1、GB 669686 本标准适用于以甲醇、三氯化磷、氯乙酸为原料，先酯化后胺解合成的氧乐果原药及其加工成的乳油。 有效成分：O，O-二甲基-S-（N-甲氨基甲酰甲基）硫赶磷酸酯 结构式： 分子式：C5H12NO4SP分子量：213.2（按1983年国际原子量表） 1 薄层溴化法（仲裁法） 通过薄层层析法将O，O-二甲基-S-（N-甲基氨基甲酰甲基）硫赶磷酸酯从样品中分离出来。采用硅胶G薄层板，使用氯仿、正己烷和冰乙酸为展开剂，氯化钯为显色剂，刮下氧乐果谱带，然后用溴化法测定。 1.1 仪器 1.1.1 层析缸。 1.1.2 玻璃板：1020cm。 1.1.3 玻璃喷雾器。 1.1.4 碘量瓶：5
2、00ml。 1.1.5 微量注射器：100 l（经重新校正过）。 1.1.7 容量瓶：10ml（经重新校正过）。 1.1.8 吸管：10ml。 1.1.9 恒温水浴。 1.2 试剂和溶液 1.2.1 硅胶G：层析用。 1.2.2 无水乙醇（GB 67878）：分析纯。 1.2.3 冰乙酸（GB 67678）：分析纯。 页码，1/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm 1.2.4 氯仿（GB 62878）：分析纯。 1.2.5 正己烷：分析纯。 1.2.6 碘化钾（GB 127277）：分析纯，15水溶液。 1.2
3、.7 硫酸（GB 62577）：分析纯。 1.2.8 盐酸（GB 62277）：分析纯。 1.2.9 溴化钾（GB 64977）：分析纯。 1.2.10 硫代硫酸钠（GB 63777）：分析纯。 1.2.11 可溶性淀粉（HGB 309559）：分析纯。 1.2.12 氯化钯：分析纯。 1.2.13 溴酸钾-溴化钾溶液：称取1.5g溴酸钾和13g溴化钾溶于少量蒸馏水中，并稀释到1000ml，摇匀。 1.2.14 0.02mol/l硫代硫酸钠标准溶液。 1.2.15 0.1氯化钯显色剂：称取0.1g氯化钯，用1ml0.1mol/l盐酸溶解，用水稀释至100ml。 1.2.16 0.5淀粉指示剂：
4、称取可溶性淀粉1g，加10ml水调匀，搅拌下将其慢慢倒入200ml沸水中，再微沸2min，冷却，取上层清液备用。 1.3 测定手续 1.3.1 硅胶板的制备：采用平铺法涂制（每块板约用45g硅胶G），放水平处风干后，在105110烘箱中烘2h左右，取出，放入干燥器中备用。 1.3.2 操作步骤：称取含氧乐果有效成分约0.5g（准确至0.0002g）的原油或40乳油于10ml容量瓶 中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。吸取该乙醇溶液100 l，在一块已活化好的硅胶板上距底边3cm、两 侧各1.5cm处，将样品点成细直线，把薄层板的两边各刮去5mm宽的硅胶，以防止展开剂沿边缘扩散。在 距薄板的顶边3c
5、m处，平行于顶边刮去1mm宽的硅胶，此带作为展开剂展开的上限。待溶剂挥发后，将板 直立于充满展开剂（氯仿正己烷冰乙酸等于532）饱和蒸汽的层析缸中，板浸入溶剂的深度为 710cm。当展开剂上升到预先划好的界线，从缸中取出，放入通风柜中，在红外灯下干燥，使溶剂挥 发，用氯化钯喷雾显色，将 Rf值为0.35左右的氧乐果黄色谱带，全部转移入500ml碘量瓶中。用少量水冲洗瓶壁，加水至总体积约50ml左右，准确加入10ml溴酸钾-溴化钾溶液及10ml1+1盐酸（或1+4硫酸）*塞紧瓶塞，摇匀，瓶口用少量水液封，于301恒温水浴中放置10min。取出磺瓶，加和5ml15碘化钾溶液，摇匀。放置23min，
6、用硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色。加入3ml0.5淀粉指示剂，继续滴定至溶液的蓝色消失，即为终点。 页码，2/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm *用硫酸酸化时必须预保温至近30。 在同样操作条件下做空白试验。 1.4 计算 样品中氧乐果的百分含量（ X）按式（1）计算。 2 气相色谱法 样品采用氯仿溶解，以邻苯二甲酸二丁酯为内标，使用3XE-60/102AW-DMCS（80100目）键合处理，用具氢火焰离子化检测器的气相色谱仪对氧乐果进行分离和测定。 2.1 仪器 2.1.1 气相色谱仪：采用氢火焰检测器。
7、 2.1.2 记录仪（XWC-100型）：5mV； 2.1.3 色谱柱：3XE-60/102AW-DMCS键合处理，80100目，玻璃U型柱，柱长65cm，内径2mm。 2.2 试剂 如无说明，本标准所使用的其他试剂均为分析纯，色谱用气体应符合色谱分析要求。 2.2.2 担体：102白色担体（80100目）。 2.2.3 二甲基二氯硅烷：色谱扫尾剂。 2.2.4 聚乙二醇-20000：气相色谱固定液。 2.2.5 高纯氮：99.99。 2.2.6 氧乐果标准品：纯度应不低于95； 2.2.7 邻苯二甲酸二丁酯：色谱固定液。 2.3 色谱柱的制备 2.3.1 担体的处理 X（ V1-V2） M0
8、.03553/（0.1 m/10）100 （1）式中： V1空白试验耗用硫代硫酸钠的体积，ml；V2试样耗用硫代硫酸钠的体积，ml；M 硫代硫酸钠的浓度，mol/l；m 试样量，g；0.03553 1/6氧乐果的毫摩尔质量。页码，3/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm 2.3.1.1 酸洗（AW）处理：将100g102白色担体放置于1000ml烧杯中，倒入约400ml浓盐酸，浸泡处理三天，可见烧杯中上层盐酸变成黄棕色。倾去上层盐酸液，用水洗担体几次，再倒入约250ml浓盐酸浸泡。如此处理直至上层盐酸液无色为止
9、。倾去上层盐酸液，用水洗至近中性后，再以蒸馏水洗至中性、无氯离子。烘干、过筛，取80100目。 2.3.1.2 硅烷化（DMCS）处理：将上述经酸洗担体在110下烘2h，取100ml5二甲基二氯硅烷（DMCS）的甲苯溶液（以量筒量取5ml二甲基二氯硅烷，倒入95ml甲苯中），置于小口试剂瓶中，加入20g担体，塞紧瓶塞，摇动10min，过滤甲苯液，用70ml甲苯分两次洗担体，再用甲醇漂洗担体至中性，过滤。在110下烘4h。 2.3.1.3 键合处理：称取1.5g聚乙二醇-20000，置于直径为10cm结晶皿中，加80ml无水乙醇溶解，然后再称取15g经酸洗-硅烷化处理的上述担体，倒入该结晶皿中，
10、在通风柜内、红外灯下不断摇动该结晶皿（注意摇动时不要使溶液溅出），使溶液完全挥发。再放入110烘箱中烘2h。然后装入色谱柱中（不锈钢， 4mm3m），柱前压力为263445Pa（2.6kgf/cm2）（氮气），柱温250下老化24h。将老化后的担体从色谱柱中倒入200ml烧杯中，先以100ml二氯甲烷洗涤，倾去溶剂，再用100ml二氯甲烷分两次洗涤，至上层二氯甲烷溶剂不变色，弃去溶剂。担体在通风柜中、红外灯下干燥备用。 2.3.2 担体的涂渍 准确称取0.15gXE-60于100ml圆底烧瓶中，加入40ml丙酮，摇动使之溶解，再加入5g经酸洗-硅烷化-键合处理的担体，装上回流装置，回流2h，然
11、后静置浸泡12h以上，再将其倒入直径为10cm结晶皿中，在通风柜内、红外灯下不断摇动，使溶剂完全挥发。放入110烘箱中烘2h。 2.3.3 色谱柱的填充和老化 将上述涂渍好的担体装入玻璃柱中，一边缓慢地将担体倒入柱中，一边不断地轻轻以橡皮头敲击柱壁，要求担体在柱中装得紧密均匀（约装1.5g填充物）。然后在色谱柱的两端塞好经硅烷化的玻璃棉。该色谱柱入口端与气化室相连，出口端先不接检测器。在柱温200左右，氮气流量20ml/min下老化24h。在老化过程中，可向色谱柱中注入氧乐果的氯仿溶液，每次1 l，约五、六次，以促使柱的老化。 2.4 测定方法 2.4.1 气相色谱操作条件 温度：柱温150；
12、气化200；检测室180。 气体流量：载气为氮气，25ml/min柱前压力1.4105Pa（1.4kgf/cm2）；空气600ml/min；氢气35ml/min。 进样方法和进样量：先用10 l注射器吸0.20.4 l样品溶液，然后吸2 l空气，一次注入气化室。 相对保留时间：内标邻苯二甲酸二丁酯：1min；氧乐果：1.37min。 气相色谱图如图所示。 页码，4/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm 1邻苯二甲酸二丁酯；2氧乐果 上述所提供的气相色谱操作条件是典型的操作参数，分析者可根据仪器的特点，对操作参数
13、作适当的调整，以期获得最佳的效果。 2.4.2 内标溶液的配制 称取3.0g（准确至0.0002g）邻苯二甲酸二丁酯于500ml容量瓶中，加氯仿稀释至刻度，该内标溶液浓度为0.006g/ml。 2.4.3 标准曲线的制作 标准曲线是按氧乐果标准品与内标邻苯二甲酸二丁酯重量比（ W）和流出峰面积比（ A）作图。称取氧乐果标准品0.035、0.055、0.075、0.095g（准确至0.0002g）左右于带盖的小瓶中，用吸管依次准确加入5ml内标溶液，盖好瓶盖，摇匀。逐个进样进行测定。用半峰宽乘峰高求算峰面积。以氧乐果重量除以内标重量为横坐标，以氧乐果峰面积除以内标峰面积为纵坐标作图，得到一条过原
14、点的直线，其斜率即校正因子（ W/ A）。 2.4.4 样品的测定 称取含氧乐果有效成分0.07g（准确至0.0002g）左右的原油或40乳油于带盖小瓶中，用吸管准确吸入5ml内标溶液，摇匀，进行分析。 2.4.5 计算 由色谱图上求出氧乐果与内标的峰面积比（ A），氧乐果百分含量（ X）按式（2）计算。 页码，5/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm 两种分析方法，两次平行测定结果的最大允许相对偏差为1.5。 （2） 式中： 校正因子；A 氧乐果与内标物的峰面积比；P 氧乐果标准品的百分含量，%；m1内标物重量，g；m2样品重量，g。页码，6/6GB 6696862006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbmM669600K.htm
