1、ICS 65.020 B 15 DB13 河北省地方标准 DB13/T 1731 2013 西瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规范 Identification rule of resistance to fusarium oxysporum f.sp. niveum on watermelon seedling 2013- 05-27 发布 2013- 06-15 实施 河北省质量技术监督局 发布 DB13/T 1731 2013 I 前 言 本标准按 照 GB/T 1.1-2009给出的 规定起草。 本标准由河北省农林科学院提出 。 本标准 起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。 本标准主要起草
2、人： 孔令晓、纪莉景、王连生、栗秋生、王翠霞。 DB13/T 1731 2013 1 西瓜抗枯萎病苗期鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了 西瓜抗枯萎病苗期鉴定的术语和定义、苗期抗性鉴定方法、 抗性标准 和评价报告。 本标准适用于西瓜品种（系）和种质资源对枯萎病苗期抗性鉴定 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）适用于本标准。 NY/T 5111-2002 无公害食品 西瓜 生产技术规程 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本 文件 。 3.1 苗期抗性鉴定 指 利
3、用接种体 在西瓜种植之前在土壤中进行接种，出苗后通过幼苗发病率 来评价 品种（系） 对枯萎病的抗病性。 3.2 土壤夹心接种法 指土壤接种病原菌的一种方法，首先在营养钵底部加入一层灭菌基质，再加入一层混有一定浓度接种体的基质，播种后再覆盖一层灭菌基质。 4 苗期抗性鉴定方法 4.1 对照品种的选择 选择对西瓜枯萎病抗感程度不同的品系卡红和蜜宝分别作为抗、感对照，或者根据需要选择与抗、感对照抗性一致的主栽品种作为对照。 4.2 菌株的选择原则 作为抗性种质资源鉴定 ，选择西瓜枯萎病菌 0号、 1号和 2号 3个生理小种的混合菌株进行接种；作为品种（系）抗性鉴定，选择与被测品种适合栽培区域一致的优
4、势生理小种的 3个菌株。 4.3 接种体的准备 DB13/T 1731 2013 2 按照 4.2所述的原则选取接种菌株，将选定的菌株活化后接种到 马铃薯葡萄糖培养液中， 26 170rpm振荡培养约 5d，用血球计数板计数，将不同菌株的分生孢子悬浮液调至相同浓度，取等体积的不同菌株的分生孢子悬浮液混合均匀，用于土壤接种。 4.4 种子消毒催芽 用于 鉴定 的西瓜 种子在播种前用 5%次氯酸钠 消毒 10min，清水冲洗干净 , 置于 30 32的恒温 培养箱 中保湿、催芽，待 胚芽 露白后播种。 4.5 接种方法 采用土壤夹心接种法，育苗土为 无菌基质（沙子与 蛭石按 1:1混合 后， 12
5、1高压 湿热 灭菌 45min） ，先称取 50%的基质铺于营养钵底层，再称取 30%的基质加入配好的分生孢子悬浮液， 土壤 接菌浓度 为 5 105个孢子 /克土 （按照全部基质重量计算），充分混合均匀后铺入营养钵的中间， 然后浇水，浇水量为基质重量的 25%，待水全部渗入基质后， 播种西瓜种子 ， 最后 覆土 ，覆土量为基质总量的 20%，每品种 4次重复，每重复 10株，置于 20 28 、光照强度 8000Lux 10000Lux， 12h光暗交替 的温室中培养。 4.6 病害调查和数据处理 出苗后 10d 15d开始发病，感病幼苗顶端呈失水状，子叶和叶片萎蔫，茎基部萎缩、变褐、猝倒、
6、枯死。当感病对照品种的病株率达到 80.0%时，开始调查各品种的发病株数，按式 1计算病株率。 病 株率（ %） = （病株数 /总株数） 100 (1) 5 抗性标准 抗性评价标准如下： a) 高抗 （ HR） ： 病株率 小于等于 20 %； b) 中抗 （ MR） ： 病株率 21% 50%； c) 轻抗 （ LR）：病株率 51% 80%； d) 感病 （ S） ： 病株率 大于 80%。 6 评价报告 根据抗性评价结果， 参照附录 B出具参加鉴定西瓜品种（系）抗性评价报告。 DB13/T 1731 2013 3 A A 附 录 A （规范性附录） 西瓜 枯萎病苗期抗性鉴定调查表 表 A.1 西瓜枯萎病苗期抗性鉴定调查表 品种 重复 总株数 发病株数 病株率（ %） 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 DB13/T 1731 2013 4 B B 附 录 B （规范性附录） 西瓜 枯萎病苗期抗性鉴定评价报告 B.1 西瓜枯萎病苗期抗性鉴定评价报告 品种（系）名称 编号 样品数量 评价时间 评价方法 鉴定结果 评价人（签字）： 审核（签字）： 年 月 日 年 月 日 _
