1、 中华人民共和国国家标准 肉与肉制品 聚磷酸盐测定 GB/T 9695.9-88 Meat and meat products Method for detection of polyphosphates 本标准等效采用国际标准 1SO 5553 1980肉和肉制品聚磷酸盐的测定 。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了肉与肉制品中聚磷酸盐的测定方法。 本标准适用于肉和肉制品中添加的聚磷酸盐的测定。 2 引用标准 GB 9695.19 肉与肉制品 取样方法 3 原理 用三氯乙酸提取肉和肉制品的聚磷酸盐、提取液经乙醇、乙醚处理后, 用微晶纤维素 薄层层析板分离, 通过喷雾显色检验聚磷酸盐。 4
2、试剂 所用试剂均为分析纯, 所用水为蒸馏水或相当纯度的水。 4.1 三氯乙酸(HG 3 1105)。 4.2 乙醚 (HG 3 1002)。 4.3 95乙醇(GB 679) 。 4.4 薄层板：用薄层用的微晶纤维素制备, 或同样的予制板。 4.5 可溶性淀粉(HG B 3095) 。 4.6 标准参比混合液 在 100mL 水中溶解下列物质： 磷酸二氢钠 NaH2PO4 H2O (GB 1267): 200mg 焦磷酸四钠 Na4P2O7 10H2O (HG 3 1288)： 300mg 三磷酸五钠 Na5P3O10 (HC 3 1288)： 200mg 六偏磷酸钠(NaPO3) x x 1
3、0 (HC 3 1288): 200mg 4.7 展开剂 将异丙醇(HG 3 1167) 140mL,浓度为 135g/L 的三氯乙酸(HG 3 1105)水溶液 40mL, 氢氧化铵(GB 631) 0.6mL 混合均匀, 放入密闭瓶中。 4.8 显色剂 将同体积的浓硝酸(GB 1282) 与浓度为 75g/L 的四水钼酸铵(GB 657) 溶液混合 ,在 100mL 上述溶液中溶解酒石酸(GB 1294) 10g。 (现用现配) 4.9 显色剂 在浓度为 150g/ L 焦亚硫酸钠(HG 3 909)溶液 195mL 与浓度为 200g/L 的亚硫酸钠 (HG 3 1078)溶液 5mL
4、的混合液中溶解 1-氨基-2- 萘 -4-磺酸(HG 3 1528) 0.5g,再在此溶 液中溶解结晶乙酸钠(GB 693) 40g。溶液贮于密闭的棕色瓶中, 于冰箱保存, 可存放一周。 5 仪器和材料 5.1 实验室常规仪器。 5.2 绞肉机, 孔径不超过 4mm。 5.3 实验室用匀浆器。 5.4 涂 0.25mm 厚板的涂布器。 5.5 玻璃板：10 20cm*2, 5 20cm*2。 5.6 层析缸。 5.7 微量注射器。 5.8 吹风机：有冷、热风挡。 5.9 喷雾器。 6 试样 6.1 按 GB 9695.19 取样。 6.2 至少取有代表性的试样 200g,于绞肉机中至少绞两次使
5、其均质化并混匀, 贮于密闭 容器中备用。 6.3 尽快分析试样, 不得超过 5h。 7 分祈步骤 7.1 薄层板的制备 将可溶性淀粉 0.3g 溶解在 90mL 沸水中, 冷却后加入微晶纤维素粉 15g,用匀浆器均化 1min。用涂布器把浆液涂在玻璃板上, 铺成 0.25mm 厚的浆层, 在室温下自然干燥 1h,再在 100烘箱中加热 10min,取出立即放入干燥器中。 也可以用予制的微晶纤维素板。 7.2 提取聚磷酸盐 将 40 60的水 15mL 倒入装有 50g 试样的烧杯中, 搅拌, 不超过 5min。加入三氯乙酸 10g,彻底搅匀。迅速放入冰箱冷却 1h 后 ,取出, 用扇形滤纸过滤
6、。 若滤液混浊, 加固体积的乙醚摇动一次, 用吸管吸出醚弃去, 水相中加入同体积的乙 醇振摇 1min,静置几分钟, 用扇形滤纸过滤。 7.3 薄层层析分离 将适量展开剂倒入层析缸中, 使深度为 5 10mm,盖上盖, 避光静置 30min。 用微量注射器取提取液 3 L, 若是经过澄清处理的取 6 L, 点在距板底边约 2cm 处的 师薄层板上, 尽量使点的直径很小。用吹风机的冷风档吹干。 注：避免热风, 防止磷酸盐水解。 用同法将标准参比液 3 L 点在同一块板上, 距样品点 1 1.5cm,距板底距离与样品点 一致。 打开层析缸盖, 迅速而小心地把点过样的薄层板放入缸中, 盖上盖, 避光
7、在室温下展 开。 展开到溶剂前沿上升约 10cm 处 ,取出薄层板, 放进烘箱中干燥 10min。 (可在室温下干 燥 30min 或用吹风机冷风档吹干) 。 7.4 碳酸盐的检验 展开过的薄层板立在通风橱中, 用喷雾器把显色剂均匀地喷到板上, 出现黄斑。 用吹风机吹干簿层板, 放进 100烘箱至少烘 1h,把硝酸全部除去。 薄层板冷却至室温, 再放入通风橱中, 喷显色剂, 出现明显的蓝斑。 注：不是绝对要喷显色剂, 但此显色剂产生强烈的蓝斑可提高检测效果。 同一试样进行两次检验。 8 分析结果的表示 将试样的斑点与磷酸盐标准参比混合液斑点移动距离相比较。 标准参比混合液磷酸盐的 Rf 值见下表： 名 称 Rf 正磷酸盐 0.70 0.80 焦磷酸盐 0.35 0.50 三聚磷酸盐 0.20 0.30 六偏磷酸盐 0 一般在肉和肉制品中提取磷酸盐的 Rf 值偏低。 注：可用鲜肉的提取液校正磷酸盐的 Rf 值 ,鲜肉中只含正磷酸盐。 附加说明： 本标准由中华人民共和国商业部食品局提出。 本标准由中国肉类食品综合研究中心归口。 本标准由中国肉类食品综合研究中心起草。 本标准主要起草人苏真、王津生。 中华人民共和国商业部 1988-02-25 批准 1989-03-01 实施
