1、ICS 65.020 B 15 DB11 北京市地方 标准 DB 11/T 1129 2014 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Technical regulation for applying of biocontrol production Clostera anachoreta (Denis & Schiffermler) Granulosis Virus 2014 - 11 - 05发布 2015 - 03 - 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1129 2014 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由北京市园林绿化局
2、提出并归口。 本标准由北京市园林绿化局组织实施。 本标准起草单位：北京市西山试验林场、北京市林业保护站。 本标准主要起草人：梁洪柱、陈倩、周荣伍、颜容、宁少华、张玉博。 DB11/T 1129 2014 1 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 1 范围 本标准规定了杨扇舟蛾颗粒体病毒（ Clostera anachoreta (Denis & Schifferm ller) Granulosis Virus，简称 CaGV）的防治对象、防治适期、使用剂量、施用方式、效果调查方 法 。 本标准适用 于北京 地区利 用杨扇舟蛾颗粒体病毒防治杨扇舟蛾 幼虫 。 2 术语和定义 下列术语和
3、定义 适用 于本 文件。 2.1 杨扇舟蛾 Clostera anachoreta (Denis & Schifferm ller) 异名： Pygaera anachoreta pallida Staudinger， Pygaera mahatma Bryk。 别名： 白杨 天社 蛾、 白杨 灰天社 蛾、杨 树天社 蛾、 小叶杨 天社 蛾。 属鳞翅目 Lepidopera舟蛾 科Notodontidae 。 危害 杨属 Polulus和柳属 Salix植物 。 识别特征参见附录 A。 2.2 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Clostera anachoreta (Denis & Schifferm l
4、ler) granulosis virus 一种具有较高宿 主特异性 的昆虫 病毒。 2.3 多角体 polyhedral inclusion body（PIB ） 包埋病毒粒 子的 包涵 体， 是表示 病毒 数量的单位。 2.4 制剂 pesticide perparation 所制成 的某一含 量和某一 用途的 产品 。 3 CaGV制剂的应用 3.1 防治对象 杨扇舟蛾 幼虫 。 DB11/T 1129 2014 2 3.2 制剂准备 参见附录 B。 3.3 防治适期 1龄2 龄低龄幼虫 期防治 为最佳 。 每年物候差异较大， 以当年各代虫情预测预报为 准。 在 北京 地区 ，正常年份
5、，第1代低龄幼虫在5 月上中旬；第 2代低龄幼虫在 6月中下旬；第 3代低龄幼虫在 7月 末8 月上旬；第 4代低龄幼虫在 8月末 9 月上旬 。 3.4 使用剂量 防治低龄幼虫， 每公顷 用3.7510 11 多角 体（ PIB） ； 防治其他 龄期 幼虫，用量加倍 ， 即 每公顷 用 7.5 10 11 PIB。 3.5 施用方式 杨扇舟蛾颗粒体病毒 为胃 毒剂，使用 时应均匀喷洒到 树叶上 。具 体使用方 法见表 1。 表1 杨扇舟蛾颗粒体病毒制剂施用方式 喷雾类型 地面喷雾/ 飞机喷雾 低龄幼虫 稀释倍数 其他龄期幼虫 稀释倍数 常量喷雾 地面喷雾 1000 500 飞机喷雾 30 1
6、5 低 量 喷雾 地面喷雾 100 50 飞机喷雾 10 4 超 低 容量喷雾 地面喷雾 4 1.5 4 效果调查 4.1 调查内容 检 查 虫口 减退率 和成 灾率 ，以此来 表示 防治效果。 4.2 调查时间 制 剂 喷洒后 第15d 调查 一次。 4.3 调查方法 在幼虫 发生 期， 针对杨扇舟蛾危害 的杨 属和柳属树 木的树 冠处进行 调查。 每个 调查 区以 林班 、 行政 村或自然村 为单位， 划定标准地 。按 每 50hm 2 不少 于 2块 、 每100hm 2 不少 于5 块、 每500hm 2 不少 于15块设置 标准地 ，调查防治 前后 的活 虫数 。标准 地内随机选取
7、20株作 为标准 株， 逐一 进行详 查。 4.4 计算公式 虫 口 减退率及 成灾率计算 方法见 公式（ 1）、（ 2）： DB11/T 1129 2014 3 100 - % = 防治前活虫数 防治后活虫数 防治前活虫数 ） 虫口减退率（ (1) 1000 % = 寄 主 总面积 成 灾面积 ） 成灾率（ (2) DB11/T 1129 2014 4 A A 附 录 A （资料性附录） 杨扇舟蛾的形态特征 A.1 成虫 雌虫体 长 15mm20 mm， 翅展 38mm42mm ；雄 虫体长 13mm 17mm，翅 展 23mm37mm 。灰 褐色 ，前 翅顶角部分 有一 个深 灰褐色 的扇
8、 形斑 ，其 下方 有一较大黑点 。 头顶至胸背 中 央有黑棕色条带 。 A.2 卵 扁圆形 ，直径 1mm，初 产时橙红色 ，孵 化时 暗灰 色， 产于叶 片背面或 小枝 上，单 层排 列。 A.3 幼虫 老熟时 体长 32mm40mm。 头黑褐色 。 全身密披 灰黄 色长毛 ； 身 体灰 赭褐色 ， 背面带淡黄 绿色 ； 背 线、 气门上 线和 气门线暗 褐色 ， 气门 上线 较宽；每 节两侧 各有4 个赭 色小 毛瘤， 环形 排列， 其上有 长毛 。 第1、 8腹节 背面 中央 有1枣红 色大 瘤 ，其 基部 边缘 黑色 ，两侧各 伴有 1个 白点 。 A.4 蛹 体长13mm 18mm
9、，褐色 ，尾 部 有分 叉的 臀棘 。所 结茧 为灰白 色， 椭圆 形。 DB11/T 1129 2014 5 B B 附 录 B （资料性附录） 制剂准备 B.1 CaGV的室内增殖 B.1.1 增殖室条件 温度 25， 光照 L：D=14:10，光源 为白 炽灯 。 B.1.2 饲养植物 新鲜黑 杨派 杨树叶 片。 B.1.3 饲养工具 透明塑料养 虫杯 ，底直径 3.5cm， 顶直径 5.0cm，杯 高 5.0cm。 B.1.4 增殖方法 在 养 虫杯 内放入 15头杨扇舟蛾初孵 幼虫 ，每天 喂饲新鲜杨 树叶 片。 待幼虫 发育 至 3龄末时 ，开始 喂饲带 毒叶 片 （将新鲜 叶 片
10、浸于 浓度 为 1.0 10 6 PIB/ml的 CaGV液体 中 5s， 取出 后 阴干）， 每天 更换 带 毒叶片 。饲喂 期间 及时 清理养虫 杯内 的虫 粪，防 止虫 体 感染杂菌 。待 80%幼虫 死亡 时， 收集 所有幼虫， -10 长期 贮存 。 B.2 CaGV的 提纯 B.2.1 CaGV的 提取 将 B.1.4中 收集 的幼虫加 2倍 无菌水 稀释 ，在高 速组织捣碎 机上 ，粉碎 3min后取出， 先用 三层 纱 布 初 步过滤 ， 再 用 80目筛子 进 一步过滤 ， 滤 液用 16000r/min离心 机离心 ， 滤 液 分为三 层， 上层清液 为 水，弃之 ；中 间
11、浅 褐色 沉淀 为 病毒 粗提 物，保 留； 底部黑色 沉淀 为杂 质， 弃之 。 B.2.2 粗提物的 测定 取 1克病毒 粗提 物稀释至 1000倍， 然后取 1ml稀释液 滴 于血球 计数 板上 ， 盖盖玻片 ， 在显微镜 15 40倍 状态 下计 数，对 角线 取 样， 共取 80小 格，颗粒 边缘 不在 同一小 格内 的不计，并按 公式（ B.1） 计算病毒内 PIB含量。 如果 粗 提物含 量低于 1.25 10 11 PIB/ml， 表明 病毒 粗提 物中杂 质含 量过 高， 应加 2倍无菌水 混匀 ，重 新离心 提 纯， 除杂 质， 直至 含量 合格 。 每 克 PIB含 量=
12、 平均 每 格颗粒体 数 400万 1000 （ B.1） 注：1000 为 稀释倍数。 B.3 CaGV制剂的 配制和 保存 DB11/T 1129 2014 6 B.3.1 配 制 将 B.2.1中含 量合格 的 CaGV加 7%的 盐水 ， 与 50%中性甘油混合 ， 三者重 量比 为 1： 49： 50， 制成 甘油病毒 悬液 。 B.3.2 保存 避 光 、避紫外 线照 射。 4， 可 保存 2年；常 温， 可保 存 6个 月。 B.4 CaGV制剂的质量 检测 用多点 抽样 的方 法 ， 取1ml B.3.2 中保 存的 甘油 病毒 悬 液，按 B.2.2中 方法测 定， CaGV
13、制剂 含量 在1.25 10 9 PIB/ml以上 ，为 合格。 DB11/T 1129 2014 7 参 考 文 献 1 DB11/T 703 2010 美国白 蛾综合 防控技 术规 程 2 DB43/T 151 2000 日 本 赤松 毛虫 质型多角 体病毒及其 杀虫 剂（ J-DSCPV）的 质 量、 生 产、使 用 技 术 规 程 3 萧刚柔 主编 1992 中 国森林 昆虫第 2版 （增订 本）北京： 中国 林业出 版社 1016 1017 4 武春生 方 承莱编著 2003 中 国动 物 志 昆虫 纲 第三十一卷鳞翅目 舟蛾科 北京：科学出 版 社 802804 5 包建 中 古德祥编著 1998 中国 生物 防治 山西：山西 科学技 术出 版社 437 440 _
