1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 22244-2008 保健食品中前花青素的测定2008-07-31发布Determination of procyanidins in health foods 中华人民共和国卫生部鲁士中国国家标准化管理委员会保叩2008叩门-01实施别吕本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准参加起草单位:吉林省疾病预防控制中心。本标准主要起草人:杨大进、肖品、方从容、王竹天、刘宏涛。本标准为首次发布。GB/T 22244-2008 I GB/T 22244-2008 保健食品中前
2、花青素的测定1 范围本标准规定了保健食品中前花青素的测定方法。本标准适用于以葡萄籽、葡萄皮、沙健食品中前花青素的测定。本标准的检测限:方法2 原理前花青素易溶-jflJ物在加热的酸性互效液相色谱，经-118花青素含量。3. 1 甲醇(C3.2 甲薛(C3.3 正丁醇3.4 3.5 3.6 3. 7 3.8 3.9水(H20):为33.10 2%硫酸铁镀容至100mL。3. 11 前花青素标准品:纯4 仪器和设备 4. 1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器。4.2 超声波清洗器。4.3 离心机:4 000 r/mino 5 分析步骤5. 1 试样处理5. 1. 1 片JfIJ:取20片试样，研磨成
3、粉状。5.1.2 胶囊:取20粒胶囊内容物，混匀。法国松树皮提取物等为主要原料制造的保、准品精确至O.000 1 g)，用甲1 GB/T 22244-2008 5. 1.3 软胶囊:挤出20粒胶囊内容物，搅拌均匀，如内容物含油，应将内容物尽可能挤完全。5. 1.4 口服液:摇匀后取样。5.2 提取5.2.1 固体粉状试样:根据试样含量称取50mg_ 500 mg(精确至0.001g)试样于50mL棕色容量瓶中，加入30mL甲醇(3.1)，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇(3.1)至亥度，摇匀，离心(3000 r/min, 10 min)或放置至澄清后取上清液备用。5.2.2 含油试样:
4、根据试样含量称取50mg-500 mg(精确至0.001g)试样置于小烧杯中，用5mL二氯甲烧使试样溶解，并倒入50mL容量瓶中，再用甲醇(3.1)多次洗烧杯，并倒入50mL棕色容量瓶中，用甲薛(3.1)定容至刻度，摇匀。5.2.3 口服液:根据试样含量准确吸取1mL,._, 5 mL样液，置于50mL容量瓶中，加甲醇(3.1)至刻度，摇匀。5.3 水解反应将正丁醇与盐酸按95: 5的体积比混合后，取出15mL置于具塞锥瓶中，再加入0.5mL硫酸铁镀溶液和2mL试样溶液，混匀，置沸水浴回流，精确加热40min后，立即置冰水中冷却，经0.45m滤膜过滤，待进高效液相色谱分析。5.4 标准曲线制备
5、吸取标准溶液(3.12)0. 10、0.25、0.50、1.0、1.5 mL置于10mL棕色容量瓶中，加甲醇(3.1)至刻度，摇匀。各取2mL测定，处理方法同5.3，以峰高或峰面积对浓度作标准曲线。5.5 液相色谱参考条件5.5.1 色谱柱:耐低pH型的ODSC18柱，4.5mmX150 mm，5mo 5.5.2 柱温:35oc。5.5.3 检测器:紫外检测器。5.5.4 检测波长:525 nmo 5.5.5 流动相z水+甲醇(3.2)十异丙醇十甲酸=73十13十6+8。5.5.6 进样量:10L。5.5.7 流速:1.0 mL/min。5.5.8 色谱分析:取标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，
6、以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。5.6 注意事项实验过程中应避免阳光直射。6 结果计算2 试样中前花青素的含量按式(1)进行计算:式中:x= X1 XVXj 一z X一一试样中前花青素的含量，单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L); X1一一从标准曲线上得到的含量，单位为毫克每毫升(mg/mL); V一一一试样定容体积，单位为毫升(mL); f一一-稀释倍数;m一一试样的质量(或体和，单位为克或毫升(g或mL)。计算结果保留三位有效数字。. ( 1 ) GB/T 22244-2008 7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。8 色谱图在上述色谱条件下的色谱图见图1，._图20吸o.10 O 盖O0.080 0.070 0.060 0.050 0.040 0.030 0.020 0.010 0.000 霞定2 4 6 8 10 12 吸0.100EO 090 0.080 0.070 0.060 0.050 0.040 0.030 0.020 0.010 0.000 图1前花青素标准色谱图氧定2 4 6 图2前花青素试样色谱圈t/min 12 t/min
