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    GB T 9695.26-1991 肉与肉制品 维生素A含量测定.pdf

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    GB T 9695.26-1991 肉与肉制品 维生素A含量测定.pdf

    1、中华人民共和国国家据准肉与肉制品维生素A含量测定M回tand ml幅tproducts-Method for determlnatioD of vitam恤Acontent 1 主题内容与适用范围本标准规定了肉和肉制品中维生素A含量的测定方法。本标准适用于肉和肉制品中维生素A含量的测定。2 引用标准GB 9695. 19肉与肉制晶取样方法3 原理GB/T 9695.26-91 样品皂化后,用石油酷提取不皂化的维生素A.浓缩后,用高效液相色谱荧光检测器,激发波长340nm,发射波长460nm.分离测定维生素A.用标准外标法计算样品中维生素A的含量。4试J除特别标明外所用试剂金为分析纯,所用水应为

    2、蒸馆水或同等纯度的水。4. 1 氢氧化饵(GB2306) :50%溶液s4. 2 抗坏血酸:10%溶液,4. 3 无水乙醇(GB678); 4.4 石油黯g沸程30-60C; 4. 5 元水硫酸销;4.6 异丙醇$4.7 甲醇(GB683):重蒸后使用g4.8 维生素A标准溶液:O. 2吨/mL称取维生素A标准品10.0mg.用异丙醇溶解,移至50mL棕色容量瓶中,用异丙醇稀刻度。当天配制。5 仪器和设备5. 1 实验室常规设备s5. 2 绞肉机s孔径不超过4mm;5. 3 旋转蒸发器;5.4 液相色谱仪,带荧光检测器p5.5 色谱柱:十八娩基键合固定相柱或其他能分离维生素A的柱子。国家技术监

    3、督局1991-03-26批准1991-12-01实施:n ,j GB/T 9695.26-91 E 试样6. 1 按GB9695. 19取样。6.2 取有代表性的试样200且,于绞肉机中至少绞两次使其混匀,试样应尽快分析。7 分析步骤7. 1 皂化维生素A易被光破坏,试验应避光操作。称取O.55 g试样于150mL棕色皂化瓶中,加入10%抗坏血酸溶液5此,50%氮氧化饵溶液15 mL,乙醇30mL混匀,于80.C水浴上回流加热3060min,使试样溶液清澈.完全皂化后于流水中冷却。7.2提取将皂化后的试样溶液移入125mL分液漏斗中,用30mL石油酷分数次洗皂化瓶,洗液并入分液漏斗中,塞上塞子

    4、,轻摇分液漏斗,避免乳化。静置,待分层后,将水层放入第二个分液漏斗中,隧层留在第一个分液漏斗中。于第二个分液漏斗中倒入10mL石油隧,进行第二次提取,如此进行34次.石油磁层并入第一个分液漏斗中。石油酷层反复用水洗涤,直至水层不呈碱性(用pH试纸检查为止,弃去水层。将分液漏斗中石油隧层经过无水硫酸锅脱水,滤入干燥的棕色圆底烧瓶中.再用石油隧洗涤无水硫酸销和分液漏斗,洗液并入棕色圆底烧瓶中。7.3 分析试样的准备将盛有石油酸提取液的圆底烧瓶与旋转蒸发器连接,于506O-C水浴上减压回收石油酶,待瓶内只剩约12mL液体时,取下烧瓶,用氯气吹干剩余液体,立即加入2.0mL异丙醇溶液,播匀,溶解瓶中维

    5、生素A,塞上塞子,以防溶剂挥发,此为色谱分析样液。7.4 测定7.4. 1 维生素A标准曲线的绘制取维生素A标准溶液1,2,3,4,5,6,7,8mL进行高效液相色谱(HPLC)分析,记录峰面积或峰高,以维生素A量为横坐标,峰高或峰面积为纵坐标绘制标准曲线。若样品中维生素A含量很低,可取维生素A标准溶液(0.2mg/mL)5 mL,用异丙醇溶液定容至50mL容量瓶中,此标准溶液浓度为0.02mg/mLo 如前进行高放液相色谱(HPLC)分析,绘制标准曲线。7.4.2 色谱分析参考条件分析柱z十八烧基键合固定相柱式相同效用的柱;流动相甲醇/水98/2;流动相流速:1 mL/mn; 检测器:荧光检

    6、测器E.:340nm , Em:460nm; 进样屡试样液4_:_6此,记录峰面积或峰高。8 分析结果的计算 I赁公式:A X 1 000 X V X 100 V, X m X 1 000 式中:X 样品中维生素A含量,mgl100 g; 4 根据试样的峰面积或峰高查标准曲线得到j维生素A的量,g;Uf GB/T 9695.26-91 V , -一试样进样分析的体积,L5V, 试样最终稀释的体积,mLm 称样质量,80当符合允许差规定的要求时,取两次测定结果的算术平均值作为结果。S 允许维同一样品同时或相继两次测定结果之差不得超过平均值的30%.附加说明:本标准由中华人民共和国商业部提出。本标准由中国肉类食品综合研究中心归口.本标准由中国肉类食品综合研究中心起草。本标准主要起草人王津生、蒲健。t 丛7


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