1、中华人民共和国国家际准GB/T 14962-94 食品中锚的测定方法Method for determination of chromium in foods 1 主题内容与适用范围本标准规定了用原子吸收石墨炉法和示波极谱法测定食品中总锚的含量。本标准适用于各类食品中总格的含量测定。本标准最低检出限z石墨炉法为0.2ng/mL;示波极谱法为1ng/mL。2第法原子吸收石墨炉法2. 1 原理样品经消解后，用去离子水溶解，并定容到一定体积。吸取适量样液于石墨炉原子化器中原子化，在选定的仪器参数下，铭吸收波长为357.9nm的共振线，其吸光度与恪含量成正比。2. 2 试剂试剂规格需用优级纯试剂，水均
2、需用去离子水，其比电阻在8X10 (以上。2.2.1 硝酸。2.2.2 高氯酸。2.2.3 过氧化氢。2. 2. 4 1. 0 mol/L硝酸溶液。2. 2. 5 锦标准溶液称取优级纯重铭酸饵(l10C烘干2h)1.4135g溶于水中，定容于容量瓶至500 mL.此溶液含恪1.0 mg/mL.为标准储备液。I脑用时，将标准储备液用1.0 mol/L硝酸稀释，配成含锚100ng/时，的标准使用液。2.3 仪器所用玻璃仪器及高压消解罐的聚氟乙烯内筒均需在每次使用前用热1: 1盐酸浸泡1h.用热的1 : 1硝酸浸泡1h，再用去离子水冲洗干净后使用。2. 3. 1 原子吸收分光光度计带石墨炉及错空心阴
3、极灯。2. 3. 2 高温炉。2. 3. 3 高压消解罐。2. 3. 4 恒温电烤箱。2. 4 操作方法2. 4. 1 样品的预处理2.4.1.1 粮食、干豆类去壳去杂物，粉碎，过20目筛，储于塑料瓶中保存备用。2.4. 1.2 蔬菜、水果等洗净晾干，取可食部分捣碎、备用。2.4.1.3 肉、鱼等用水洗净，取可食部分捣碎、备用。2.4.2 样品的消解(根据实验室条件可选用以下任何一种方法消解)2.4. 2. 1 干式消解法中华人民共和国卫生部1994-03-18批准3(L 1994-09-01实施GB/T 14962-94 称取食物样品.51.0g于强士甘塌中，加入12mL优级纯硝酸，浸泡1h
4、以上，将增揭置于电热板r.，小心蒸干，炭化至不冒烟为止，转移至高温炉中，550C恒温2h，取出、冷却后，加数滴浓硝酸于增塌内的样品灰巾，再转入550C高温炉中，继续灰化12h，到样品呈白灰状，从高温炉中取出放冷后，用1%硝酸溶解样品灰，将溶液定量移入5或10mL容量瓶中，定容后充分混匀，即为试液。同时，按上述方法作空白对照。2.4.2.2 高压消解罐消解法取试样O.3000. 500日，于具有聚四氟乙烯内筒的高压消解罐中。加入1.0 mL硝酸、4.0mL过氧化氢液，轻轻摇匀，盖紧消解罐的上盖，放入恒温箱中，从温度升高至140C时开始记时，保持恒温1h , 同时做试剂空白。取出消解罐待自然冷却后
5、打开上盖，将消解液移入10mL容量瓶中，将消解罐用水洗净。合并洗液于容量瓶中。用水稀释至刻度、混匀，即为试液。2.4.3 标准系列的制备分别吸取锦标准使用液(1mL=100 ngCr)O、0.10、O.30、0.50、O.70、1.00、1.50 mL于10mL容量瓶中，用1.0 mol/L硝酸稀释至刻度，混匀。2.4.4 测定2. 4,4.1 仪器测试条件应根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件:波长357.9nm，干燥110C.40s，灰化1000 C .30 s，原子化280WC.5 s。背景校正g塞曼效应或?在灯。2.4.4.2 测定将原子吸收分光光度计调试到最佳状态后，将与祥品含铭量
6、相当的标准系列及样液进行测定，进样量为20L.对有干扰的样品应注入与样液同量的2%磷酸镀溶液(标准系列亦然)。2.5 分析结果的计算X=(A, - A,) X 1 000 = . . .川(1 ) 式中，X样品中锚的含量，g/kg，A，一一样品溶液中锚的浓度.ng/mL，A2 试m空白液中锦的浓度.ng/mL，V 样品消化液定容体积，mLJm一取试样量.g。2.6 精密度变异系数小于10%。3第二法示波极谱法3. 1 原理11 X 1 000 样品经硫酸过氧化氢处理后，错(VI )在氨氯化镀缓冲液中，有，联口比晚和亚硝酸纳存在下，于1.4V左右产生灵敏的极谱波，极谱波峰电流大小与铅含量成正比，
7、与标准系列比较定量。3. 2 试剂3. 2. , 锦标准溶液3. 2. 储备液精确称取1.414 5 g于110C干燥的优级纯重铭酸御(K2Cr2)溶于水中，稀释至500mL.混匀，此30S 液1mL约含1.0 mgCr( V1)。3. 2.1.2 应用液GB/T 14962-94 吸取储备液逐级稀释成1mL约含O.1gCr( VI )的应用液。3.2.2 硫酸(GR)和5.4mol!L硫酸。3. 2. 3 过氧化氢(ARl。3. 2. 4 o. 1 %百里盼蓝指示剂称取O.1 g百里盼蓝，用20%乙醇溶解并稀释至100mL.11ll匀。3. 2. 5 1 mol/L氢氧化纳溶液。3.2.6
8、氨氯化镀缓冲液称取53.5g氯化镀(AR)溶于水中，加入7.2mL氨水(AR).加水稀释至250mL.混匀。3. 2. 7 a联毗唆溶液3. 2.7. IX10mol/La.a联毗院溶液称取O.157 g a联毗呢(AR)溶于水中，稀释至100mL.放冰箱中可长期保存。3.2.7.2 1 X 10-; mol/L，联毗晓溶液吸取10.0mL 1 X 10- mol/La.a联毗院溶液，加水稀释至100mL.混匀。3. 2. 8 6 mol/L亚硝酸销溶液称取41.4 g亚硝酸销(AR)溶于水中，加水稀释至100mL.棍匀，冰箱中保存。3. 3 仪器3.3. JP-2示波极谱仪或类似仪器。3.3
9、. 2 KT-I调压控混电热板。3. 4 操作方法3.4.1 样品处理准确称取12g代表性样品，于150mL三角瓶中，加入3.0mL硫酸.2030mL过氧化氢，放电热板t于160200C加热消化，至得到无色透明溶液(必要时，可补加过氧化氢)。继续加热至过氧化氢完全分解，瓶内出现50，烟雾，取下放冷。加10mL水.2滴百里盼蓝指示剂，以10mol/L氢氧化锅中利，至溶液刚变蓝色，再加20滴，加2mL过氧化氢，于电热板上在160200C下加热溶液，待大部分过氧化氢分解后，滴加10滴0.5%碗化梆溶液，继续加热至过氧化氢完全分解，取下放冷。以水转入50mL 容量瓶中，定容至刻度.取此液5.0mL于2
10、5mL比色管中供分析用.同时作消化空白，3.4.2 标准系列i 25时，比色管中，分别加入0.00、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00和4.00mL标准应用液(相当于0.00、0.02、0.05、O.10、0.20、O.30和0.40gCr).各加1.0 mL 5.4mol!L硫酸.1滴百里盼蓝指示剂，以10mol/L氢氧化纳溶液中和，至溶液刚变蓝色，再加2滴，混匀。3. 4.3 测定于样品和标准系列管中，各加2.5mL氨一氯化镀缓冲液.1.0 mL 1 X 10- mol/L，L联毗院溶液，1. 0 mL 6 mol/L亚硝酸销溶液，稀释至25mL.混匀。在lP-2示波极谱仪上
11、，用三电极，阴极化，原点电位1. 2 V.读取铅极谱峰的二阶导数峰峰高。3. 5 r十赁( 2 ) 式中2X一一样品中锚的含量.mg/kg或mg/L;A 测定用样品消化液中锚的含量，附:V , 样品消化液的总体积，mL;:i Ot V2一-测定用消化液的体积，mL;m 样品质量或体积，g或mL，3. 6 精密度变异系数为15%以下。附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。GB/T 14962 94 本标准第一法由河北省卫生防疫站、河南省食品卫生监督检验所、华西医科大学、南京铁道医学院负责起草g第二法由华西医科大学、中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草。本标准主要起草人第法为张欣棉、王
12、淮州、李发生、田永碧、蒋兆坤;第二法为王光建、回永碧、王淮州。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 307 锚的测定二苯碳眈二阱分光光度法1 原理作物样品应用干灰化和湿法消解相结合的方法进行前处理。样品中硅酸盐含量高时，测定过程中会有硅酸析出，增加分析手续，也易引起错的损失。因此用酸溶解灰分以前要用浓硫酸处理使硅酸脱水，在过滤时除去。1x分以硫酸磷酸溶解，调pH。在酸性溶液中，用高锺酸例将三价锚氧化成六价镑，再用叠氮化纳还原除去过量的高锤酸御。最后六价锋与二苯碳院二脐反应生成紫红色化合物，在540nm波长处测定吸光度。2 仪器2. 1 瓷增塌，50mL 2.2 电热
13、器(电热板或电炉)。2.3 马氟炉(附温度控制调节器)。2.4 分光光度计。3试J3. 1 硫酸、硝酸、磷酸2优级纯。3. 2 2.5 mol/L (l/2H，SO，)硫酸溶液。3. 3 (1十1)磷酸溶液。3. 4 8%硫酸-磷酸混合溶液于400mL水中加入40mL硫酸，40mL磷酸，用水稀释至500mLo 3.50.5%高镜酸梆溶液。3. 6 0.5%叠氮化纳溶液。3. 7 20%尿素溶液。3. 8 O. 25 %二苯碳酿二脐一丙酣溶液。3.9氢氧化销分析纯。3. 10 (1十1)氢氧化镀。3. 11 混合指示剂，0.1%澳甲盼绿销盐水溶液及0.2%甲基橙水溶液等体积混合(pH变化，3.5
14、4. 05 4.30;颜色变化:橙红黄绿蓝绿)。3. 12 锦标准储备溶液z准确称取O.282 9 g重错酸御(优级纯，预先在1l0C烘2川，溶于水后移入1 000 mL容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含错100吨。3. 13 锦标准使用液2准确吸取锦标准储备液5.00mL于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含锚1.00阅。4 操作步骤4. 1 样品灰化准确称取过40目筛的风干作物样品510g，放入50mL瓷地蜗中，在通风橱内电炉上低温炭化。炭化完全后，放入马氟炉内温度升至550C后保持68h使之灰化(中间内外对调一次地揭)。样品呈灰白色，取出冷却。沿端锅壁加硝酸
15、2mL，在电热板上消解蒸干(温度控制在120C左右)。如残存碳粒，再重复滴加硝酸并蒸f.再转入马氟炉于900C灰化15min，立即取出，冷却，样品呈臼色或淡红色。508 4.2 溶样测定4.2.1 溶样2沿柑揭壁加硫酸。.5mL，在电炉上加热至产生浓厚白烟，取下冷却。加0.8%硫酸磷酸混合溶液8mL，jm热微沸3min，不时用破璃棒搅拌。然后，用中速滤纸滤入100mL锥形瓶中，用酸性热水冲洗柑塌及滤纸多次(每次约用2时，水).保持滤液25mL以下。4. 2. 2 调pH.加12滴混合指示剂，用氢氧化钱调至蓝绿色先用浓氢氧化镀调至黄绿色，再用。十1)氢氧化镀调至蓝绿色。再用2.5mol/L硫酸溶
16、液调至刚显红色。加2mL 2. 5mol/L硫酸溶液，放入数粒玻璃珠。4.2.3 氧化2在电炉上加热沸腾后加2滴0.5%高锺酸梆溶液，继续加热微沸15min(在加热过程中若紫红色退去，再补加高锺酸饵，保持紫红色不退)。加20%尿素溶液3滴，继续微沸。趁热滴加0.5%叠氮化纳溶液退色，逐滴加入，同时迅速充分摇动至红色刚好退去。微沸2-3min，于冷水浴中迅速冷却，加(1+1)磷酸0.5mL。4.2.4 显色测定g将试液定量转入25mL比色管中，并用水稀释至刻度，摇匀。加0.25%二苯碳酌二脐丙嗣溶液2mL，立即摇匀。5mm后，在540nm波长处，用30mm比色皿，以水为参比测定吸光度。同时做试剂
17、空白试验。4. 3 工作曲线的绘制吸取锦标准使用溶液:0，0.5.1.00.2. 00.3. 00.5. 00.7. 00 mL，分别于100mL锥形瓶中，用水稀释至20mL左右，以下调pH、氧化、显色测定，操作步骤同试样测定。5 结果计算作物中总锚含量按式(1)计算:总铅(mg/kg)奇式中:m从标准曲线上查得锚的含量，g;W一一样品质量，g0 6说明6. 1 实验中所用水，均是二次重蒸水。( 1 ) 6.2 所用玻璃器皿，用中性洗衣粉和自来水洗净后，再用王水浸泡，然后再用自来水冲洗，用蒸馆水淋洗两次，最后用二次蒸馆水淋洗。6.3 滤液必须清亮，若稍有混浊，对吸光度影响很大，单层滤纸过滤混浊时，可用双层滤纸。6.4 溶样时加0.5mL硫酸后，转动站桐，使端锅内壁上都有硫酸，使脱硅完全。6. 5 o. 1 %澳甲酣绿销盐溶液的配制:称取0.1g澳甲酷绿，放入玛瑞研钵中，加0.01mol/L氮氧化纳溶液14.9mL研磨(先放人少量).研磨至颗粒全部溶解，用水稀释至100mL。509
