nicht sofort erfolgen. Fr bestimmte Produktgruppen knnen auerdem bereits Internationale Normen und/oder Nationale Normen bestehen, die diesem horizontalen Verfahren nicht entsprechen. Es ist jedoch anzustreben, solche Norm
45、en bei einer berarbeitung an dieses Dokument anzupassen, so dass es sich bei den noch verbleibenden Abweichungen von diesem horizontalen Verfahren schlussendlich nur um solche mit gut etablierten technischen Grnden handelt. DIN EN ISO 21528-1:2017-09 EN ISO 21528-1:2017 (D) 6 WARNUNG Um die Gesundhe
46、it von Laborpersonal sicherzustellen, ist es unerlsslich, dass Untersuchungen zum Nachweis von Enterobacteriaceae nur in ordnungsgem ausgestatteten Laboratorien unter der Aufsicht eines erfahrenen Mikrobiologen vorgenommen werden und dass das gesamte bebrtete Material mit grter Sorgfalt entsorgt wir
47、d. Personen, die dieses Dokument anwenden, sollten mit der blichen Laborpraxis vertraut sein. Dieses Dokument erhebt nicht den Anspruch, dass alle mit seiner Anwendung verbundenen Sicherheitsaspekte angesprochen werden. Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, angemessene Sicherheits- und Gesund
48、heitsschutzmanahmen zu treffen. 1 Anwendungsbereich Dieses Dokument legt ein Verfahren mit Anreicherung zum Nachweis von Enterobacteriaceae fest. Es gilt fr Produkte, die fr den menschlichen Verzehr oder als Futtermittel bestimmt sind sowie Umgebungsproben im Bereich der Primrproduktion, der Herstel
49、lung von Lebensmitteln und beim Umgang mit Lebensmitteln. Das Verfahren ist anwendbar wenn davon auszugehen ist, dass die gesuchten Mikroorganismen einer Wiederbelebung durch Anreicherung bedrfen und wenn die gesuchte Anzahl voraussichtlich unter 100 je Milliliter oder je Gramm der Untersuchungs-probe liegt. Eine Beschrnkung der Anwendbarkeit di
