1、总帅的测定银盐法(摘自GB/T5009. 11-1996) 1 原理样品经消化后，以碟化侨、氯化亚锡将高价碑还原为三价碎，然后与镑粒和酸产生的新生态氢生成呻化氢，经银盐溶液吸收后，形成红色胶态物，与标准系列比较定量。2 试剂除特别注明外，所用试剂为分析纯，水为去离子水。2. 1 硝酸。2.2硫酸。2.3盐酸。2.4 氧化续。2. 5 无碑铸粒。2.6 硝酸-高氯酸混合溶液(4+1):量取80mL硝酸，加20mL高氯酸，混匀。2.7 硝酸筷溶液(150g!L):称取15g硝酸续Mg(N03)2 6H20.溶于水中，并稀释至100mL。2.8 腆化饵溶液(150g!L):贮存于棕色瓶中。2.9 酸
2、性氯化亚锡溶液z称取40g氯化亚锡(SnC12 2H20).加盐酸溶解并稀释至100mL.加入数颗金属锡粒。2.10 盐酸(1十1):量取50mL盐酸，加水稀释至100mL。2.11 乙酸铅溶液(100g!L)。2. 12 乙酸铅棉花.用乙酸铅溶液(100g!L)浸透脱脂棉后，压除多余溶液，并使疏松，在100C以下干燥后，贮存于玻璃瓶中.2.13 氢氧化纳溶液(200g!L)。2.14 硫酸(6+94):量取6.0mL硫酸，加于80mL水中，冷后再加水稀释至100mLo 2. 15 二乙基二硫代氨基甲酸银-三乙醇胶-三氯甲烧溶液g称取0.25g二乙基二硫代氨基甲酸银(C,H5) ,NCS2Ag
3、 .置于乳钵中，加少量三氯甲烧研磨，移入100mL量筒中，加入1.8 mL三乙醇胶，再用三氯甲烧分次洗涤乳钵，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烧稀释至100mL.放置过夜。滤入棕色瓶中贮存。2.16 碑标准溶液z准确称取O.132 0 g在硫酸干燥籍中干燥过的就在100C干燥2h的三氧化二畔，加5mL氢氧化销榕液(200g!L).溶解后加25mL硫酸(6+94).移入1000mL容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度，贮存于棕色玻塞瓶中.此溶液每毫升相当于0.10nlg碑。2. 17 碑标准使用液g吸取1.0mL碎标准溶液，置于100mL容量瓶中，加1mL硫酸(6+94).加水稀释至刻度，此溶液每
4、毫升相当于1.0周碑。3 仪器3. 1 可见分光光度计。3. 2 1则呻装置:见图1.523 70 50 斗军。N叫昌。一=1 4 150 mL 1-1. 5 1-150 时，锥形瓶，2 导气管，3 乙酸铅棉花，4-10 mL刻度离心管因13.2. 1 100150 mL锥形瓶:19号标准口。3. 2. 2 导气管:管口19号标准口或经碱处理后洗净的橡皮塞与锥形瓶密合时不应漏气。管的另一端管径为1.0 mm. 3.2.3 吸收管，10mL刻度离心管作吸收管用。4 样晶消化4. 1 硝酸-高氯酸-硫酸法4. 1. 1 粮食、粉丝、粉条、豆干制品、糕点、茶叶等及其他含水分少的固体食品z称取5.00
5、g或10.00g 的粉碎样品，置于250-500mL定氮瓶中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、1015mL硝酸高氯酸混合液，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷.沿瓶壁加人5mL或10mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸-商氯酸混合液至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口臼烟胃净后，瓶内液体再产生臼烟为消化完全，该溶液应澄明无色或徽带黄色，放冷。在操作过程中应注意防止爆沸或爆炸。加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生臼烟为止，如此处理两次，放玲。将冷后的溶液移入50mL 或100时，容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并人容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后
6、的溶液每10 mL相当于1g样品，相当加入硫酸量1mL.取与消化样品相同量的硝酸高氯酸混合液和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。524 4. 1. 2 蔬菜、水果称取25.00 g或50.00 g洗净打成匀浆的样品，置于250500mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠、1015mL硝酸高氯酸混合液，以下按4.1. 1自放置片刻起依法操作，但定容后的溶液每10 mL相当于5g样品，相当加入硫酸1mLo 4. 1. 3 酱、酱油、醋、冷饮、豆腐、腐乳、酱臆菜等:称取10.00 g或20.00 g样品(或吸取10.0mL或20.0 mL液体样品).置于250500mL定氮瓶中.:1m数粒玻璃珠、515mL硝酸-
7、高氯酸混合液。以下按4.1. 1自放置片刻起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于2g或2mL样品。4. 1. 4 含乙醇饮料或含二氧化碳饮料:吸取10.00mL或20.00mL样品，置于250500mL定氮瓶中。加数粒玻璃珠，先用小火加热除去乙醇或二氧化碳，再加510mL硝酸-高氯酸混合液，混匀后，以下按4.1. 1自放置片刻起依法操作，但定容后的溶液每10mL相当于2mL样品。吸取510mL水代替样品.JJn与消化样晶相同量的硝酸离氯酸混合液和硫酸，按相同操作方法做试剂空白试验。4. 1. 5 含糖量高的食品称取5.00g或10.0g样品，置于250500mL定氮瓶中，先加少许水使湿润，
8、加数粒玻璃珠、510时，硝酸高氯酸混合后，摇匀。缓缓加入5mL或10mL硫酸，待作用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热(糖分易炭化).不断沿瓶壁补加硝酸-高氯酸混合液，待泡沫全部消失后，再加大火力，至有机质分解完全，发生自烟，溶液应澄明元色或微带黄色，放冷。以下按4.1. 1自加20 mL7j(煮沸起依法操作。4. 1. 6 水产品z取可食部分样品捣成匀浆，称取5.00g或10.0 g(海产藻类、贝类可适当减少取样量) 置于250500时，定氮瓶中，加数粒玻璃珠.510mL硝酸商氯酸混合液，混匀后，以下按4.1. 1自沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸起依法操作。4.2 硝酸一硫酸法以硝酸代替硝酸
9、高氯酸混合液进行操作。4. 3 灰化法4. 3. 1 粮食、茶叶及其他含水分少的食品2称取5.00g磨碎样品，置于瑞锅中，加1g氧化缓及10mL 硝酸续溶液，混匀，浸泡4h。于低温或置水浴锅上蒸干，用小火炭化至无烟后移人马弗炉中加热至550C.灼烧34h.冷却后取出。加5mL水湿润后，用细玻棒搅拌，再用少量水洗下玻棒上附着的灰分至瑞锅内。放水浴上蒸干后移人马弗炉550C灰化2h.冷却后取出。加5mL水湿润灰分，再慢慢加人10mL盐酸。+l).然后将溶液移入50mL容量瓶中，均揭用盐酸。+1)洗涤3次，每次5mL.再用水洗涤3次，每次5mL，洗液均并人容量瓶中，再加水至刻度，混匀。定容后的溶液每
10、10mL相当于1g样品，其加入盐酸量不少于(中和需要量除外)1.5 mL。全量供银盐法测定时，不必再加盐酸。按同一操作方法做试剂空白试验。4.3.2 植物油:称取5.00g样品，置于50mL瓷增塌中，加10g硝酸镖，再在上面覆盖2g氧化馍，将增垠量小火上加热，至刚冒烟，立即将增揭取下，以防内容物溢出，待烟小后，再加热至炭化完全。将增锅移至马弗炉中.550C以下灼烧至灰化完全，冷后取出。加5mL水湿润灰分，再缓缓加人15mL盐酸。十l).然后将溶液移入50mL容量瓶中，柑塌用盐酸(十1)洗涤5次，每次5mL.洗液均并入容量瓶中，加盐酸。+1)至刻度，混匀。定容后的溶液每10时，相当于1g样品，相
11、当于加人盐酸量(中和需要量除外)1.5 mL。按同一操作方法做试剂空白试验。4. 3. 3 水产品:取可食部分样品捣成匀浆，称取5.00g置于地揭中，加1g氧化侯及10mL硝酸筷溶液，混匀，浸泡4h 0以下按5.3. 1自于低温或置水浴锅上蒸干起依法操作。5 分析步骤吸取一定量的消化后的定容溶液(相当于5g样品)及同量的试剂空白液，分别置于150mL锥形瓶中，补加硫酸至总量为5mL.JJn水至5055mL。525 5. 1 标准曲线的绘制吸取0.2.0.4.0.6.0.8.0.10.0mL碑标准使用液(相当0.2.0.4.0.6.0.8.0.10.。g).分别置于150 mL锥形瓶中，加水至4
12、0mL.再加10mL硫酸0+1)。5.2 用湿法消化液于样品消化液，试剂空白液及碑标准溶液中各加3mL腆化御溶液(150g/L).0.5 mL酸性氯化亚锡溶液，混匀，静置15mino各加入3g镑粒，立即分别塞上装有乙酸铅棉花的导气管，并使管尖端插入盛有4mL银盐溶液的离心管中的液面下，在常温下反应45min后，取下离心管，加三氯甲烧补足4 mL。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长520nm处测吸光度，绘制标准曲线。5. 3 用灰化法消化液取灰化法消化液及试J空白液分别置于150mL锥形瓶中。吸取0.2.0.4.0.6.0.8.0.10.0mL碑标准使用液(相当0.2.0.4.0.6.0.8
13、.0.10.0问呻).分别置于150mL锥形瓶中，加水至43.5mL.再加6.5 mL盐酸。以下按6.2自于样品消化液起依法操作。6 结果计算碑的含量按式(1)计算2x=m， - m,) X 1 000 m X Vz月T，X 1 000 式中:X样品中碑的含量.mg/kg(mg/L); m , 测定用样品消化液中碑的质量，g;m，一-试剂空白液中碎的质量，.g，m 样品质量(体积).以mL)，V，-一-样品消化液的总体积，mL;V, 测定用样品消化液的体积，mLo结果的表述:报告算术平均值的二位有效数。7 允许差相对相差运10%。526 ( 1 ) 总肺的测定氢化物原子荧光光谱法1 原理在酸性
14、环境中，硫腺使五价呻还原为三价碑，自身被氢化为甲眯化二硫=H ,N AS02+2 H ,N C土SAsO，-+ / 棚氧化纳(或御)与酸作用生成大量新生态氢:H2N NH / c-S-S一一c+H,O / HN NH NaBH.十H+十3H20二主H，BO，+Na+十8H.Z价呻再被新生态氢还原为气态的呻化氢逸出:AsO+6H +3H+AsH， t +3H,O 叫化氢被氧气和反应中产生的氢气载入石英管炉中，受热后即分解为原子态碑，在碑灯发射光的激发下产生原子荧光:2AsH32As十3H22试剂2. 1 棚氢化俐的浓度:删氢化铀的水溶液不太稳定，并且浓度越稀越不稳定，必须加入NaOH以提高其稳定
15、性;但NaOH又不能加得太多，否则会剧烈降低反应时的酸度。我们采用进口试剂按本方法配制，保存于冰箱中两周内效果不变。国产试剂纯度较低，稳定性也较差。2. 2 唰氢化俐的用量:在本仪器上跚氢化销溶液的用量是通过加液时间来控制的，经实测在我们的仪器上流速约为0.3mL/s.实验证明，棚氢化纳溶液的用量对测定灵敏度有显著影响。当用量少时，由于还原力弱，灵敏度就低;当用量过多时，由于发生大量氧气产生稀释作用，灵敏度也降低。最优的用量是与具体的反应条件(跚氢化饷的浓度和碱度、标液的加入体积和酸度)密切相关的。在本方法条件下，10 g/L的棚氧化纳加入5s(约).5 mL)效果最好。2. 3 硫酸的用量在
16、生成碑化氧的反应中酸性介质可用硫酸、盐酸或其他酸，由于在样品消解时要加入硫酸，故本方法选用硫酸作介质。在实验所得的荧光强度硫酸浓度曲线上，荧光强度起初随着酸度的增加而急剧增大，继之由于氢气的稀释作用而逐渐减少，约在2%(V!V)酸度时达到平台区。考虑到棚氢化锅溶液的流速以及消解后硫酸的剩余量可能出现的变异，本方法中硫酸的用量选择了相当于平台区中部5%(V /V)浓度的量。2.4 硫腺的影响=实验证明单用棚氢化纳不能将五价呻定量地还原为碑化氢，此时还原率只有70%80% ;而加入硫服于还原反应后便能达到完全。由于样品经消解后绝大部分碑已被氧化为五价，所以加人硫服是必需的。3 样晶消解3- 1 湿
17、消解对于很多加酸后反应剧烈的样品，应该冷处理较长时间(或过夜).以防止产生大量泡沫造成损失。必须避免消解液碳化，因碳可能把碑还原为元素态而造成大量损失。消解中加入的酸(主要是硝酸)是造成空白值的主要因素，如果不同的样晶消耗的酸量差异大，其空白值差异也大，此时应做各自的试剂?白。3. 2 干灰化硝酸续在灼烧时放出氧，起着促进灰化的作用。150g/L砂酸铁溶液10mL分解后生成氧527 化筷O.23 g，加上加人的氧化筷共1.23 g，以后恰能被(十)盐酸10mL中和。氧化续除了保温传热以外，更起着防止碑挥发损失的作用，因为灼烧中升华出的三氧化二呻能被它固定下来。因此在灰化前，应将氧化缕粉末仔细覆
18、盖在全部样品干渣的表面。2. 4 干扰在研究对碑测定的干扰时，考虑了能生成氢化物的元素和在食品中经常存在的元素，因此选择了镑、铅、锡、铜、钵五种进行试验。当加入一定浓度倍数的试验离子后使结果偏离10%以上时，即判为有干扰。结果如下:镑J倍以下无干扰e铅，20倍以下无干扰;锡，30倍以下无干扰g铜，200倍以下无干扰;镑.200倍以下无干扰。5 研制结果5. 1 实验用仪器:XDY-2A双道原子荧光光度计。5. 2 仪器条件:经系统试验结果，本方法采用本仪器的最佳测量条件为2光电倍增管负高压:400V碎空心阴极灯电流，35mA。原子化器:炉温85WC，炉商7Cffio 氯气流速:载气600mL/
19、min，屏气800mL/min。测量方式z荧光强度或浓度直读，读数方式为峰面积。延迟时间:1 s，读数时间为1580 样液和标液进样体积:2mL。砌氢化纳溶液浓度:IOg/L，加液时间580 硫服溶液用量:50日/L.加2.5mL。5.3 综合全部研究和验证结果，同时顾及到在实际应用中应有适当的宽容度，订出本实验条件下的各项性能参数如下:标准曲线线性范围为0-200ng/mL; 标准曲线相关系数(r)O.9990; 方法的检出限为2ng/mL(按低浓度测量时的三倍标准差计算)，若取样量以5g(mL)计，则对样品的最低测定浓度为0.01mg/kg(或mg/L)。精密度:湿消解法重复测定相对标准差(RSD)IO%;干灰化法囊复测定的相对标准差(RSD)15%。准确度z湿消解法测定的回收率为90%-105%:干灰化法测定的回收率为85%-100%。528
