1、lCS 65150B 50中华人民 共和J，、7。H雷园国国家标准GBT 18654112008养殖鱼类种质检验第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定Inspection of germplasm for cultured fishesPart 11：Determination of amino acids content in muscle20080627发布 2008100 1实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局辔士中国国家标准化管理委员会及仲刖 置GBT 18654(养殖鱼类种质检验分为F列部分第1部分：检验规则；第2部分：抽样方法；第3部分：性状测定；第4部分：年龄与生长的测定；
2、第5部分：食性分析；第6部分：繁殖性能的测定；第7部分：生态特性分析；第8部分：耗氧率与临界窒息点的测定；第9部分：含肉率测定；第10部分：肌肉营养成分的测定；第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定；第12部分：染色体组型分析；第13部分：同工酶电泳分析；第14部分：DNA含量的测定；第15部分：RAPD分析；本部分为GBT 18654的第11部分。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本部分起草单位：上海水产大学、中尉水产科学研究院长江水产研究所。本部分主要起草人：李思发、赵金良、徐忠法、蔡完其、邹曙明。GBT 18654112008养殖
3、鱼类种质检验第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定GBT 186541120081范围GBT 18654的本部分规定了鱼类肌肉中主要氨基酸含量测定的试剂与材料、仪器和设备、抽样、分析步骤和结果判定。本部分适用于鱼类肌肉中主要氨基酸含量的测定，不适用于色氨酸含量的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过GBT 18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GBT 14769食品中水分的测定方法GB
4、T 186541-2002养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则GBT 186542养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法GBT 1865492002养殖鱼类种质检验第9部分：含肉率测定GBT 18654102002养殖鱼类种质检验第10部分：肌肉营养成分的测定3试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。31柠檬酸三钠。32盐酸(HCI)。33硫代双乙醇。34苯酚。 35 pH22柠檬酸缓冲液：柠檬酸三钠196 g，用水溶解后，加入盐酸165 mL、25硫代双乙醇5 mL、苯酚1 g，最后定容至1 000 mL。36冷冻剂(液氮或干冰加丙酮)。37聚乙烯
5、塑料袋。38标签。4仪器和设备41分析天平：感量为0000 1 g。42氨基酸自动分析仪。43粉碎机。44分样筛：孔径为025 mm，常温干燥。45喷灯。46真空泵。1GBT 1865411200847恒温_r燥箱。48水解管(球形或圆底试管，窬量1 5 mI。20 mL)。49浓缩器(可控温、减雕)或真空r燥器。410磨口瓶。411 25 ml，容照瓶。5抽样51试验鱼抽样按GBT 186542的规定执行。52样品数H为同一种类同龄鱼5尾7尾。6分析步骤61采样611样品鱼报告单样品鱼报告单按GBT 186549 2002中53的规定执行。612封条和标签试样鱼送至实验室前应用聚乙烯塑料袋包
6、装，贴r封条与标签，标签内容按GBT 186549 2002中54的规定执行。613试样鱼的运输与贮存按GBT 186549 2002中55的规定执行。62试样处理621称重按GBT 1865410 2002中51的规定执行。622全长、体长测量按GBT 1865410 2002巾52的规定执行。623鱼肉采取按GBT 1865410-2002中53的规定执行。624鱼肉绞碎将所采的鱼肉样晶用绞肉机反复绞碎三次，混合均匀。625试样制备将样品放在50-60恒温r燥箱中干燥至恒重，干燥皿中冷却至常温后在粉碎机中碾碎，全部通过孔径为025 mm的分样筛，充分混匀后装人磨口瓶中备用。63氨基酸测定6
7、31称取样品30 mg左右，置于水解管中。侧时称取另一份样品，按GBT 14769的规定测定其水分含量。632在水解管中加入6 molI。盐酸10 mL，在距管几2 cm左右处，用喷灯灼烧并拉一细颈。再将管子放入冷冻剂(液氮或干冰加丙酮)中，冷却至溶液璺固体后取出，接在真空泵抽气管f=，使减压至7 Pa后封L。将封好口的水解管放在1104-1的恒温干燥箱内，水解22 h24 h后取出冷却。打开水解管，将水解液转移到25mL容量瓶内，定容后过滤，吸取滤液1mL，置于浓缩器(d550)或真空干燥器内真空干燥，残留物用1 mL2 mL去离子水溶解后蒸干，如此反复进行1次2次，最后加入pH 22缓冲液溶解，供氨基酸自动分析仪测定。633氨基酸含量按式(1)计算： 而10“25loo式中：x 某种氨基酸残基，；A 每毫升水解液中的某种氨基酸含量，单位为毫克(mg)m 样6的质量，单位为毫克(mg)；H 样6的水分含量，。7结果判定6BT 1865411200871 个体测定结果的判定按(；BIT 186541 2002中61的规定执行。将所有测定结果逐一与标准对照，几符合标准规定的判定为合格；凡不符合标准或与标准规定有显著差异的判定为不合格。72样品群体的判定根据71的判定结果，计算出被检样品中合格品的百分率。
