GB T 14926.7-1994 实验动物 小肠结肠炎耶氏菌检验方法.pdf
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GB T 14926.7-1994 实验动物 小肠结肠炎耶氏菌检验方法.pdf
1、GBT 14926.794 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小肠结肠炎耶氏菌的检验，适用于实验小鼠和大鼠。 2 引用标准 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂 3 材料和试剂 3.1 SS 琼脂 GB 4789.28中3.21。 3.2 DHL 琼脂 GB 4789.28中3.19。 3.3 PBS 缓冲液 GB 4789.28中3.45。 3.4 0.5NaCl、0.5KOH溶液（NK）。 3.4.1 成分 3.4.2 制法：上述成分溶解后灭菌备用。 3.5 TSI 琼脂 GB 4789.28中3.24。 3.6 氨基酸脱羧酶培养基 GB 4789.28中2.
2、12。 3.7 糖发酵管 GB 4789.28中2.2。 3.8 半固体琼脂 GB 4789.28中3.28。 3.9 苯丙氨酸培养基 GB 4789.28中2.11。 3.10 尿素琼脂 GB 4789.28中2.15。 3.11 小肠结肠炎耶氏菌诊断血清。 4 检验程序 氯化钠 5g氢氧化钾 5g蒸馏水 1000mL页码，1/3GB/T 14926.7942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92607K.htm 5 操作步骤 5.1 采样，取回盲部内容物。 5.2 分离培养：将检样按110的比例，接种PBS中，放4冷增菌21日，每周分离一次。分离
3、时，将冷增菌培养物吸出1mL，加入0.1mL0.5NaCl，10KOH溶液，使KOH的最终浓度为0.250.5，混合，作用1min，然后立即用SS和DHL平皿分离，放25温箱培养48h，挑选可疑菌落;其菌落大小为12mm，不透明或半透明，毛玻璃样，用接种针挑取时，有点韧性。将挑选的菌落接种TSI，25培养2448h，凡斜面和底层由于发酵糖类而产酸、变黄者为可疑反应。 5.3 将可疑菌株接种一支尿素琼脂，一支蔗糖，两支半固体，其中一支放37培养，其它均于25培养2448h观察结果。尿素阳性、蔗糖阳性，25半固体有动力，37培养无动力，可初步定为小肠结肠炎耶氏菌。 5.4 血清学分型： 有条件者，
4、可用小肠结肠炎耶氏菌诊断血清进行分型。 5.5 小肠结肠炎耶氏菌与相关细菌的鉴别，见下表。 页码，2/3GB/T 14926.7942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92607K.htm小肠结肠炎耶氏菌与相关细菌的鉴别 注：阳性：阴性：D：不定：W：多数不产气，少数产少量气 。 6 结果报告 凡符合上述各项实验结果者，均可发出报告。 凡不符上述各项实验结果者，均可报告阴性。 特 性耶 尔 森 氏 菌哈大尼亚柠 檬 酸 杆 菌大肠艾希氏菌肠杆菌属克 雷 伯 氏 菌沙 门 氏 菌变 形 杆 菌巴 斯 德 氏 菌氧化酶动力3725葡萄糖产气柠檬酸盐（sinmons）Vp赖氨酸H2S苯丙氨酸DNA G+C mol +-+D+-+-D+-+-W+D+-+-+D+D-+-+-DD-D-D+-+DD+-D-+D-+-46 504849505248525260535850 5338 414045页码，3/3GB/T 14926.7942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92607K.htm
